Résumé des travaux Travaux effectués pendant la thèse (2004 - 2008) Etude des mécanismes effecteurs des lymphocytes CD8+ mémoires nécessaires à l’élimination de la bactérie intracellulaire Listeria monocytogenes chez la souris. Directeur de thèse: Dr Grégoire Lauvau; Laboratoire dirigé par le Pr Nicolas Glaichenhaus, Université de Nice-Sophia-Antipolis. Contexte international et hypothèse de travail Les lymphocytes T (LT) CD8+ sont les cellules effectrices du système immunitaire qui éliminent les cellules infectées par des bactéries intracellulaires, des protozoaires ou des virus. Au cours d’une infection, les LT CD8+ spécifiques de l’agent pathogène prolifèrent et se différencient en cellules effectrices cytolytiques qui sécrètent des cytokines et des chimiokines. L’expression d’une ou plusieurs de ces fonctions effectrices conduit à l’élimination de l’agent infectieux. Après expansion, les LT CD8+ se contractent et se différencient en cellules mémoires. La qualité des LT CD8+ mémoires générés conditionne l’élimination de l’agent pathogène lors d’une réinfection. Le modèle d’infection par Listeria monocytogenes (LM) a été largement utilisé pour étudier la réponse des LT CD8+. A la suite d’une immunisation avec une dose non létale de bactéries sauvages, les souris développent des LT CD8+ mémoires qui les protègent d’une réinfection avec une dose de bactéries normalement létale pour des souris naïves. La génération de ces LT CD8+ mémoires protecteurs dépend de l’accès des antigènes bactériens au cytosol des cellules infectées lors de la première infection. Il n’est cependant pas clair si cette seule étape d’infection du cytosol suffit à générer ces cellules. Après réinfection, les LT CD8+ mémoires se différencient en cellules effectrices secondaires cytotoxiques et sécrètent de l’IFN-γ et du TNF-α. Cependant, même en absence de ces activités effectrices, la qualité de la réponse des LT CD8+ mémoires permet d’éliminer LM lors d’une réinfection. Mon projet de thèse a consisté à identifier par quel(s) mécanisme(s) moléculaires et cellulaires les LT CD8+ mémoires conduisent à l’élimination de la bactérie lors d’une réinfection. Afin de répondre à cette question, notre stratégie a été (i) de chercher des mutants de LM qui n’induisent pas la génération de LT CD8+ mémoires protecteurs et (ii) d’identifier, par comparaison avec la réponse effectrice des LT CD8+ chez les souris immunisées avec la bactérie sauvage, le(s) mécanisme(s) impliqués dans l’élimination de LM lors d’une réinfection. Résultats Nous avons montré que le mutant bactérien déficient pour le système de transport protéique SecA2 n’est pas capable d’induire une immunité de protection chez les souris immunisées. La mutation de ce système de transport n’entrave pas la capacité des bactéries à envahir le cytosol des cellules infectées par LM, mais prévient la sécrétion d’au moins 19 protéines bactériennes. Nos résultats montrent que la génération de LT CD8+ mémoires protecteurs nécessite l’invasion du cytosol des cellules infectées par LM et requiert également l’export d’une ou plusieurs protéines bactériennes dépendantes du système de sécrétion SecA2. Les LT CD8+ mémoires générés à la suite d’une immunisation par le mutant bactérien ∆SecA2 sont cytolytiques et sécrètent de l’IFN-γ et du TNF-α. Par contre, ces cellules ne sécrètent pas la chemokine pro-inflammatoire CCL3 qui est absolument requise pour éradiquer LM lors d’une réinfection. Nous avons montré que, lors d’une réinfection, les LT CD8+ mémoires spécifiques de LM sécrètent du CCL3 (étape 1, Fig. 1) qui induit la sécrétion rapide de TNF-α par les cellules phagocytaires mononuclées (MPCs) (étape 2). Le TNF-α produit contribue à l’activation paracrine d’autres MPCs et des neutrophiles (étape 2) qui produisent alors des radicaux oxygénés (RO). Le stress oxydatif généré est responsable de l’élimination de LM lors d’une réinfection (étape 3). Les LT CD8+ mémoires étaient jusqu’alors caractérisés par leurs