PRODUCTION D’INTERFÉRON ET ACTIVITÉS ANTIVIRALES DES LYMPHOCYTES DE PORC Charley B, Laude H, La Bonnardière C To cite this version: Charley B, Laude H, La Bonnardière C. PRODUCTION D’INTERFÉRON ET ACTIVITÉS ANTIVIRALES DES LYMPHOCYTES DE PORC. Annales de Recherches Vétérinaires, INRA Editions, 1987, 18 (3), pp.310-311. <hal-00901734> HAL Id: hal-00901734 https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00901734 Submitted on 1 Jan 1987 HAL is a multi-disciplinary open access archive for the deposit and dissemination of scientific research documents, whether they are published or not. The documents may come from teaching and research institutions in France or abroad, or from public or private research centers. L’archive ouverte pluridisciplinaire HAL, est destinée au dépôt et à la diffusion de documents scientifiques de niveau recherche, publiés ou non, émanant des établissements d’enseignement et de recherche français ou étrangers, des laboratoires publics ou privés. C’est la raison pour laquelle une technique alternative a été mise au point au Laboratoire d’Immunode l’ENVN fondée sur la dégradation enzymatique d’un substrat jaune, le MTT (sel de tétrazolium) qui, sous l’action des enzymes mitochondriales donne un produit coloré en violet, dont la densité optique peut être lue directement dans la microplaque par un spectrophotomètre à multicanaux. logie La comparaison de ce nouveau test optimisé avec le test classique d’incorporation de la thymidine tritiée a montré une corrélation importante (r 0,85), constante et reproductible avec les lymphocytes de mouton (3). Le nouveau test colorimétrique présentant la même valeur biologique peut donc avantageusement remplacer le test de radiomarquage, car il présente une meilleure valeur technique: il est plus simple, rapide à mettre en oeuvre et facile à lire, car il permet de s’affranchir des dernières étapes de filtration et de lavage des cellules, ainsi que des radio-isotopes et du compteur à scintillations. Ce test colorimétrique a été appliqué à l’appréciation des variations du niveau de la réponse immunitaire à médiation cellulaire chez les moutons, au cours d’un cycle nycthéméral de 24 heures. = Il ressort clairement de cette étude l’existence de trois pics de réponse constants, quel que soit l’animal testé, à 8 heures, 14 heures et 24 heures, avec une baisse considérable de la réponse lymphocytaire tôt le matin et en fin d’après-midi (4). Ce travail démontre l’importance de l’heure à laquelle le prélèvement est réalisé, et la nécessité de toujours faire les prélèvements à la même heure, de façon à pouvoir faire des comparaisons significatives. Différentes hypothèses concernant l’origine de ces variations circadiennes sont discutées. Cette même technique a permis de montrer l’influence du stade physiologique de gestation sur la réponse mitogénique des lymphocytes chez les brebis. En effet, la réponse des lymphocytes circulants des brebis gestantes décroît progressivement, au fur et à mesure que la gestation avance par rapport au niveau de base observé chez les brebis non gestantes. Ces résultats suggèrent une certaine altération des capacités immunologiques des brebis au cours de gestation. Cette diminution, favorable, pourrait à l’inverse avoir un effet néfaste en permettant le développement de maladies infectieuses de la brebis, pendant la période de gestation et juste après le part. la Sélection de Références (1) Pellerin JL, 1982. L’Immunité néonatale des bovins. Rev Méd Vét 133:521-537 (2) Rai-El-Balhaa G, Pellerin JL, Bodin G, Abdullah A, Sfaksi A, 1985. La compétence immunitaire du jeune veau peut-elle être un critère d’appréciation du devenir zootechnique (Note préliminaire: mise au point d’un test de transformation lymphoblastique). Rev Méd Vét 136:531-540 (3) Rai-El-Balhaa G, Pellerin JL, Bodin G, Abdullah A, Hiron H, 1985. Lymphoblastic transformation assay of sheep peripheral blood lymphocytes: a new rapid and easy-to-read technique. Comp Immun Microbiol Infect Dis 8:31 1-3188 (4) Rai-El-Balhaa G, Pellerin JL, Bodin G, Abdullah A, Muller M, 1986. Importance of the hour of sampling in the lymphoblastic transformation assay of sheep periphera! blood lymphocytes. Vet Immunol Immunopathoi (à paraître) (5) Rai-El-Balhaa G Abdullah A, Pellerin JL, Thibaud D, Bodin G, 1986. Lymphocyte reactivity in multiparous pregnant ewes. Am J Reprod Immunol (à paraître) PRODUCTION PORC D’INTERFÉRON CHARLEY B, LAUDE H LA ET ACTIVITÉS BONNARDIÈRE lNRA, Station de Recherches de Virologie et ANTIVIRALES DES LYMPHOCYTES DE C d’lmmunologie, 78850 Thiverval-Grignon, France