pratique quotidienne Satellitisme plaquettaire et lympho

pratique quotidienne
Satellitisme plaquettaire et lympho-agglutination
exclusivement aux lymphocytes atypiques
révélant un lymphome B de la zone marginale
A marginal zone-B cell lymphoma revealed by platelet satellitism
and lympho-agglutination phenomenon around atypical lymphocytes
A. Debourgogne
1
V. Latger-Cannard
1
K. Montagne
2
F. Plénat
2
T. Lecompte
1
1
Service d’hématologie biologique,
<[e-mail]>
2
Service d’anatomie et cytologie
pathologiques, CHU de Nancy
Article reçu le 11 décembre 2006,
accepté le 27 janvier 2007
Résumé.Un homme de 48 ans, a présenté une thrombopénie associée à une
hyperlymphocytose au cours de l’exploration d’un syndrome infectieux persis-
tant plus de 15 jours. L’observation du frottis sanguin a montré la présence de
cellules lymphomateuses, ainsi qu’un phénomène de satellitisme des plaquet-
tes aux lymphocytes et de lympho-agglutination, ces deux anomalies n’étant
présentes qu’autour de lymphocytes anormaux. Nous avons pu mettre en évi-
dence que ce phénomène est thermo-dépendant (37 °C), anticoagulant dépen-
dant (acide éthylène diamine tétra-acétique, EDTA), non reproductible par du
plasma sain et non transitoire. La caractérisation de l’hyperlymphocytose par
immunophénotypage, étude cytologique et histologique a révélé un lymphome
de la zone marginale. Le satellitisme plaquettaire aux lymphocytes semble être
comme dans le cas des polynucléaires neutrophiles un phénomène immunolo-
gique médié par une immunoglobuline reconnaissant un antigène cryptique sur
la structure GPIIb/IIIa de la surface des plaquettes. De plus, le fait que ces
phénomènes de satellitisme plaquettaire et de lympho-agglutination n’impli-
quent que les lymphocytes atypiques pourrait impliquer une immunoglobuline
monoclonale exprimée par la cellule lymphomateuse.
Mots clés :satellitisme plaquettaire, lympho-agglutination, pseudothrombo-
pénie, lymphome de la zone marginale, immunophénotypage
Abstract.A 48-year-old man, with persistent pyrexia, presented with throm-
bocytopenia and lymphocytosis. The peripheral blood smears showed atypical
lymphocytes and a platelet satellitism phenomenon around atypical lymphocy-
tes associated to lympho-agglutination. Platelet satellitism was exclusively
observed with atypical lymphocytes in EDTA-treated blood and at room tem-
perature. This phenomenon was not observed when adding normal plasma and
could be reproduced several times. Flow cytometry analysis of the peripheral
blood, cytological and histological studies revealed a marginal zone-B cell
lymphoma. The mechanism underlying platelet satellitism is not fully under-
stood, but is likely to involve an immunologic binding of EDTA-dependent
antiplatelet autoantibodies directed against the platelets glycoprotein IIb/IIIa
complex. The association between platelet satellitism and lymphoma could
also involve a monoclonal Ig secreted by lymphoma cells.
Key words:platelet satellitism, lympho-agglutination, pseudothrombocyto-
penia, marginal zone-B cell lymphoma, immunophenotype
abc
Ann Biol Clin 2007 ; 65 (3) : 287-90
doi: 10.1684/abc.2007.0053
Ann Biol Clin, vol. 65, n° 3, mai-juin 2007 287
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Le satellitisme des plaquettes aux polynucléaires neutro-
philes est un phénomène rare mais largement rapporté
dans la littérature et survenant in vitro lorsque l’échan-
tillon sanguin est prélevé en présence de l’anticoagulant
acide éthylène diamine tétra-acétique (EDTA). Nous rap-
portons ici un cas de satellitisme de plaquettes et de
lympho-agglutination autour des lymphocytes atypiques
dans le cadre d’un lymphome B de la zone marginale.
L’observation
Un homme de 48 ans présente un épisode infectieux ORL
persistant plus de 15 jours et résistant à une antibiothéra-
pie standard. Un hémogramme à partir d’un prélèvement
sanguin prélevé en présence d’EDTA est réalisé (hémati-
mètre Advia 2120, Bayer) : hémoglobine : 12,2 g/dL ;
volume globulaire moyen : 94 fL ; plaquettes : 102 G/L ;
leucocytes : 16,86 G/L avec comme différentielle leucocy-
taire : PNN à 19,2 %, lymphocytes à 67 % et LUC (large
unstained cell) à 13,8 %.