activités cytotoxiques et leurs capacités à sécréter l’IFN-γ et du TNF-α. Mes travaux ont permis de démontrer un rôle insoupçonné des LT CD8+ qui repose sur la sécrétion de CCL3 pour l’orchestration d’une réponse immunitaire protectrice effectuée par l’immunité innée. Fig. 1: Schéma illustrant l’activation des phagocytes par les LT CD8+ mémoires. De plus, nous avons pu montrer que l’activation des phagocytes contrôlée par la réactivation des LT CD8+ mémoires spécifiques de LM permet d’éliminer un agent pathogène non apparenté par un effet de voisinage. La manipulation de ce mécanisme à des fins thérapeutiques a fait l’objet d’un brevet (brevet 07301 280.9). Contrairement aux cellules du système immunitaire adaptatif, il est considéré que les cellules immunitaires innées exercent une réponse effectrice comparable chaque fois que le même pathogène est rencontré. Nous avons montré que lors d'une infection secondaire par LM, les cellules mémoire T CD8+ CCL3+ induisent des modifications drastiques dans les propriétés fonctionnelles de plusieurs populations de phagocytes. Lors d’une réinfection, les LT CD8+ mémoires co-localisent rapidement avec les monocytes inflammatoires et les neutrophiles. Ces phagocytes produisent alors des quantités plus élevées de radicaux oxygénés, augmentent le pH de leurs phagosomes et génèrent de l'autophagie. Ces activités effectrices permettent un contrôle extrêmement rapide de la croissance bactérienne in vivo et contribuent largement à l’immunité de protection. Par conséquent, mes résultats montrent que des cellules T CD8+ mémoires cytotoxiques orchestrent la réponse des phagocytes en modulant la qualité des mécanismes effecteurs antimicrobiens exprimés et conduisent ainsi à une clairance rapide et efficace des pathogènes. Travaux effectués pendant le post-doctorat (Septembre 2009-présent) Projet 1: Les souris knock-in NKp46iCre: le premier modèle murin de mutagénèse conditionnelle spécifique dans les cellules NKp46+ Directeur de projet : Pr Eric Vivier (laboratoire labellisé par la Ligue contre le cancer), Centre d’immunologie de Marseille-Luminy, Université Aix-Marseille. Contexte international et hypothèse de travail Les cellules Natural Killer (NK) sont des lymphocytes du système immunitaire inné pourvues d’activités effectrices et régulatrices. NKp46 (NCR1, CD335) est un marqueur des cellules NK présent chez toutes les espèces de mammifères y compris l’homme. NKp46 est un récepteur de surface qui appartient à la superfamille des immunoglobulines. Ce récepteur est un membre du groupe des récepteurs de cytotoxicité naturelle (NCR) qui comporte 2 autres molécules : le récepteur NKp44 (NCR2, CD336) et le récepteur NKp30 (NCR3, CD337). NKp46 est associé, à la membrane, à des polypeptides qui portent des motifs ‘ITAMs’ (Immunoreceptor Tyrosine-based Activation Motifs) tels que CD3ζ et FcRγ comme le récepteur des lymphocytes T et B (T and B-Cell Receptor, TCR and BCR) et les récepteurs aux fragments constants (FcR) des immunoglobulines. Ces récepteurs transmettent de puissants signaux activateurs lors de leur engagement. NKp46 est impliqué dans la reconnaissance des cellules tumorales via une interaction avec des ligands restant encore à identifier et reconnaît également des hémagglutinines virales. Enfin, il a été décrit que les cellules NK participent à la destruction des -îlots du pancréas à la suite de l’engagement de NKp46 et contribuent ainsi au diabète de type I. NKp46 est exprimé par toutes les cellules NK matures chez l'homme et chez la souris, indépendamment de leur localisation anatomique. Son expression est majoritairement restreinte aux cellules NK avec toutefois deux exceptions: une sous-population minoritaire de lymphocytes T et une population de cellules lymphoïdes localisée dans les muqueuses. La séquence en acides aminés de NKp46 est hautement conservée chez tous les mammifères. Les homologies frappantes dans les régions régulatrices du gène NKp46 conservées de l'opossum