Protocole - Mêle-toi de l`ADN de tes oignons!

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Section Enseignants
Protocole à faire en classe : Mêle-toi de l’ADN de tes oignons!
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Mêle-toi de l’ADN de tes oignons!
Clientèle : 13 ans et plus
Type de ressource : expérience à faire en classe.
Objectif
Permettre aux élèves d’extraire de l’acide désoxyribonucléique (ADN) des tissus d’un organisme vivant (l’oignon)
à l’aide de produits d’épicerie.
Description de l’activité
L’ADN est le matériel génétique de tous les organismes vivants. C’est dans cette molécule que se trouve toute
l’information nécessaire pour créer et diriger la machinerie chimique de la vie. Avant de pouvoir étudier l’ADN
dans le cadre de recherches dans un laboratoire universitaire, d’analyses médicales ou d’enquêtes criminelles,
les scientifiques doivent être capables de l’extraire du tissu où il est contenu.
Préparation
Une semaine avant l’activité, vous pouvez voir avec vos élèves, soit dans le cadre du cours, soit en leur donnant
une courte recherche à faire, les différents points suivant sur l’ADN :
¾ L’emplacement de l’ADN : où est situé l’ADN dans un tissu et dans une cellule eucaryote?
¾ La composition de l’ADN : de quoi est composé l’ADN?
¾ La composition de la membrane cytoplasmique d’une cellule eucaryote : quelle est la composition de la
membrane d’une cellule?
¾ Le protocole d’extraction de l’ADN : un scientifique veut extraire l’ADN d’une souris afin de la cloner. Quelles
sont les étapes qu’il doit suivre afin d’avoir de l’ADN pur (sans protéines, lipides et glucides) provenant de la
souris?
Matériel
• un oignon;
• 100 mL d’une solution d’attendrisseur de viande (0.05 g / mL d’eau) et de savon à vaisselle (0.01 mL / mL
d’eau);
• 50 mL d’éthanol 95 % conservé au congélateur ou sur glace;
• bain de glace;
• coton fromage;
• bâton à mélanger en verre;
• cinq (5) éprouvettes;
• béchers de 250, 500 et 1000 mL;
• mixeur;
• balance;
• bain-marie ajusté à 60º C;
• chronomètre.
Méthode
Les élèves doivent, en équipes de quatre (4), extraire l’ADN d’un oignon. Cette activité dure cinquante (50)
minutes et nécessite uniquement des produits de cuisine et de la verrerie de laboratoire.

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Manipulation
1. Hacher l’oignon.
2. Verser la solution d’attendrisseur de viande (100 mL) dans un bécher de 250 mL et chauffer à 60º C dans un
bain-marie.
3. Ajouter 50 g d’oignon haché à la solution d’attendrisseur de viande. Mélanger et laisser reposer pendant 15
minutes à 60º C.
4. Enlever le bécher du bain-marie et le mettre immédiatement sur la glace pendant cinq minutes.
5. Verser le mélange dans le mixeur.
a) Mélanger à basse vitesse pendant 45 secondes et arrêter.
b) Mélanger à haute vitesse pendant 30 secondes et arrêter.
6. Verser le mélange sur du coton fromage plié en quatre placé au-dessus d’un bécher de 500 mL qui est déjà
sur la glace.
7. Presser délicatement le filtrat.
8. Verser environ 5 mL du filtrat dans chacune des éprouvettes qui sont déjà sur la glace. Placer les éprouvettes
de façon à ce qu’elles soient inclinées.
9. Verser environ 10 mL d’éthanol 95% froid sur la paroi intérieure de chaque éprouvette.
Discussion et Conclusion
¾ Qu’observe-t-on? :
Réponse : Une substance filamenteuse dans la solution qui est l’ADN. Pour récupérer l’ADN, il faut
l’enrouler doucement sur le bâton présent dans l’éprouvette. Cet ADN peut maintenant être utilisé pour des
analyses ou d’autres manipulations.
¾ Pourquoi était-il nécessaire de hacher l’oignon et de le mélanger en présence d’une solution d’attendrisseur
de viande?
Réponse : Hacher et mélanger l’oignon permet de briser et déchiqueter les tissus de l’oignon afin que la
solution d’attendrisseur de viande puisse faire effet et s’attaquer à la paroi et la membrane des cellules.
¾ Pour extraire l’ADN, il faut que le noyau sorte de la cellule. Les sels et le savon à vaisselle contenus dans la
solution d’attendrisseur de viande dégradent la membrane des cellules d’oignon, la membrane nucléaire du
noyau et les protéines qui seraient toujours liées à l’ADN. Que se passe-t-il avec le savon lors de l’extraction
de l’ADN de l’oignon?
Réponse : La membrane cellulaire est composée de protéines et de lipides. En présence de savon, les
lipides et les protéines sont emprisonnés dans les sphères de savon et la membrane cellulaire est brisée.
¾ Pourquoi faut-il mettre le mélange filtré sur la glace pour le reste des étapes de l’extraction de l’ADN?
Réponse : Maintenir le mélange filtré à la température la plus froide possible permet de ralentir l’action des
enzymes naturellement présentes dans les cellules d’oignon. En effet, il existe dans les cellules des
nucléases qui pourraient s’attaquer à l’ADN et le dégrader.
¾ Pourquoi utilise-t-on de l’éthanol à 95 %?
Réponse : Lorsque l’ADN est libéré de son noyau et de la cellule, il faut ajouter de l’alcool pour le
récupérer. L’alcool à 95 % est moins dense que l’eau si bien qu’il reste en surface. Les lipides et les
protéines se déposeront au fond de l’éprouvette, alors que l’ADN, puisqu’il est moins dense que les
protéines et les lipides, monteront dans la couche contenant l’alcool.

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Mêle-toi de l'ADN de tes oignons! et les programmes scolaires
Québec
Programme de formation de l’école québécoise
Clientèle cible : Secondaire
Domaines d'apprentissage
Science et technologie
Domaines
général de
formation Compétences transversales Compétences disciplinaires Concepts prescrits par
le Programme
Environnement et
consommation Exploiter l'information, résoudre des problèmes
Mettre à profit ses
connaissances scientifiques
et technologiques Univers vivant: l'ADN
Ontario
Le curriculum de l’Ontario, de la 1re à la 8e année – Sciences et technologie, édition révisée, 2007
8e année
La cellule
Idées maîtresses
La cellule est l’unité de base de la vie.
9e année
Le maniement des outils et de l’équipement
Les règles de santé et de sécurité