OGM III

printem ps des sciences
Avec le soutien de la Ministre de l’Enseignement supérieur et de la Recherche scientifique
Terre à terres
10 - 16 mars 2008
LES ORGANISMES GENETIQUEMENT MODIFIES.
N. Fernsner, C. Forez, A.Nizet, X. Peyrassol, L. Terreur, T. Tshibangu.
3e Bachelier en Sciences Biomédicales.
En pratique, comment modifie-t-on un génome?
Quelques outils indispensables…
ADN : Enroulée sous forme de chromosome, la double hélice d’ADN
contient les gènes, dont certains codent pour la fabrication de protéines,
éléments principaux des structures biologiques. Les protéines sont
synthétisées par assemblage d’acides aminés présents dans le
cytoplasme des cellules. L’enchaînement des différents acides aminés est
déterminé par le code génétique dont l’ ADN est le support.
Plasmide : Petite molécule d’ADN circulaire, présente chez certaines
bactéries et virus. Elle se réplique à chaque division bactérienne.
Dès lors, un gène étranger intégré dans un ADN plasmidique sera
aussi recopié.
http://genomart.phpnet.org/images/ADN_au_chromosome.gif
1. ADN bactérien
2. ADN plasmidique
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3
/3e/Plasmid_(numbers).svg/320px-Plasmid_(numbers).svg.png
Enzyme de restriction : Protéine capable de
cliver l’ADN en un site déterminé par
reconnaissance d’une séquence particulière.
ADN ligase : Protéine capable de réassembler
deux morceaux d’ADN correspondants.
http://genomart.phpnet.org/images/ADN_au_chromosome.gif
Les étapes d’une modification génétique.
Gène étranger
Région d’intérêt
Gène de
résistance à
l’antibiotique
Bouts
collants
Hybridation + ADN
Ligase
ADN
recombinant
Insertion ADN
Chromosome
bactérien
Cellule
bactérienne
Bactéries cultivées sur un
milieu avec antibiotique.
clonage
Seulement les bactéries avec le gène
de résistance à l’antibiotique.
Purification de l’ADN
CLONAGE DANS UN
PLASMIDE
http://employees.csbsju.edu/hjakubowski/classes/SrSemMedEthics/Human%20Genome%20Project/plasmid.gif
http://www.snv.jussieu.fr/vie/dossiers/transgenese/agrobacterium/agro.htm
Le clonage en bactérie fait partie des techniques d’ingéniérie
génétique qui permettent d’isoler un gène et de l’insérer dans un
organisme choisi:
- introduction du gène d’intérêt dans un vecteur plasmidique
porteur d’un gène de résistance à un antibiotique
- le plasmide recombinant obtenu est introduit dans des bactéries,
celles-ci sont cultivées sur un milieu sélectif de manière à ce que
seules les bactéries contenant un plasmide se développent
A chaque multiplication de la bactérie, le plasmide se réplique lui
aussi.
La découverte en 1973 par une équipe de chercheurs belges, du
plasmide Ti présent dans Agrobacterium tumefaciens, une bactérie
du sol capable d’infecter les végétaux, est à l’origine d’une des
technique les plus utilisée pour générer des plantes transgéniques.
L’infection de la plante par Agrobacterium tumefaciens induit le
transfert de l’ADN plasmidique Ti de la bactérie dans le génome de
la plante.
L’introduction d’un gène d’intérêt dans le plasmide Ti permet donc
de générer des végétaux génétiquement modifiés.
Le transfert de gène dans les cellules peut aussi se faire
par micro-injection, électroporation, infection virale …
Contact: Christiane Christophe-Hobertus (IRIBHM) adresse email: [email protected]
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