à l'homme, a incité la génération de plusieurs souris transgéniques visant à éliminer les cellules NK in vivo ou à invalider des gènes spécifiquement dans les cellules NKp46+. Cependant, une variégation au niveau du locus du transgène résulte en une variation imprévisible de la pénétrance de l'expression du transgène dans une même portée de souris ce qui complique l’utilisation de ces modèles. Afin de s’affranchir de ces problèmes de variégation et de pouvoir cibler sélectivement les cellules NKp46+, nous avons générer une nouvelle souris NKp46iCre par une approche de knock-in. Résultats Mon projet a consisté à caractériser la souris knock-in NKp46Cre générée dans le laboratoire. Les souris hétérozygotes pour la iCre sont fertiles et ne présentent pas de défaut de développement ni de variation significative dans le nombre de cellules lymphoïdes ou myéloïdes par rapport aux souris contrôles issues de la même portée. Le nombre de cellules NK, leur phénotype ainsi que leur capacité effectrice ne sont pas affectés chez ces souris, bien que le nombre de récepteurs NKp46 exprimé à la surface des cellules NK soit diminué. Grâce au croisement de cette souris à des souris reportrices (Fig. 2), nous avons nous avons montré que l'expression de la recombinase iCre correspond fidèlement à l'expression endogène de NKp46 dont l’expression est majoritairement restreinte aux cellules NK. Nous avons également observé l’expression de l’iCre dans une souspopulation minoritaire de lymphocytes T et une population de cellules lymphoïdes localisée dans les muqueuses comme attendu. Des expériences Fig. 2: Le croisement de la souris NKp46iCre avec une souris reportrice cible les cellules NKp46+. de traçage génétique in vivo des cellules NKp46+ du foie et de l’intestin ont permis de montrer l’hétérogénéité des cellules NK du foie et révéler l’appartenance des cellules NKp46+RORγt+ à un lignage cellulaire distinct de celui des cellules NK. En résumé, nos résultats définissent les souris NKp46iCre comme le premier modèle murin de mutagénèse conditionnelle spécifique dans les cellules NKp46+. Ce modèle permettra la génération d’une variété de lignées de souris basée sur le croisement des souris NKp46iCre à des souris possédant des gènes floxés pour l’étude de la biologie des cellules NK, des lymphocytes T et des cellules NKR+RORγt+NKp46+ de l’intestin. Projet 2 : NKp46 éduque les cellules NK en calibrant leur seuil de réactivité fonctionnelle. Directeurs de projet: Pr Eric Vivier et Dr Sophie Ugolini (laboratoire labellisé par la Ligue contre le cancer), Centre d’immunologie de Marseille-Luminy, Université Aix-Marseille. Contexte international et hypothèse de travail Les cellules NK reconnaissent les cellules stressées et/ou infectées et elles les éliminent grâce à des activités effectrices cytolytiques. Les cellules NK sécrètent également des cytokines et participent à l’élaboration des réponses immunitaires adaptatives. L’activation des cellules NK doit donc être strictement régulée afin que ces cellules soient efficaces sans être dangereuses pour l’hôte. La reconnaissance des cellules cibles infectées/stressées repose sur un système de détection qui est composé de récepteurs inhibiteurs et activateurs (Fig. 3). Les récepteurs inhibiteurs des cellules NK interagissent avec les molécules du complexe majeur d’histocompatibilité de classe I (CMH-I) qui sont constitutivement exprimé par les tissus sains mais leur expression peut être diminuée à la suite du stress causé par l’infection mais aussi à cause de l’agent infectieux lui-même qui interfère avec le système de présentation antigénique afin d’échapper à une reconnaissance par les cellules T. Cette diminution du nombre des molécules du CMH-I augmente le nombre de récepteurs inhibiteurs non engagés ce qui diminue les Fig. 3: Balance des signaux inhibiteurs et signaux inhibiteurs délivrés aux cellules NK et entraîne leur activateurs pour l’activation des cellules NK. activation. Les cellules