TP1 chap 13

TP1 chap 13 TS
LE DIAGNOSTIQUE BACTERIOLOGIQUE
Mise en situation et recherche à mener
Les moyens de diagnostiquer une infection bactérienne sont de deux types :
- soit des méthodes de diagnostic direct mettant en évidence tout ou partie de la bactérie, ou des antigènes
bactériens ou de l’ADN bactérien,
- soit des méthodes de diagnostic indirect mettant en évidence des anticorps développés par l’organisme en
réponse à l’agression bactérienne. C’est le sérodiagnostic.
Ressources
Document 1 :
La brucellose est une maladie provoquée par des bactéries du genre Brucella. Presque tous les animaux domestiques et
sauvages sont sensibles à ces Brucella, d’où une dispersion mondiale de la maladie qui est une anthropozoonose
(maladie transmise des animaux à l’homme). La transmission interhumaine est exceptionnelle. On observe une
prédominance dans le bassin méditerranéen, l’Asie de l’Ouest, le Moyen-Orient, l’Amérique du Sud, l’Amérique
centrale et l’Afrique noire. L’OMS estime l’incidence mondiale de la maladie à 500 000 cas par an. En France, c’est une
maladie à déclaration obligatoire.
Chez les animaux, la maladie peut passer inaperçue ou provoquer des infections et inflammations génitales se
traduisant notamment chez la femelle par des avortements.
L’homme se contamine au contact des animaux infectés (bovins, caprins, ovins) ou à l’occasion de l’ingestion d’aliments
d’origine animale (lait, fromages). Le germe pénètre dans l’organisme par la peau ou par voie digestive. La maladie se
traduit chez l’homme soit par une forme aigüe avec une fièvre ondulante (diminution puis ré-augmentation de la
température corporelle pendant une quinzaine de jours). La forme aigüe peut évoluer vers une forme subaigüe avec
des atteintes osseuses, articulaires et méningées ou vers une forme chronique avec des manifestations générales
(fatigue généralisée, sueurs, douleurs diffuses, éruptions cutanées) et locales (atteintes osseuses, hépatiques,
neurologiques). Malgré un traitement antibiotique (cyclines de type et/ou rifampycine), il est quasiment impossible
d’obtenir une disparition définitive de la bactérie dans l’organisme du sujet infecté (persistance de la bactérie
responsable de manifestations chroniques). La guérison définitive est difficile à affirmer
Document 2 : Matériel disponible :
Une suspension de Brucella inactivée
Le sérum d’un animal guéri de la brucellose
Le sérum d’un animal au statut inconnu
Une micro pipette
Des embouts à micropipettes
Des agitateurs en plastique
Une carte pour agglutination à usage unique
Document 3 : principe du sérodiagnostic
L'addition d'anticorps spécifiques à une suspension
d'éléments figurés portant des antigènes
correspondants provoque leur agglutination
Etape 1 : Concevoir une stratégie pour résoudre une situation problème (durée maximale : 10 minutes)
On se propose d’effectuer un sérodiagnostic : on recherche la présence ou l’absence d’anticorps anti-brucella
dans le plasma d’un animal dont le statut séropositif ou séronégatif est inconnu.
Appeler l’examinateur pour vérifier votre proposition et obtenir la suite du sujet.
Votre proposition peut s’appuyer sur un document écrit (utiliser les feuilles de brouillon mises à votre
disposition) et/ou être faite à l’oral.

Etape 2 : Mettre en œuvre un protocole de résolution pour obtenir des résultats exploitables
- Sur un cercle, déposer un volume précis de 30 µl de sérum étudié et 30 µl d'antigène homogénéisé.
- Mélanger avec un agitateur.
- Procéder de même avec le contrôle positif, avec un nouvel agitateur
- Agiter lentement la plaque pendant quelques minutes.
Résultats :
- Pas d'agglutination : sérum négatif.
- Agglutination même minime : présence d'anticorps spécifiques.
Appeler l’examinateur pour vérifier les résultats et éventuellement obtenir une aide.
Etape 3 : Présenter les résultats pour les communiquer
Sous la forme de votre choix, traiter les données obtenues pour les communiquer.
Etape 4 : Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème
Exploiter les résultats obtenus pour identifier si l’animal au statut inconnu a été ou non en contact avec la
brucellose