production d`interféron et activités antivirales des lymphocytes

PRODUCTION D’INTERF´ ERON ET ACTIVIT´ ES
ANTIVIRALES DES LYMPHOCYTES DE PORC
Charley B, Laude H, La Bonnardi`ere C
To cite this version:
Charley B, Laude H, La Bonnardi`ere C. PRODUCTION D’INTERF´ ERON ET ACTIVIT´ ES
ANTIVIRALES DES LYMPHOCYTES DE PORC. Annales de Recherches V´et´erinaires, INRA
Editions, 1987, 18 (3), pp.310-311. <hal-00901734>
HAL Id: hal-00901734
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Submitted on 1 Jan 1987
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C’est
la raison
pour laquelle
une
technique
alternative a
été
mise au
point
au
Laboratoire
d’Immuno-
logie
de
l’ENVN
fondée sur la
dégradation
enzymatique
d’un substrat
jaune, le
MTT
(sel
de
tétrazolium)
qui,
sous
l’action des
enzymes
mitochondriales donne un
produit
coloré en
violet,
dont
la
densité
optique
peut
être lue directement dans la
microplaque
par
un
spectrophotomètre
à multicanaux.
La
comparaison
de ce nouveau test
optimisé
avec le test
classique d’incorporation
de la
thymidine
tritiée a montré une corrélation
importante
(r
=
0,85),
constante et
reproductible
avec les
lymphocytes
de mouton
(3).
Le nouveau test
colorimétrique
présentant
la même valeur
biologique peut
donc
avantageusement
remplacer
le test de
radiomarquage,
car il
présente
une meilleure valeur
technique:
il
est
plus simple,
rapide
à mettre en
oeuvre
et
facile
à
lire,
car
il permet
de s’affranchir des dernières
étapes
de filtration et
de
lavage
des
cellules,
ainsi
que
des
radio-isotopes
et
du
compteur
à
scintillations.
Ce test
colorimétrique
a été
appliqué
à
l’appréciation
des variations
du niveau de la
réponse
immuni-
taire
à
médiation cellulaire chez les
moutons,
au
cours
d’un
cycle nycthéméral
de
24 heures.
Il ressort
clairement de cette étude l’existence de
trois
pics
de
réponse
constants,
quel que
soit
l’animal
testé,
à 8
heures,
14
heures et
24
heures,
avec
une
baisse considérable de
la
réponse
lympho-
cytaire
tôt le matin et en fin
d’après-midi
(4).
Ce travail
démontre
l’importance
de l’heure
à
laquelle
le
prélèvement
est
réalisé,
et la nécessité de
toujours
faire les
prélèvements
à la même
heure,
de
façon
à
pouvoir
faire des
comparaisons
significa-
tives. Différentes
hypothèses
concernant
l’origine
de
ces
variations
circadiennes
sont
discutées.
Cette même
technique
a
permis
de montrer l’influence du stade
physiologique
de
gestation
sur la
réponse
mitogénique
des
lymphocytes
chez les brebis.
En
effet,
la
réponse
des
lymphocytes
circulants des brebis
gestantes
décroît
progressivement,
au fur
et à
mesure
que
la
gestation
avance
par rapport
au niveau de base observé chez les brebis
non
gestantes.
Ces résultats
suggèrent
une certaine altération des
capacités
immunologiques
des
brebis au cours de
la
gestation.
Cette
diminution, favorable,
pourrait
à l’inverse
avoir
un effet néfaste en
permettant
le
déve-
loppement
de maladies
infectieuses
de
la
brebis,
pendant
la
période
de
gestation
et
juste
après
le
part.
Sélection de
Références
(1)
Pellerin
JL,
1982.
L’Immunité néonatale des bovins. Rev Méd Vét
133:521-537
(2)
Rai-El-Balhaa
G,
Pellerin
JL, Bodin G,
Abdullah
A,
Sfaksi
A,
1985.
La
compétence
immunitaire du
jeune
veau
peut-elle
être un critère
d’appréciation
du devenir
zootechnique
(Note
préliminaire:
mise au
point
d’un test de trans-
formation
lymphoblastique).
Rev Méd Vét
136:531-540
(3)
Rai-El-Balhaa
G,
Pellerin
JL,
Bodin
G,
Abdullah
A,
Hiron
H,
1985.
Lymphoblastic
transformation
assay
of
sheep
peripheral
blood
lymphocytes:
a new
rapid
and
easy-to-read
technique. Comp
Immun Microbiol Infect Dis 8:31 1-318 8
(4)
Rai-El-Balhaa
G,
Pellerin
JL,
Bodin
G,
Abdullah
A,
Muller
M,
1986.
Importance
of the hour of
sampling
in
the
lymphoblastic
transformation
assay
of
sheep periphera!
blood
lymphocytes.
Vet Immunol
Immunopathoi
(à
paraître)
(5)
Rai-El-Balhaa G Abdullah
A,
Pellerin
JL,
Thibaud
D,
Bodin
G,
1986.
Lymphocyte reactivity
in
multiparous
pregnant
ewes.
Am
J
Reprod
Immunol
(à
paraître)
PRODUCTION D’INTERFÉRON ET
ACTIVITÉS ANTIVIRALES
DES
LYMPHOCYTES
DE
PORC
CHARLEY
B,
LAUDE H
LA
BONNARDIÈRE C
lNRA,
Station
de Recherches de
Virologie
et
d’lmmunologie,
78850
Thiverval-Grignon,
France
La
gastroentérite
transmissible
(GET)
est
une entérite virale
aiguë,
particulièrement
grave
pour
le
porcelet.