NK expriment aussi divers récepteurs activateurs comme les Killer cell immunoglobuline-like receptors (KIR) activateurs (KIR-S) chez l’homme et les récepteurs Ly49 chez la souris, les récepteurs NKG2D et CD16 et les NCR décrits précédemment. L’engagement de ces récepteurs fourni des signaux positifs aux cellules NK et stimule leur activation (Fig. 3). Afin de mieux comprendre la régulation de la réactivité des cellules NK, nous avons cherché à générer des souris mutantes qui présenteraient des défauts d’activation des cellules NK lors d’une stimulation par des cellules tumorales. Pour cela, nous avons induit des mutations de manière aléatoire à la suite de l’injection dans des souris d’un agent mutagène chimique, le N-nitroso-N-éthylurée (ENU). Résultats Nous avons identifié une souris, appelée Noé, chez laquelle les cellules NK sont plus réactives face à des cellules tumorales in vitro. Ce phénotype est intrinsèque aux cellules NK de la souris Noé et nous avons montré que l’hyperréactivité de ces cellules permet une meilleure résistance des souris lors d’infections virales. Le séquençage du génome complet de la souris Noé a révélé une mutation dans le gène codant pour le récepteur NKp46. Cette mutation prévient l’expression de NKp46 à la surface des cellules. Comme NKp46 était décrit comme étant un récepteur activateur des cellules NK matures chez l'homme et chez la souris, il était surprenant d’observer que l’absence d’expression d’un récepteur activateur à la surface des cellules NK puisse être responsable de leur hyperréactivité. Cependant, grâce à une complémentation génétique des souris Noé par un transgène NKp46 humain, nous avons pu démontrer que l’expression de NKp46 est nécessaire à la calibration du seuil de réactivité des cellules NK. Nous avons ensuite montré que cette régulation s’opère par l'intermédiaire de la baisse d’expression de Helios, un facteur de transcription (FT) de la famille Ikaros connue pour réguler le seuil de réactivité des lymphocytes T et B (Fig. 4). La régulation de l’expression de Helios par le récepteur activateur NKp46 n’est pas sans rappeler la régulation des FTs de la famille Ikaros par le pre-TCR et le pre-BCR, suggérant que le lignage lymphoïde utilise des mécanismes similaires pour assurer leur différentiation. Nous avons ensuite mis en évidence que la régulation de l’activité des cellules NK est cruciale pour le développement ultérieur de la réponse adaptative antimicrobienne primaire et la génération de LT mémoires protecteurs. Fig. 4: L’engagement de NKp46 diminue l’expression de Helios et calibre le seuil de réactivité des cellules NK. Enfin, nous avons montré que l’injection d’anticorps bloquant anti-NKp46 chez des souris sauvages au cours du développement des cellules NK programme des cellules NK qui seront hyperréactives contre des cellules tumorales in vitro. Ces résultats, à priori contre intuitifs, ouvrent la voie pour la conception de nouveaux traitements thérapeutiques anti-tumoraux avec un intérêt particulier pour les patients présentant des déficiences en LT, tels que les patients qui subissent une greffe de cellules souches hématopoïétiques (brevet 61/499,485). Projet de recherche Afin d’être en mesure d’exploiter le pouvoir fonctionnel des cellules NK, il est nécessaire de comprendre les signaux activateurs qui régissent leur activation. Chez la souris, la reconnaissance par les cellules NK de la protéine virale m157 à la surface des cellules infectées par le cytomégalovirus murin par le récepteur activateur Ly49H induit leur cytotoxicité et la production d’IFN-γ. L’interaction du récepteur NKG2D avec ses ligands (les molécules de la famille MICA chez l’homme et RAET1 chez la souris) et de NKp30 avec son ligand B7-H6 entraîne également la cytotoxité de la cellule NK envers sa cible et la production IFN-γ. La découverte récente de la nature de ces ligands suggère que les récepteurs activateurs des cellules NK sont capables de reconnaître des molécules