Recherche des nouvelles bactéries lactiques (LAB)

Recherche des nouvelles bactéries lactiques (LAB) à effet antibactérien et anti-
viral pour des applications médicales et alimentaires
Imad AL KASSAA
Laboratoire ProBioGEM-Polytech’Lille, USTL1-France
Laboratoire Microbiologie santé et environnement– Centre AZM de Biotechnologie, UL– Liban
Financement : Bourse Libanaise
Contexte scientifique et Problématique
Utilisation inappropriée des antibiotiques lors :
Traitements médicaux
Elevages animaux
Traitement prolongé avec les antiviraux
Augmentation des bactéries et des virus multi–résistants
Toxicité importante de ces agents thérapeutiques et des conservateurs chimiques
Inefficacité des traitements et manifestations cliniques
Protection na-
turelle des
muqueuses
intestinales et
vaginales
Bactériocines
Exopolysaccharides
Acide lactiques
H2O2
Bactériocines
Effet barrière
Applications
médicales
Applications
alimentaires
Anticancéreux, antioxydants Modulation de l’mmunité
Utilisation de conservateurs chimiques
Objectifs
 Recherche de souches de lactobacilles ayant des propriétés probiotiques.
- Recherche de souches de lactobacilles à propriétés antimicrobiennes (sécurité alimentaire)
1– Tests d’adhésion et colonisation sur des cellules animales (souches vaginales)
et sur des supports (souches alimentaires)
2– Evaluation de l’autoagrégation et de l’hydrophobicité des souches
3– Evaluation de la coagrégation des souches avec des pathogènes vaginaux et alimen-
taires
4- Extraction et purification des bactériocines
5– Evaluation de l’effet antiviral anti-HSV-2 des souches vaginales
Travaux en cours
Compétences développées
 Biologie moléculaire (PCR, clo-
nage et séquençages)
 Biochimie (extraction et purifica-
tion des protéines)
 Culture cellulaire
 Culture virale
 Management et gestion de projet
 Communication orale et écrite.
Conclusion
 Présence de substances anti- E. coli de nature non protéique chez 6 souches vaginales.
 Présence de substances anti– S. aureus de nature protéique chez 5 souches isolées
du matériel de traite.
Perspectives
- Caractérisation et évaluation de l’effet antibactérien et antiviral
des souches vaginales afin de développer un nouveau probio-
tique vaginal.
- Caractérisation des bactériocines isolées des souches alimen-
taires afin de développer un nouveau conservateur alimentaire.
Méthodologie
Souches vaginales Matériel de traite Isolement des LAB:
lactobacilles
Identification
1– API 50CH
2– rep-PCR
3– Séquençage de gène de l’ARN 16S
Propriétés Probiotiques:
 Adhésion
 Absence de cytotoxicité
 Inhibition des pathogènes
Conservation alimentaire:
 Souches bactériocinogènes
 Absence de cytotoxicité
 Conservation des propriétés organoleptiques
Résultats
 55 souches lactobacilles isolées de 135 prélève-
ments vaginaux de femmes libanaises saines
. Effet inhibiteur anti- E. coli chez 6 souches.
 130 souches lactobacilles isolées du matériel de
traite de 2 fermes en Algérie.
 Effet inhibiteur anti– S. aureus chez 5 souches.
rep-PCR
Caractérisation