Immunologie Immunologie • But du système immunitaire: – Distinguer le soi du non-soi • Le non-soi – Les antigènes • Immunité: – Tous les mécanismes utilisés par l’hôte pour se protéger et combattre le non-soi Non-Soi - Les Antigènes • Tout composé qui peut réagir avec les participants du système immunitaire – Ex. anticorps • Épitope: Caractéristique de l’antigène qui permet la reconnaissance comme étant nonsoi – Ex. Lipides, protéines, lipopolysaccharides L’Antigène Épitopes Virus=Antigène Diagnostic Sérologique/Immunologique • Déterminer la présence d’un antigène : • Un organisme • Une protéine • Une toxine • Un anticorps 5 Dosage par la Méthode ELISA • Utilisé pour déceler la présence d’anticorps ou d’antigènes – Très sensible – Quantitatif – Rapide 6 ELISA – Détection d’Antigène Sérum (source d’Ag) est ajouté à des puits de plastique Agent bloquant est ajouté Ac contre Ag est ajouté Lavage Ac détecteur est ajouté Lavage Substrat est ajouté Antigène Présent Antigène Absent ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ 7 ELISA – Détection d’Anticorps Ag cible pour Ac à déceler ajouté aux puits Agent bloquant est ajouté Sérum à tester est ajouté Lavage Ac détecteur est ajouté Lavage Substrat est ajouté Ac Présent Ac Absent ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ ENZ 8 Interprétation des Résultats Essai pour Ag de virus X Dilutions Standard Patient 1 Patient 2 Patient 3 Témoin nég. 1/2 1/4 3.8 1.9 0.1 1/16 1/32 0.8 0.4 0.2 0.1 0.04 0.03 0.05 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.8 0.4 0.2 0.1 0.05 0.03 0.03 0.03 3.6 3.0 1.6 0.8 0.4 0.2 0.1 0.05 0.12 0.06 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 Plaque d’ELISA 1/8 1/64 1/128 1/256 Lectures d’absorbances Conclusions: Patient 1 n’est pas infecté Patients 2 & 3 sont infectés Patient 3 possède une charge 8X plus élevée de l’Ag 9 Interprétation des Résultats Essai pour Ac contre virus X Dilutions Standard Patient 1 Patient 2 Patient 3 Témoin nég. Plaque d’ELISA 1/2 1/4 3.8 1.9 2.5 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 0.8 0.4 0.2 0.1 0.04 0.03 1.2 0.6 0.3 0.15 0.07 0.03 0.03 0.1 0.05 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 3.6 3.0 1.6 0.8 0.4 0.2 0.1 0.05 0.12 0.06 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 Lectures d’absorbances Conclusions: Patient 1 & 3 sont séropositifs Patients 2 est séronégatif 10