J. Embryol. exp. Morph. Vol. 21, 3, pp. 509-15, June 1969 509 Printed in Great Britain Activite hormonale des gonades d'embryons de Poulet hypophysectomises Par HEMAYATOLLAH AKRAM & JEAN-PIERRE WENIGER Laboratoire de Zoologie et d' Embryologie Experimentale, Faculte des Sciences, Strasbourg Si, pour Jes uns, 1'hypophysectomie, chez rembryon de Poulet, ne retentit aucunement sur le developpement des gonades (Wolff & Stoll, 1937; Van Deth, Van Limborgh & Van Faassen, 1956), pour les autres, elle entraine la rarefaction du tissu interstitiel testiculaire et Famincissement du cortex ovarien (Fugo, 1940; Vogel, 1957; Betz, 1967). Nous n'entrerons pas dans ce debat. Nous avons vise un autre point. II est clair que les gonades des embryons de Poulet hypophysoprives doivent etre actives au moins jusqu'a un certain stade, sinon les canaux de Miiller ne disparaitraient pas chez les embryons males ni le canal de Miiller droit ne s'atrophierait chez les embryons femelles (Wolff & Stoll, 1937), comme c'est le cas chez les embryons castres par irradiation localisee des territoires presomptifs des gonades par les rayons X (Wolff, 1949; Wolff & Wolff, 1951). Mais on pouvait se demander si elles etaient encore actives vers la fin de Pincubation. On dispose de tests tres sensibles permettant de mettre en evidence Factivite hormonale des gonades: la regression du canal de Miiller (Wolff, Lutz-Ostertag & Haffen, 1952) et la feminisation du testicule (Weniger, 1958a, b) en culture in vitro. MATERIEL ET METHODES Des embryons de Poulet de race Leghorn blanche (Gallus gallus L.) ont ete mis a nu selon la technique de Wolff (1936) a 34-36 h d'incubation (11-13 paires de somites) et decapites. La section est faite au niveau de l'etranglement separant le mesencephale du rhombencephale. Les embryons survivants a 18-20 jours ont ete sacrifies et leurs gonades prelevees. Les gonades femelles ont ete associees a des testicules gauches normaux de 7-8 jours, les testicules, a des canaux de Miiller femelles de 7-8 jours. La methode de culture in vitro etait celle de Wolff & Haffen (1952). 1 Adresse des auteurs: Laboratoire de Zoologie et d'Embryologie Experimentale, Faculte des Sciences, Strasbourg, France. 510 H. AKRAM & J.-P. W E N I G E R Fig. 1. Embryon decapite NS 3 (20 jours). II represente le type moyen, avec un demi-bec inferieur tronque. Chez d'autres embryons, celui-ci est entier, chez d'autres encore, il manque tout a fait. Tableau 1. Mortalite consecutive a la decapitation Serie experimentale A Embryons operes < 1 28 2 16 3 26 4 22 5 22 ^ 6 20 Total 134 26 10 4 1 15 10 5 2 18 16 7 3 11 11 7 5 14 9 5 3 12 8 5 4 96 64 33 18 — — 1 — 1 — 3 — — — 2 — — 3 — — 3 — 3 9 1 Survivants a 5j 10J 15j 18 j Sacrifies a 18j 19j 20 j Gonades d* embryons decapites 511 RESULTATS Sur les 134 embryons operes dans six series experimentales, treize ont survecu jusqu'a 18-20 jours (Tableau 1). Tous manquaient du demi-bec superieur et Tinferieur manquait chez six, tandis que chez un autre il etait tronque (Fig. 1). Trois etaient coelosomiens et furent elimines; le developpement corporel general des dix autres etait normal. Sur ces dix, deux presentaient des anomalies deleur tractus genital: un embryon male (NS 67) presentait des vestiges mulleriens a droite et a gauche et un embryon femelle manquait de ses mesonephros et canal de Miiller droits. Les gonades paraissaient toutes de taille normale. Tableau 2. Associations de testicules (Vembryons decapites et de canaux de Miiller d'embryons femelles normaux de 7-8 jours Testicules Canal de Miiller 2 test. NS 37 2 test. NS 67 2 test. NS 93 Test. d. NS 106 Test. g. NS 106 Test. d. NS115 Test. g. NS 115 d. g. gd. ggg. Resultats Regression quasi complete Regression moitie posterieure (fig. 2) Regression extremite posterieure Regression extremite posterieure Regression extremite posterieure Regression quasi complete Regression quasi complete 7j 8j 8j 8j 8j 7j 7j Tableau 3. Associations de gonades femelies {fragments d'ovaire gauche ou gonades droites rudimentaires) d'embryons decapites et de testicules gauches d''embryons normaux de 7-8 jours Gonades femelles Ov. g. NS 3 Gon. d. NS 3 Ov. g. NS 85 Gon. d. NS 85 Ov. g. NSllO Gon. d. NS 110 Ov. g. NS 127 Gon. d. NS 127 Ov. g. NS 128 Gon. d. NS 128 Testicule gauche (jours) 7 7 7 7 8 8 7 7 7 7 Resultats Feminisation Feminisation Feminisation Feminisation Feminisation Feminisation (fig. 4, 5) Feminisation Feminisation Feminisation Feminisation Les testicules ont ete associes a des canaux de Miiller d'embryons femelles normaux de 7-8 jours (Tableau 2), les gonades femelles a des testicules gauches de 7-8 jours (Tableau 3). Les canaux de Miiller ont tous regresse plus ou moins completement (Fig. 2,3); les testicules se sont tous feminises (Fig. 4-6). Signalons, que, sauf dans le cas NS 106, ou les deux canaux de Miiller ont ete utilises pour 33 J E E M 21 512 H. AKRAM & J.