DCEM1 :Hématologie fondamentale : 2009-10 Lignées sanguines Pr Philippe NGUYEN Dr Sylvie DALIPHARD Dr Baptiste GAILLARD Faculté de Médecine et CHU de Reims Les différents types cellulaires • Globules rouges ou hématies (lignée érythroblastique) • Plaquettes (lignée mégacaryocytaire) • Leucocytes : – Polynucléaires • Neutrophiles • Eosinophiles • Basophiles – Monocytes – Lymphocytes Classification morphologique -Microscopie optique -Coloration May Grünwald Giemsa Origine • Moelle osseuse : cellule souche hématopoïétique • Le processus de production (multiplication – différenciation) = hématopoïèse – – – – Érythropoïèse (globules rouges) Mégacaryocytopoïèse (plaquettes) Granulopoïèse (polynucléaires) Lymphopoïèse (lymphocytes) • Notion de renouvellement, de durée de vie limitée des cellules sanguines, de sénéscence et de mort cellulaire Décrire une cellule sanguine • Observation au microscope optique : – Sang total sur EDTA – Frottis sanguin, sur lame – Coloration May Grünwald Giemsa • Méthodologie : reconnaissance de la cellule : – – – – Forme, présence ou non d’un noyau Description du noyau Description du cytoplasme Évaluation de la taille des cellules • Intérêt : – En physiologie : structure-fonction – En diagnostic : normal ou pathologique MGG GB : 10-20 m GR : 7-8 m Plaquettes : 2-3 M X 100 Cellules anucléées Hématies Plaquettes MGG Ici, en agrégat plaquettaire Habituellement, isolées Globules rouges Morphologie : petite cellule anucléée Microscopie à balayage Constituant principal : l’Hémoglobine Membrane érythrocytaire Bicouche (fluide) phospholipidique LIPIDES : 42 % GLUCIDES : 8 % PROTEINES : 50 % Cytosquelette SPECTRINE, ACTINE, ANKYRINE … Structure (quaternaire) de l’hémoglobine MM 64 kDa 2 paires de chaînes polypeptidiques Contenant une porphyrine contenant un atome de FER Biochimie érythrocytaire • L’hémoglobine • Le 2-3 Di PhosphoGlycérate = 2,3 DPG • Métabolisme énergétique : – Glycolyse anaérobie (90 %) : • pyruvate kinase… – Glycolyse aérobie : • glucose 6 phosphate déshydrogénase (G6PD) • 6 phosphogluconate déshydrogénase • Système d’oxydoréduction : – Système de maintien du glutathion à l’état réduit (glutathion réductase) – Système de réduction de la méthémoglobine (methémoglobine réductase à NADH) Définitions • Hémolyse : destruction des hématies • Hémolyse physiologique – Sénescence des hématies – 120 jours Plaquettes Microscopie électronique à balayage Plaquette au repos Plaquettes activées Pseudopodes Agrégats Microscopie optique Agrégat plaquettaire Plaquettes Morphologie : petite cellule anucléée Granulations Granules denses (ME) : Granules a : Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation Plaquettes Morphologie : petite cellule anucléée Granulations Granules denses (ME) : -Sérotonine -Calcium++ -Adénosine Di phosphate ADP Granules a : FWillebrand, fibrinogène Facteurs de croissance, fibronectine Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation Plaquettes Granules denses (ME) : -Sérotonine -Calcium -ADP Granules a : FWillebrand, fibrinogène Morphologie : petite cellule anucléée Granulations Expression de récepteurs membranaires : -GPIb-V-IX (CD42) : F Willebrand -GPIIb-IIIa (CD41) : Fibrinogène -P-sélectine (CD62P) PDGF, TGFa/b,, fibronectine Hémostase : primaire, interaction Plaquette-vaisseaux, surface Procoagulante- Inflammation Schéma de la plaquette FIBRINOGENE Polynucléaires neutrophiles Morphologie : -10-12 µm -Cytoplasme abondant : granulations - Noyau réniforme (cellule immature) ; - Noyau segmenté (cellule mature) Granulations azurophiles -Myéloperoxydase -Phosphatase acide -Estérase -Cathepsines D, G Polynucléaires neutrophiles Demi-vie courte : 4-10H Propriétés : -Migration -Chimiotactisme -Adhérence -Phagocytose -Production de radicaux oxygénés Granulations azurophiles -Myéloperoxydase -Phosphatase acide -Estérase -Cathepsines D, G Antigènes de membrane : CD45 CD11/CD18 (b2 intégrines) L-sélectine (CD62L) Adhésion leucocytaire (microscopie électronique) Noyau Granulations Endothélium Pseudopodes Polynucléaires éosinophiles Morphologie : -9-12 µm - Cytoplasme abondant : granulations - Noyau bilobé, réniforme Granulations éosinophiles -Protéine basique majeure -Peroxydase spécifique -Protéine cationique de l’Eo -Cristaux Charcot-Leyden -lysophospholipase Polynucléaires basophile Morphologie : -8-10 µm - Noyau rond Granulations basophiles histamine héparine Récepteurs de haute affinité pour IgE Mastocytes = tissus Monocytes Morphologie : -9-15 µm - Noyau arrondi, indenté -Cytoplasme granuleux : Lysosomes, mitochondrie - Peroxydase +++ Monocytes Propriétés : -Migration -Chimiotactisme -Adhérence -Phagocytose -Production de radicaux oxygénés Fonctions immunologiques -Présentation antigénique -Production de cytokines Macrophages = tissus Antigènes de membrane : CD45 CD11/CD18 (b2 intégrines) L-sélectine (CD62L) Antigènes de membrane : CD14 : Récepteur du Lipopolysaccharide (LPS) des bactéries+++ CD32, CD64 : récepteur des immunoglobulines (FcgR ) MACROPHAGES : cellule non circulante Lymphocytes Morphologie : G0 -7-9 µm - Noyau volumineux, à chromatine dense -Cytoplasme mince Pas de différence morphologique entre les lymphocytes T et B Plasmocyte : cellule non circulante Questions d’examen • Décrire succinctement la morphologie plaquettaire, d’un polynucléaire neurophile, d’une hématie (septembre 2008) • Décrire succinctement la morphologie d’un lymphocyte normal, non activé (juin 2008) • Décrire succinctement la morphologie d’un plasmocyte, en indiquant la relation entre l’aspect morphologique et la fonction principale de la cellule (juin 2008) • Décrire succinctement la morphologie plaquettaire en indiquant ses principaux constituants