L’existence d’une thrombopénie associée à une anomalie
de répartition des leucocytes justifie la réalisation d’un
frottis sanguin coloré au May-Grünwald-Giemsa. On
observe une population lymphoïde majoritaire avec pré-
sence de lymphocytes atypiques de plus grande taille,
rapport nucléo-cytoplasmique diminué, noyau irrégulier à
chromatine fine, cytoplasme clair non granuleux. Ces
mêmes cellules présentent une autre atypie puisqu’elles
présentent des images de satellistisme plaquettaire, qui
concernent l’ensemble des lymphocytes atypiques
(figure 1). Cinq à 20 plaquettes de taille normale et bien
granuleuses entourent les cellules lymphomateuses, en
paraissant souvent nichées dans des encoches cytoplasmi-
ques. Il est également observé des images de « lympho-
agglutination », les cellules lymphoïdes atypiques sem-
blent agglutinées par l’intermédiaire des plaquettes qui
réalisent des ponts entre deux cellules (figure 2). Il est
important de noter que ces deux phénomènes, satellis-
tisme plaquettaire et « lympho-agglutination », n’impli-
quent que les cellules lymphomateuses et non les lympho-
cytes de morphologie normale, les polynucléaires
neutrophiles ou les monocytes (figure 3).
L’examen de ce frottis a montré donc d’une part, une
hyperlymphocytose atypique qu’il faut caractériser et,
d’autre part, un satellitisme plaquettaire, anomalie artéfac-
tuelle rendant la validation de la numération plaquettaire
impossible du fait d’une sous-estimation causée par ce
phénomène.
Afin de pouvoir valider la numération plaquettaire, le pré-
lèvement a été incubé à 37 °C pendant 40 minutes ce qui a
fait disparaître le phénomène de satellistisme à l’observa-
tion entre lame et lamelle. La numération plaquettaire
après incubation à 37 °C est alors de 139 G/L. L’analyse
des frottis médullaires réalisés sans anticoagulant ne mon-
tre pas de phénomène de satellitisme plaquettaire. Ce phé-
nomène est donc thermo-dépendant et anti-coagulant
dépendant. Lors de l’incubation du plasma EDTA du
patient avec le sang d’un témoin sain en présence d’EDTA
pendant 20 minutes, le satellitisme plaquettaire n’est pas
observé sur les leucocytes du témoin. Nous n’avons donc
pas pu transférer ce phénomène, ce qui semble logique
puisqu’il n’était observé qu’avec les lymphocytes atypi-
ques et non avec des lymphocytes normaux. Enfin, un
frottis sanguin réalisé un mois plus tard met à nouveau en
évidence ce phénomène. Le satellitisme des plaquettes
aux lymphocytes atypiques n’est donc pas un phénomène
transitoire.
Afin de caractériser l’hyperlymphocytose, il est réalisé un
immunophénotypage sanguin qui montre la présence
d’une population lymphoïde B monotypique (kappa,
expression forte) CD5- et exprimant les marqueurs CD19,
A
B
Figure 1A et B. Satellitisme des plaquettes autour des lympho-
cytes atypiques (frottis sanguin coloré au May-Grünwald-
Giemsa : grossissement x 1 000).
pratique quotidienne
Ann Biol Clin, vol. 65, n° 3, mai-juin 2007288
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CD20, CD23, CD22, CD79a et FMC7 avec un score de
Matutes à 2. L’aspect cytologique et phénotypique est en
faveur d’une hémopathie lymphoïde B autre qu’une leucé-
mie lymphoïde chronique (LLC), ce qui justifie la pour-
suite de l’exploration médullaire. Le myélogramme mon-
tre une moelle de cellularité normale avec une infiltration
par une population de lymphocytes matures (49 %) de
morphologie similaire à celle observée dans le sang (rap-
port nucléo-cytoplasmique diminué, noyau irrégulier à
chromatine fine, cytoplasme clair plus étendu). L’analyse
histologique montre une moelle infiltrée sur un mode
interstitiel et intravasculaire par un lymphome B à petites
cellules CD20+, CD5-, en faveur d’un lymphome de la
zone marginale.
Discussion
Le satellitisme des plaquettes est un phénomène artéfac-
tuel rare, qui s’observe la plupart du temps autour des
polynucléaires neutrophiles avec un cas sur 12 000 numé-
rations, soit 0,008 % [1]. Il survient in vitro lorsque
l’échantillon sanguin est prélevé en présence d’EDTA,
conservé et analysé à température ambiante, mais ne sur-
vient pas si le prélèvement est maintenu à 37 °C dès son
recueil ou si le sang est prélevé en présence d’autres anti-
coagulants tels que l’héparine, le citrate ou l’oxalate
[1, 2].
Deux mécanismes sont proposés pour expliquer le phéno-
mène de satellitisme plaquettaire autour des leucocytes
[3]. Le premier consiste en un mécanisme immunologique
reposant sur la présence d’un auto-anticorps. Les résultats
de l’étude de Bizzaro et al. [1] suggèrent que ce phéno-
mène est médié par des immunoglobulines d’isotype G
reconnaissant un épitope cryptogénique, exposé en pré-
sence d’EDTA à température ambiante et localisé à la fois
sur la glycoprotéine GPIIb-IIIa (CD41/61) de la mem-
brane plaquettaire et sur le récepteur FccRIII (CD16) de la
membrane du polynucléaire. La survenue du phénomène
en présence du fragment Fab’
2
des IgG prouve que la
liaison est indépendante du fragment Fc de l’immunoglo-
buline et que le même déterminant antigénique est
reconnu au niveau des plaquettes et des polynucléaires. Le
second mécanisme, proposée par Christopoulos et al. [4]
attribue un rôle possible à la thrombospondine contenue
dans les granules alpha plaquettaires. À la faveur d’une
ABC
Figure 2A, B et C. Lympho-agglutination des lymphocytes atypiques par les plaquettes (frottis sanguin coloré au May-Grünwald-
Giemsa : grossissement x 1 000).
