OGM III

LES ORGANISMES GENETIQUEMENT MODIFIES.
N. Fernsner, C. Forez, A.Nizet, X. Peyrassol, L. Terreur, T. Tshibangu.
3e Bachelier en Sciences Biomédicales.
printemps des sciences
Avec le soutien de la Ministre de l’Enseignement supérieur et de la Recherche scientifique
Terre à terres 10 - 16 mars 2008
© Toute reproduction, même partielle, doit indiquer clairement le nom de tous les auteurs, le nom du Service/Département, ainsi que la mention « printemps des sciences 2008 - Bruxelles»
Les étapes d’une modification génétique.
En pratique, comment modifie-t-on un génome?
Insertion ADN
Gène de
résistance à
l’antibiotique
Gène étranger
Région d’intérêt
ADN
recombinant
Bouts
collants
Hybridation + ADN
Ligase
Cellule
bactérienne
Chromosome
bactérien
clonage
Bactéries cultivées sur un
milieu avec antibiotique.
Seulement les bactéries avec le gène
de résistance à l’antibiotique.
CLONAGE DANS UN
PLASMIDE
Purification de l’ADN
http://employees.csbsju.edu/hjakubowski/classes/SrSemMedEthics/Human%20Genome%20Project/plasmid.gif
Le clonage en bactérie fait partie des techniques d’ingéniérie
génétique qui permettent d’isoler un gène et de l’insérer dans un
organisme choisi:
- introduction du gène d’intérêt dans un vecteur plasmidique
porteur d’un gène de résistance à un antibiotique
- le plasmide recombinant obtenu est introduit dans des bactéries,
celles-ci sont cultivées sur un milieu sélectif de manière à ce que
seules les bactéries contenant un plasmide se développent
A chaque multiplication de la bactérie, le plasmide se réplique lui
aussi.
La découverte en 1973 par une équipe de chercheurs belges, du
plasmide Ti présent dans Agrobacterium tumefaciens, une bactérie
du sol capable d’infecter les végétaux, est à l’origine d’une des
technique les plus utilisée pour générer des plantes transgéniques.
L’infection de la plante par Agrobacterium tumefaciens induit le
transfert de l’ADN plasmidique Ti de la bactérie dans le génome de
la plante.
L’introduction d’un gène d’intérêt dans le plasmide Ti permet donc
de générer des végétaux génétiquement modifiés.
Le transfert de gène dans les cellules peut aussi se faire
par micro-injection, électroporation, infection virale …
http://www.snv.jussieu.fr/vie/dossiers/transgenese/agrobacterium/agro.htm
Quelques outils indispensables…
http://genomart.phpnet.org/images/ADN_au_chromosome.gif
ADN : Enroulée sous forme de chromosome, la double hélice d’ADN
contient les gènes, dont certains codent pour la fabrication de protéines,
éléments principaux des structures biologiques. Les protéines sont
synthétisées par assemblage d’acides aminés présents dans le
cytoplasme des cellules. L’enchaînement des différents acides aminés est
déterminé par le code génétique dont l’ ADN est le support.
http://genomart.phpnet.org/images/ADN_au_chromosome.gif
Enzyme de restriction : Protéine capable de
cliver l’ADN en un site déterminé par
reconnaissance d’une séquence particulière.
ADN ligase : Protéine capable de réassembler
deux morceaux d’ADN correspondants.
Plasmide : Petite molécule d’ADN circulaire, présente chez certaines
bactéries et virus. Elle se réplique à chaque division bactérienne.
Dès lors, un gène étranger intégré dans un ADN plasmidique sera
aussi recopié.
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/3
/3e/Plasmid_(numbers).svg/320px-Plasmid_(numbers).svg.png
1. ADN bactérien
2. ADN plasmidique
Contact: Christiane Christophe-Hobertus (IRIBHM) adresse email: [e-mail]