qui sont présentes à de faibles niveaux à la surface des cellules normales et dont l’expression serait augmentée au cours d’une infection/d’un stress. De nos jours, la réévaluation nécessaire du rôle des cellules NK en tant que régulateurs de l’immunité requiert, d’une manière évidente, la connaissance des couples récepteurs-ligands qui sont à la base d’une activation spécifique des cellules NK. Dans ce contexte, le ligand cellulaire du récepteur activateur NKp46 n’a pas été encore identifié. Ainsi, afin de mieux comprendre le rôle des cellules NK dans l’immunité, nous allons maintenant chercher à identifier le(s) ligand(s) de NKp46 exprimé(s) par des cellules en réponse au stress, caractériser l’activité fonctionnelle des cellules NK activées à la suite de l’engagement de NKp46 et évaluer le rôle de cette réponse effectrice dans l’immunité. Nous pensons que les réponses à ces questions constituent un enjeu majeur pour notre compréhension du rôle biologique des cellules NK et pour la conception rationnelle de nouvelles thérapies. Emilie Narni-Mancinelli Née le 14/12/1980 à Nice, FRANCE Mariée, sans enfant [email protected] DIPLOMES Maîtrise de Biochimie, mention Bien Université de Nice Sophia-Antipolis, Nice, FRANCE 2003 Diplôme d’Etudes Approfondies Pharmacologie, Biologie Moléculaire et Cellulaire, mention Très Bien Université de Nice Sophia-Antipolis, Nice, FRANCE 2004 Docteur en Sciences Immunologie Université de Nice Sophia-Antipolis, Nice, FRANCE 2008 FINANCEMENTS Allocation de doctorat MENRT CDD de 3 ans à l’Université de Nice Sophia-Antipolis 2004-2007 Monitorat de l’Enseignement Supérieur CDD de 3 ans à l’Université de Nice Sophia-Antipolis 2004-2007 Allocation de fin de doctorat Scientifique allouée par la Fondation pour la Recherche Médicale 2007-2008 Allocation de post-doctorat allouée par l’Association pour la Recherche sur le Cancer 2009-présent EXPERIENCES PROFESSIONNELLES Doctorat 2004-2008 Etude des mécanismes effecteurs des lymphocytes T CD8+ mémoires nécessaires à l’élimination de la bactérie intracellulaire Listeria monocytogenes chez la souris. Laboratoire d’étude des maladies infectieuses, allergiques et auto-immunes dirigé par le Pr N. Glaichenhaus. Directeur de thèse : G. Lauvau. Post-Doctorat 2009-présent Biologie du récepteur activateur NKp46 spécifique des cellules Natural Killers. Laboratoire d’étude des cellules Natural Killers et de l’immunité innée dirigé par le Pr E. Vivier. Directeurs de projet : E. Vivier et S. Ugolini. PUBLICATIONS E. Muraille*, E. Narni-Mancinelli*, P. Gounon*, D. Bassand, N. Glaichenhaus, L. Lenz and G. Lauvau. Cytosolic expression of SecA2 is a prerequisite for long-term protective immunity. Cell Microbiol. 2007 Jun;9(6):1445.*First authors E. Narni-Mancinelli, L. Campisi, D. Bassand, J. Cazareth, P. Gounon, N. Glaichenhaus and G. Lauvau. Memory CD8+ T cells mediate antibacterial immunity via CCL3 activation of TNF/ROI+ phagocytes. J Exp Med. 2007 Sep 3;204(9):2075. Cited by Faculty of 1000 Biology News and view Nature Medicine 2007 13: 1142 doi:10.1038/nm1007-1142a C. Auffray*, D. Fogg*, E. Narni-Mancinelli*, B. Senechal, C. Touillet, N. Saederup, J. Leemput, K. Bigot, L. Campisi, M. Abitbol, T. Molina, I. Charo, D. Hume, A. Cumano, G. Lauvau and F. Geissmann. CX3CR1+CD115+CD135+ common macrophage /DC precursor (MDP) and the role of CX3CR1 in their response to inflammation. J Exp Med. 2009 Mar 16;206(3):595. *First authors M. Bajénoff, E. Narni-Mancinelli, F. Brau, G. Lauvau. Visualizing early splenic memory CD8+ T cells reactivation against intracellular bacteria in the mouse. PLoS One. 2010 Jul 12;5(7):e11524. M. Rahmoun, M. Gros, L. Campisi, D. Bassand, A. Lazzari, C. Massiera, E. NarniMancinelli, P. Gounon, G. Lauvau. Priming of protective anti-Listeria monocytogenes memory CD8+ T cells requires a functional SecA2 secretion system. Infect Immun. 