-P. WENIGER l'association avec les testicules, les canaux controlateraux etaient cultives comme temoins en association avec une laniere de mesonephros. Nous avons aussi cultive des testicules gauches comme temoins. t Fig. 2 Fig. 3 • Fig. 4 Fig. 2. Les deux testicules de l'embryon NS 67 (18 jours), sans trace de bee, ont ete associes au canal de Miiller gauche d'un embryon femelle normal de 8 jours. Apres 4 jours de culture, toute la moitie posterieure du canal est resorbee. x 20. Fig. 3. Canal controlateral associe a une laniere de mesonephros. Fig. 4. Association de la gonade droite de l'embryon femelle NS 110 (19 jours) et d'un testicule gauche normal de 8 jours photographiee apres 4 jours de culture. Le testicule a gauche, x 20. DISCUSSION ET CONCLUSION Bien que les gonades se soient toutes revelees actives in vitro, il nous faut considerer le cas de l'embryon male NS 67 presentant des vestiges mulleriens des deux cotes. On peut en efTet supposer cette persistance de troncons mulleriens due a un amoindrissement de la secretion hormonale testiculaire, lui-meme du a l'absence d'hypophyse. Mais pourquoi ce resultat n'a-t-il ete obtenu qu'une fois sur cinq? L'embryon NS 67 serait-il le seul ou 1'hypophysectomie ait ete complete? S'il est vrai qu'il ne presente pas le moindre rudiment de bee, c'est aussi le cas de deux autres embryons males, prives totalement de canaux de Miiller. A ce propos, rappelons que nous avions pris soin, dans nos operations, 513 Gonades d'embryons decapites Fig. 5. Coupe a travers I'association de la figure 4 montrant le testicule feminise. x200. Fig. 6. Testicule temoin. x 200. 33-2 514 H. AKRAM & J.-P. WENIGER d'enlever le mesencephale tout entier, alors que Betz (1967) avait trouve suffisant de n'en enlever que la moitie anterieure et que Wolff & Kantor (1937) avaient obtenu a coup stir des cyclocephales sans hypophyse en n'irradiant la region anterieure de l'embryon que jusqu'au niveau d'un plan transversal passant un peu en arriere de l'etranglement qui separe le prosencephale du mesencephale. Aussi, sans que nous soyons autorises a exclure formellement que la persistance de troncons mulleriens chez l'embryon NS 67 puisse resulter d'un amoindrissement de la secretion hormonale testiculaire consecutif a l'hypophysectomie, sommes-nous plutot enclins a l'attribuer a Foperation ou meme simplement a l'ouverture de l'oeuf, dont on sait qu'elle s'accompagne d 'un efFet teratogene si on la pratique avant la 35e h environ (Wolff, 1936). Quoi qu'il en soit, nous pouvons repondre par l'afrlrmative a la question posee au debut de ce travail: la suppression de Thypophyse, chez l'embryon de Poulet, n'empeche ni l'apparition d'une activite hormonale dans les gonades ni son maintien jusqu'a la fin de l'incubation. Rappelons, pour terminer, que, chez l'embryon de Canard, l'hypophyse semble intervenir dans la secretion hormonale ovarienne, etant donne que la syrinx et le tubercule genital se differencient chez les embryons decapites selon le type male ou neutre, comme chez les embryons castres (Kinyon & Watterson, 1958). RESUME Les gonades d'embryons de Poulet hypophysectomises par decapitation a 34-36 h d'incubation ont ete prelevees a 18-20 jours et cultivees in vitro en association, les testicules avec des canaux de Miiller d'embryons normaux de 7-8 jours, les gonades femelles avec des testicules de 7-8 jours. Les canaux de Miiller ont regresse et les testicules se sont feminises. Ce double resultat demontre, chez l'embryon de Poulet jusque vers la fin de l'incubation, l'autonomie, au moins partielle, de la secretion hormonale gonadique vis-a-vis de l'hypophyse. SUMMARY Hormonal activity of the gonads of hypophysectomized chick embryos Male and female gonads of 18- to 20-day-old decapitated chick embryos were cultured in vitro in combination with normal embryonic chick Miillerian ducts and normal embryonic chick testes respectively, in order to test their endocrine activity. The Miillerian ducts regressed and the testes underwent feminization. These results indicate endocrine activity of the gonads of hypophysectomized chick embryos. Thus, in the chick embryo, endocrine activity of the gonads is at least partially independent of pituitary control. Gonades d'embryons decapites 515 TRAVAUX CITES BETZ, T. W. (1967). The effects of embryonic pars distalis grafts on the development of hypophysectomized chick embryos. Gen. Comp. Endocrinol. 9, 172-86. FUGO, N. W. (1940). Effects of hypophysectomy in the chick embryo. / . exp. Zool. 85, 271-97. KINYON, N. & WATTERSON, R. L. (1958). 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(Manuscrit reQu le 18 novembre 1968)