La gastroentérite transmissible (GET) est une entérite virale aiguë, particulièrement grave pour le porcelet. A la suite de la démonstration d’une forte production d’interféron a (IFN a) dans divers organes de porcelets infectés (La Bonnardière et Laude 1981) nous nous sommes intéressés à plusieurs fonctions antivirales non spécifiques des lymphocytes de porc : effet d’inhibition de la réplication virale, activités cytotoxiques spontanées, synthèse d’IFN a. Des lymphocytes sanguins de porcs non immuns, mis en présence de cellules rénales porcines (RPTG) infectées par le virus GET, sont capables d’inhiber 75 à 95 % de la multiplication du virus. Simultanément, de I’IFN a apparaît dans le milieu d’incubation. Si on réalise l’expérience en présence d’anticorps neutralisant I’IFN a produit, l’effet inhibeur persiste. Il semble donc que l’effet inhibiteur soit indépendant de la présence d’IFN a extracellulaire. Afin de déterminer si cette diminution de multiplication virale résulte de la lyse précoce de cellules cibles infectées par les lymphocytes cytotoxiques, nous avons réalisé, dans les mêmes conditions expérimentales, un test de cytotoxicité spontanée (Natural Killer: NK). Les lymphocytes de porc adultes sont effectivement capables de lyser les cellules cibles infectées. Par contre, les lymphocytes de porcelets nouveau-nés s’avèrent dépourvus d’activité cytotoxique mais inhibent pourtant la multiplication virale: ceci suggère que l’inhibition virale est indépendante de l’activité NK (Charley et al, accepté pour publication). L’activité NK est très réduite voire nulle chez le porcelet nouveau-né (Huh et al 1981 ); dans le but de stimuler chez le jeune, cette activité, nous avons traité des lymphocytes de porcelets par diverses lymphokines et nous avons observé que l’activité NK du jeune animal était accrue par I’IFN a humain (Charley et al 1985), I’IFN j3 recombinant mais non par l’interleukine 2 humaine ou porcine qui est pourtant active sur les cellules NK de l’adulte (Charley et Fradelizi 1987). Une bonne production d’IFN a a lieu quand les lymphocytes sont placés sur des tapis de cellules rénales infectées et fixées par la glutaraldéhyde. cours nous indiquent que dans ce système cellulaire, l’induction d’IFN a est anticorps monoclonaux dirigés contre la protéine d’enveloppe E1 mais non par des anticorps dirigés contre la protéine E2 : ces résultats suggèrent donc que l’induction d’IFN a par le virus GET est provoquée par une partie de la molécule El. Des expériences inhibée par certains en Références Charley B, Petit E, La Bonnardière C, 1985. Interferon-induced enhancement of newborn pig Natural Killing (NK) activity. Ann Rech Vet 16:399-402 Charley B, Laude H, La Bonnardière C. Inhibition of transmissible gastroenteritis coronavirus (TGEV) multiplication in vitro by non immune lymphocytes. Ann Virol (Inst Pasteur) (accepté pour publication). Charley B, Fradelizi D. 1987. Differential effects of human and porcine interleukin 2 on natural killing (NK) activity of newborn piglets and adult pigs lymphocytes. Ann Rech Vet 18:225-230 Huh ND, Kim YB, Koren HS, Amos DB, 1981. Natural Killing and antibody-dependent cytotoxicity in specificpathogen-free miniature swine and germ-free piglets. 2. Ontogenic developments of NK and ADCC. Int J Cancer 28:175-178 La Bonnardière C, Laude H, 1981. High interferon titer in newborn pig intestine during experimentally induced viral enteritis. Infect Immun 32:28-31 BIOLOGIE DES SOUS-POPULATIONS LYMPHOCYTAIRES DU GREFFON CHEZ LE PORC AYANT SUBI UNE TRANSPLANTATION DE L’INTESTIN GRÊLE ET TRAITÉ PAR LA CYCLOSPORINE A SALMON H OLIVIER M’ ARNAUD-BATTANDIER Pathologie Porcine, 37380 Nouzilly, France 12, Hôpital des Enfants Malades, 75015 Paris, France 1: lNRA, Laboratoire de 2: lNSERM U De par sa physiologie intestinale proche de l’homme, le porc représente aussi un modèle expérimental des transplantations d’intestin. Lorsque donneur et receveur sont semi-histo-incompatible, on assiste inévitablement au rejet de l’intestin grêle transplanté. Cependant, l’équipe de Ricour a montré que les greffes étaient tolérées si le porc est en même temps soumis au traitement par la cyclosporine A (CsA). Comme l’intestin contient normalement un nombre important de lymphocytes, d’autant plus que le greffon comprend également le ganglion mésentérique, on s’est interrogé sur le devenir des lymphocytes du greffon. L’étude des récepteurs montrait que les sous-populations l’intestin transplanté contenaient une proportion élevée de lymphocytaires isolées de la muqueuse de lymphocytes T (87 + 5 %) avec peu de B