2011 Jun;79(6):2396. L. Campisi, SM. Soudja, J. Cazareth, D. Bassand, A. Lazzari, F. Brau, E. Narni-Mancinelli, N. Glaichenhaus, F. Geissmann, G. Lauvau. Splenic CD8α⁺ dendritic cells undergo rapid programming by cytosolic bacteria and inflammation to induce protective CD8⁺ T-cell memory. Eur J Immunol. 2011 Jun;41(6):1594. E. Narni-Mancinelli*, J. Chaix*, A. Fenis, Y. Kerdiles, N. Yessaad, A. Reynders, C. Grégoire, H. Luche, S. Ugolini, E. Tomasello, T. Walzer, E. Vivier. Fate mapping analysis of NKp46+ lymphoid cells. PNAS. 2011 Nov;108: 18324. *First authors E. Narni-Mancinelli, SM. Soudja, K. Crozat, M. Dalod, P. Gounon, F. Geissmann and G. Lauvau. Inflammatory Monocytes and Neutrophils Are Licensed to Kill During Memory Responses In Vivo. PLoS Pathog. 2011 Dec;7(12):e1002457. doi:10.1371/journal.ppat.1002457. Highlights in Nature Reviews Immunology 12, 74-74 doi:10.1038/nri3163 E. Narni-Mancinelli, BN. Jaeger, C. Bernat, A. Fenis, S. Kung, A. De Gassart, S. Mahmood, M. Gut, S. Heath, J. Estellé, E. Bertosio, F. Vély, L. Gastinel, B. Beutler, B. Malissen, M. Malissen, I. Gut, E. Vivier and S. Ugolini. Tuning of Natural Killer Cell Reactivity by NKp46 and Helios Calibrates T Cell Responses. Science. 2012 Jan 20;335(6066):344-8. Cited by Faculty of 1000 Biology Highlights in Nature Reviews Immunology 12, 150-151 doi:10.1038/nri3172 REVUES F. Geissmann, C. Auffray, R. Palframan, C. Wirrig, A. Ciocca, L. Campisi, E. NarniMancinelli, G. Lauvau. Blood monocytes: distinct subsets, how they relate to dendritic cells, and their possible roles in the regulation of T-cell responses. Immunol Cell Biol. 2008 Jul;86(5):398. E. Narni-Mancinelli, E. Vivier, YM. Kerdiles. The 'T-cell-ness' of NK cells: unexpected similarities between NK cells and T cells. Int Immunol. 2011 Jul;23(7):427. E. Narni-Mancinelli et E. Vivier. NK cell genesis: A trick of the trail. Immunity. 2012 Jan 27;36(1):1-3. BREVETS E. Narni-Mancinelli and G. Lauvau. Immunizing compositions for inducing bystander killing of pathogens. Number 07301 280.9. E. Narni-Mancinelli, S. Ugolini and E. Vivier. NKp46-mediated NK cell tuning. Number 61/499,485. COMMUNIQUES E. Narni-Mancinelli, D. Bassand et G. Lauvau. E. Vivier. Un nouveau mécanisme effecteur des lymphocytes T CD8+ mémoires qui permet une protection de voisinage. Société Française d’Immunologie, 2007 Sept;116:p13. E. Narni-Mancinelli et E. Vivier. Les souris knock-in NKp46iCre: le premier modèle murin de mutagénèse conditionnelle spécifique dans les cellules NKp46+. Société Française d’Immunologie, sous presse. PRIX Lauréate de l’Académie nationale de médecine, Prix Achard Médecine 2009, Les cellules CD8+ mémoires spécifiques de l’antigène et leur rôle dans l’élimination des agents infectieux par protection de voisinage. Prix du poster, Generation and characterization of NKp46Cre knock-in mice. Congrès NK2011, Mayence, Allemagne. QUALIFICATION Qualification Maître de Conférences commission CNU 65 en Février 2010. COMMUNICATIONS ORALES: CCL3+ memory CD8+ T cells activate TNF/ROI+ phagocytes. 2008, Université de Melbourne, Australie. Generation and characterization of NKp46Cre knock-in mice. Les Ravatys 2011, Château des Ravatys, France. POSTERS: E. Narni-Mancinelli, M. Bajénoff, D. Escriva, N. Glaichenhaus, and G. Lauvau. CD8+ T cell-mediated protective immunological memory against Listeria monocytogenes requires a specific subset of CD4+ T cells. EMBO Workshop 2005, Marseille, FRANCE. E. Narni-Mancinelli, L. Campisi, D. Bassand, J. Cazareth, P. Gounon, N. Glaichenhaus and G. Lauvau. Memory CD8+ T cells mediate antibacterial immunity via CCL3 activation of TNF/ROI+ phagocytes. EMBO Workshop 2007, Marseille, FRANCE. E. Narni-Mancinelli, L. Campisi, D. Bassand, J. Cazareth, P. Gounon, N. Glaichenhaus and G. Lauvau. CCL3+ memory CD8+ T cells activate TNF/ROI+ phagocytes. Keystone symposia 2007, Santa Fe, Nouveau-Mexique, USA. E. Narni-Mancinelli, J. Chaix, A. Fenis, T. Walzer, E. Tomasello, N. Yessaad, S. Ugolini and E. Vivier. Generation and characterization of NKp46Cre knock-in mice. NK2011, Mayence, ALLEMAGNE.