en suisse - RERO DOC

UNIVERSITE DE NEUCHATEL FACULTE DES SCIENCES
ETUDE SEROEPIDEMIOLOGIQUE
DE L'ENCEPHALITE A TIQUES
ETDE LA
BORRELIOSE DE LYME
'EN SUISSE
THESE
Présentée à la Faculté des Sciences de l'Université de Neuchâtel
pour l'obtention du grade de Docteur es Sciences
par
FLORIANE DE MARVAL
Licenciée en Biologie
Neuchâtel
-1994 -

IMPRIMATUR POUR LA THÈSE
Etude ,,séroépidémioloçfigue de l'encéphalite
A.tiques„et de: la, borréliose de Lyme en
..Suisse
de Mlle.,.Floriane...de...Maryal.
UNIVERSITÉ DE NEUCHÂTEL
FACULTÉ DES SCIENCES
La Faculté des sciences de l'Université de Neuchàtel
• sur le rapport des membres du jury,
.Jtoe.s..et...J^,,...A....Aes^ .L. Gern,.. .P.. Nuttall
...(Oxford}../.-..P..r-A.'...Baeber. ..(.Berne), et. M. Kremer.
..(Strasbourg.)
autorise l'impression de la présente thèse.
Neuchàtel, le 25...mat. 1.99.4

TABLE DES MATIERES
Page
INTRODUCTION L
1.1. Généralités 1
1.2. L'encéphalite à tiques 1
1.2.1. Définition et systématique 2
1.2.2. Manifestations cliniques 4
1.2.3. Traitement, prévention 4
1.2.4. Historique 5
1.2.5. Distribution géographique .5
1.2.6. Cycle épidémiologique .6
1.2.6.1. Vecteurs 6
1.2.6.2. Hôtes et réservoirs .7
1.2.6.3. Modes de transmission particuliers 9
1.2.7. L'encéphalite à tiques en Suisse 10
1.3. La borréliose de Lyme 11
1.3.1. Définition et systématique 11
1.3.2. Manifestations cliniques 12
1.3.3. Traitement, prévention 13
1.3.4. Historique 13
1.3.5. Distribution géographique 15
1.3.6. Cycle épidémiologique 15
1.3.6.1. Vecteurs 15
1.3.6.2. Hôtes et réservoirs en Europe 16
1.2.6.3. Modes de transmission particuliers 17
1.3.7. La borréliose de Lyme en Suisse 18
1.4. Ixodes ricinus 18
1.4.1. Systématique 18
1.4.2. Répartition géographique 19
1.4.3. Cycle épidémiologique 19
1.4.4. Importance médicale et vétérinaire 20

n. comare ET BUTS DU TRAVAIL 21
Hl. Recherche d'une méthode permettant de visualiser le virus CEE
directement dans la tique, sans devoir recourir à l'infection
de petits rongeurs 21
ÏÏ.2. Mise à jour de la distribution géographique des foyers
d'encéphalite à tiques 21
IÏ.3. Evaluation du risque comparé d'entrer en contact
avec le virus CEE et/ou B. burgdorferi 22
11.4. Etablissement d'un centre de diagnostic-con seil pour
l'encéphalite à tiques à l'Institut de Zoologie de Neuchâtel 22
ni. MISEENOEUVREDEL-ETUDE 22
IV. MATERIEL ET METHODES 25
!V.l. Analyse des cas déclarés d'encéphalite à tiques et
choix de la zone d'investigations 26
rv.2. Choix des populations humaines et obtention des
échantillons de sang 26
W2.1. Collectes de sang auprès du personnel forestier
et des cantonniers 27
IV.2.2. Collectes auprès des donneurs de sang 27
IV.2.3. Echantillons de sang en provenance des patients
d'hôpitaux 28
W24. Collectes de sang auprès des militaires dans le cadre
des Ecoles de recrues (ER) .. 28
IV3. Choix et capture des populations de tiques 29
IV3.1. Capture et conservation des tiques en phase de quête 29
IV3.2. Capture et conservation des tiques en cours
de gorgement 30
IVA Analyse des échantillons de sang 30
IVAl. ELISA 30
IVAl. 1. ELISA pour la détection des anticorps
de classe IgG dirigés contre le virus CEE 31

rv.4.1.2. ELISA pour la détecuon des anticorps
declasse IgM dirigés contre Ie virus CEE 32
IVA 1.3. ELISA pour la détection des anticorps
de classe IgG dirigés contre B. burgdorferi 32
IV.4.2. Test de capture (ELISA-Capture) pour la détection des
anticorps de classe IgM dirigés contre B. burgdorferi 33
IV.4.3. Test de Western blot pour la détection des anticorps
de classe IgG dirigés contre B. burgdorferi 34
IV.4.4. Immunofluorescence indirecte (IFAT: Immuno-
fluorescence antibody test) pour la détection des
anticorps de classe IgG dirigés contre B. burgdorferi 35
IV.5. Analyse des tiques 35
IV.5.1. Préparation des homogénats de tiques 35
IV.5.2. Préparation des tiques sur lames de microscopie
("squashes") 36
IV.5.3. Immunofluorescence (IF) 36
IV.5.3.1. Immunofluorescence indirecte sur "squash"
(IF/S) pour la détection du virus CEE 36
IV.5.3.2. Immunofluorescence directe sur "squash"
(IF/S) pour la détection dei?, burgdorferi 37
IV.5.3.3. Immunofluorescence Indirecte sur cultures de
cellules (ÏF/C) pour la détection du virus CEE ..38
IV.5.4. Titration du virus CEE sur cultures cellulaires
("Plaque assay") 39
IV.5.5. PCR 39
IV.5.5.1. PCR pour la détection du virus CEE 40
IV.5.5.2. PCR pour la détection de B. burgdorferi 41
IV.5.6. ELISA pour la détection du virus CEE 43
IV.5.7. Infection de souriceaux pour la détection du virus CEE ....44
RECHERCHE DXINE METHODE DE DETECTION
DU VIRUS CEE DANS LA TIQUE 45.
V.l. Comparaison de Ia fiabilité des méthodes testées 45
V.2. Comparaison du pouvoir de détection des méthodes testées 49
V .3. Discussion 52