BAC
Figure 3. Lymphocyte normal (A), PNN (B) et monocyte (C) ne présentant pas de satellistisme plaquettaire (frottis sanguin coloré au
May-Grünwald-Giemsa : grossissement x 1 000).
Satellitisme plaquettaire
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stimulation plaquettaire, cette protéine est secrétée et
pourrait réaliser des ponts entre plaquettes et leucocytes
via le récepteur GPIV. Cette hypothèse n’a jamais été, à ce
jour, démontrée dans la littérature.
Le satellitisme des plaquettes survient préférentiellement
autour des polynucléaires mais ce phénomène a été égale-
ment rapporté avec les monocytes [5]. La présence du
récepteur FccRIII à la surface des monocytes peut expli-
quer ce phénomène bien qu’il existe deux types de récep-
teurs : FccRIIIb sur la membrane des polynucléaires neu-
trophiles et FccRIIIa à la surface des monocytes et des
cellules natural killer (NK) [3]. Les autres cellules myé-
loïdes ne présentent pas cette particularité, en revanche
certains lymphocytes, comme dans notre étude de cas,
semblent impliqués dans le satellitisme plaquettaire. En
effet, l’étude d’Espanol et al. [6] met en évidence un
satellitisme plaquettaire à la fois autour des polynucléaires
neutrophiles et de lymphocytes à grains. Ces lymphocytes
(de phénotype NK) présentent le marqueur CD16, ce qui
permet de conclure à la même hypothèse mécanistique
que le satellitisme autour des polynucléaires neutrophiles.
Notre observation se distingue de cette étude par l’absence
de satellitisme autour des PNN.
L’originalité de notre observation réside dans le fait que le
satellitisme touche exclusivement les lymphocytes atypi-
ques, ce qui permet d’évoquer une liaison entre le satelli-
tisme et la pathologie lymphomateuse. Un tel phénomène
a déjà été rapporté pour un contexte de lymphome du
manteau sur une population de cellules B monoclonales
exprimant les marqueurs CD5 et CD20 [7]. Les cellules
lymphomateuses du patient expriment également le mar-
queur CD20, ce qui pourrait faire évoquer la présence
d’un antigène cryptogénique commun à GP IIb/IIIa et à
CD20. Mais CD20 est présent sur toute la lignée B, cette
hypothèse ne permet donc pas d’expliquer le caractère
exclusif du satellitisme vis-à-vis des lymphocytes atypi-
ques. Enfin, la dernière hypothèse envisagée pour expli-
quer le phénomène de satellitisme plaquettaire limité aux
cellules lymphomateuses serait la reconnaissance, par
l’immunoglobuline monoclonale secrétée par les lympho-
cytes atypiques, d’un antigène cryptogénique exprimé par
les plaquettes.
Ce cas original de satellitisme des plaquettes aux lympho-
cytes atypiques constitue un autre exemple de pseudo-
thrombopénie EDTA dépendante, à côté des agglutina-
tions des plaquettes ou du satellitisme des plaquettes aux
polynucléaires neutrophiles. Le biologiste doit donc tou-
jours rester vigilant à ce phénomène qui doit l’inciter à
réaliser des états frais et des frottis sanguins lors de la
validation d’une numération plaquettaire. Dans ces situa-
tions, un chauffage ou une nouvelle analyse à partir d’un
prélèvement réalisé en présence d’un autre anticoagulant
(citrate, héparine) permettra de valider la numération pla-
quettaire.
Références
1. Bizzaro N, Goldschmeding R, Von dem Borne A. Platelet satellitism is
FccRIII (CD16) receptor-mediated. Am J Clin Pathol 1995 ; 103 :
740-4.
2. Shahab N, Evans ML. Images in clinical medecine : platelet satelli-
tism. NEnglJMed1998 ; 338 : 591.
3. Dauendorffer JN, Latger-Cannard V, Lesesve JF, Lecompte T. Satelli-
tisme des plaquettes aux polynucléaires neutrophiles. Ann Biol Clin
(Paris) 2000 ; 58 : 91-3.
4. Christopoulos C, Mattock C. Platelet satellitism and alpha granule
proteins. Am J Clin Pathol 1991 ; 44 : 788-9.
5. Cohen AM, Lewinski UH, Klein B, Djaldetti M. Satellitism of plate-
lets to monocytes. Acta Haematol 1980 ; 64 : 61-4.
6. Espanol I, Muniz-Diaz E, Domingo-Claros A. Platelet satellitism to
granulated lymphocytes. Haematologica 2000 ; 85 : 1322.
7. Cesca C, Ben-Erza J, Riley RS. Platelet satellitism as presenting fin-
ding in mantle cell lymphoma. A case report. Am J Clin Pathol 2001 ;
115 : 567-70.
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