A
la suite
de la démonstration d’une
forte
production
d’interféron a
(IFN a)
dans divers
organes
de
porcelets
infectés
(La
Bonnardière et
Laude
1981)
nous nous sommes
intéressés à
plusieurs
fonctions antivirales non
spécifiques
des
lymphocytes
de
porc :
effet
d’inhibition de la
réplication
virale,
activités
cytotoxiques spontanées,
synthèse
d’IFN a. Des
lymphocytes
sanguins
de
porcs
non
immuns,

mis en
présence
de cellules rénales
porcines
(RPTG)
infectées
par
le
virus
GET,
sont
capables
d’inhiber
75
à 95
%
de la
multiplication
du virus.
Simultanément,
de I’IFN a
apparaît
dans le
milieu d’incubation.
Si on réalise
l’expérience
en
présence d’anticorps
neutralisant I’IFN a
produit,
l’effet inhibeur
persiste.
Il
semble donc
que
l’effet inhibiteur soit
indépendant
de la
présence
d’IFN a extracellulaire.
Afin de déter-
miner si cette diminution de
multiplication
virale résulte de la
lyse précoce
de cellules cibles
infectées
par
les
lymphocytes
cytotoxiques,
nous avons
réalisé,
dans les mêmes conditions
expérimentales,
un
test de
cytotoxicité
spontanée
(Natural
Killer:
NK).
Les
lymphocytes
de
porc
adultes
sont effectivement
capables
de
lyser
les cellules cibles infectées. Par
contre,
les
lymphocytes
de
porcelets
nouveau-nés
s’avèrent
dépourvus
d’activité
cytotoxique
mais inhibent
pourtant
la
multiplication
virale: ceci
suggère
que
l’inhibition virale est
indépendante
de l’activité
NK
(Charley
et
al,
accepté pour publication).
L’acti-
vité NK est très réduite voire nulle chez le
porcelet
nouveau-né
(Huh
et al
1981 );
dans le but de stimuler
chez
le
jeune,
cette
activité,
nous avons traité des
lymphocytes
de
porcelets
par
diverses
lymphokines
et
nous avons observé
que
l’activité
NK du
jeune
animal était accrue
par
I’IFN a humain
(Charley
et al
1985), I’IFN
j3 recombinant
mais
non
par
l’interleukine
2
humaine ou
porcine qui
est
pourtant
active
sur
les cellules
NK
de l’adulte
(Charley
et Fradelizi
1987).
Une bonne
production
d’IFN a a lieu
quand
les
lymphocytes
sont
placés
sur des
tapis
de cellules rénales infectées
et fixées
par
la
glutaraldéhyde.
Des
expériences
en cours nous
indiquent que dans
ce
système
cellulaire,
l’induction d’IFN a est
inhibée
par
certains
anticorps
monoclonaux
dirigés
contre la
protéine d’enveloppe
E1 mais non
par
des
anticorps dirigés
contre la
protéine
E2 :
ces résultats
suggèrent
donc
que
l’induction
d’IFN a
par
le virus
GET est
provoquée par
une
partie
de la molécule El.
Références
Charley
B,
Petit
E,
La Bonnardière
C,
1985. Interferon-induced
enhancement of newborn
pig
Natural
Killing
(NK)
acti-
vity.
Ann
Rech
Vet 16:399-402
Charley
B,
Laude
H,
La Bonnardière
C. Inhibition of transmissible
gastroenteritis
coronavirus
(TGEV)
multiplication
in
vitro
by
non immune
lymphocytes.
Ann Virol
(Inst Pasteur)
(accepté pour publication).
Charley
B,
Fradelizi
D.
1987. Differential
effects of human and
porcine
interleukin
2
on natural
killing
(NK)
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and adult
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Ann Rech Vet 18:225-230
Huh
ND,
Kim
YB,
Koren
HS,
Amos
DB,
1981. Natural
Killing
and
antibody-dependent cytotoxicity
in
specific-
pathogen-free
miniature swine and
germ-free piglets.
2.
Ontogenic
developments
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NK
and
ADCC. Int
J
Cancer
28:175-178
La Bonnardière
C,
Laude
H,
1981.
High
interferon
titer in newborn
pig
intestine
during experimentally
induced
viral
enteritis. Infect Immun 32:28-31
BIOLOGIE
DES SOUS-POPULATIONS
LYMPHOCYTAIRES
DU GREFFON CHEZ
LE PORC
AYANT SUBI UNE
TRANSPLANTATION
DE L’INTESTIN
GRÊLE ET
TRAITÉ PAR LA
CYCLOSPORINE
A
SALMON
H
OLIVIER
M’ ARNAUD-BATTANDIER
1:
lNRA,
Laboratoire
de
Pathologie
Porcine,
37380
Nouzilly,
France
2:
lNSERM U
12,
Hôpital
des Enfants
Malades,
75015
Paris,
France
De
par
sa
physiologie
intestinale
proche
de
l’homme,
le
porc représente
aussi
un
modèle
expérimental
des
transplantations
d’intestin.
Lorsque
donneur et receveur sont
semi-histo-incompatible,
on assiste
inévitablement au
rejet
de l’intestin
grêle
transplanté. Cependant, l’équipe
de Ricour a montré
que
les
greffes
étaient tolérées
si le
porc
est en même
temps
soumis au traitement
par
la
cyclosporine
A
(CsA).
Comme l’intestin contient normalement
un nombre
important
de
lymphocytes,
d’autant
plus
que
le
gref-
fon
comprend également
le
ganglion
mésentérique,
on s’est
interrogé
sur
le devenir des
lymphocytes
du
greffon.
L’étude des
récepteurs
montrait
que
les
sous-populations
lymphocytaires
isolées de la
muqueuse
de
l’intestin
transplanté
contenaient une
proportion
élevée de
lymphocytes
T
(87 +
5
%)
avec
peu
de B