File - Cours L3 Bichat 2012-2013
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Les anticorps monoclonaux et protéines de fusion thérapeutiques Pr Renato MONTEIRO Service d’Immunologie Hôpital Bichat G. Köhler (1946-1995) et C. Milstein (1927-2002) Travaux sur les myélomes – Publication en 1975 – Protéine de Bence Jones Les hybridomes Prix Nobel de médecine en 1984 avec N.K. Jernes – "for theories concerning the specificity in development and control of the immune system and the discovery of the principle for production of monoclonal antibodies" Définition Anticorps monoclonal – Population homogène d ’anticorps issus d ’un « seul et unique » clone de cellules B Avantage – – – Spécificité Affinité Production massive et constante Différence entre sérum polyclonal et anticorps monoclonal Voie de synthèse des bases puriques et pyrimidiques AICR Aminoptérine Hypoxanthine Orotic acid FICR PRPP HGPRT Orotidine MP Guanine Inosine-5 P HGPRT Uridine MP Guanosine MP Adénosine MP Cytidine MP GDP ADP Cytidine DP GTP dGTP ATP dATP CTP dCTP UPD UTP dUMP Aminoptérine DHFR RNA DNA dTTP dTDP TK Les hybridomes Synopsis Primo immunisation 2 semaines Rappel 1 - 3 mois Saignée Tests Développer et tester la méthode de cribblage 10 jours La production Dernier rappel Fusion Cribblage Expandre et congeler Clonage en cellule unique Cribblage et expansion des clones positifs 3 jours 1 semaine Production des anticorps monoclonaux L'immunisation – Les sources d'antigènes – degré de pureté:élimination des contaminants haptènes, protéines porteuses L'immunisation de l'animal dose et forme de l ’antigène adjuvants voie et nombre d ’injection Dose antigène Immunogen Antigen Protein Hapten Quantity of immunogen per injection & per mouse lyophilized protein 2 - 50 µg in solution 2 - 50 µg included in polyacrylamide gel slices 1 - 10 µg Peptide 1 - 10 µg Nucleotide Carbohydrate and related compounds Chemicals (natural and synthetic compounds) Adjuvants Augmentation de l ’intensité de la réponse immunitaire Accroissement de l ’effet mémoire Stimulants non spécifiques de la réponse immunitaire 3 composantes principales: – – – huile minérale/eau : protection de l ’antigène, transport de l ’antigène particules : agrégation de l ’antigène, dépôt antigénique parois de bactéries : réaction inflammatoire Les animaux Nombre d’injections Exemple : Immunisation d’une souris pour la fusion des lymphocytes des ganglions day 0 7 15 21 28 35 injection 1st 2nd 3rd 4th 5th 6th sera pre-immune Lapin : 120 à 200 µg Poulet : 40 à 80 µg Souris : 8 à 200 µg Fusion Exemple de calendrier de production General Procedure Step Time (month) 1 Develop and test screening method Immunisation Fusion, selection and screening Cloning and isotyping Delivery of clones 2 3 4 5 6 Technique d'hybridation cellulaire ou hybridome Les partenaires de fusion – – Méthode de fusion – – cellules B extraites d ’organes lymphoïdes secondaires (rate, ganglions) cellules myélomateuses : cellules MOPC de souris Balb/c HGPRTChimique Physique Sélection, clonage Expansion Lignées cellulaires (myélomes) Technique d'hybridation cellulaire ou hybridome (2) Fusion chimique: Poly Ethylène Glycol (PEG) – – – – fusion des membranes cytoplasmiques rendement de fusion de l ’ordre du % (1/10-5 cellules) DMSO renforce la viabilité cellulaire utilisation de facteurs de « rencontre » Fusion physique : Electrofusion – – – Ouverture de pores dans la cellule par des pulses électriques technique onéreuse moins destructrice Technique d'hybridation cellulaire ou hybridome (3) Sélection sur milieu sélectif HAT – – – – – – – Hypoxanthine Aminopterine Thymidine facteurs de croissance : IL6 b mercaptoethanol sérum de veau fœtal fibroblastes sous atmosphère CO2 seuls les hybridomes se développent 1 x 105 cellules/ml Méthodes de criblage ou screening Reproductible Fiable Rapide Bon marché Automatisable Versatile Méthodes de criblage ou screening Immuno précipitation – Réactions d ’agglutination – – radio isotope Immuno enzymologie (EIA) – Hématies Particules de latex Radio immunologie (RIA) – Ouchterlony, Mancini enzyme (ELISA) Compteur de cellules (Cell sorter) Western Blot Immuno Analyse Enzymatique 2 techniques – – « l ’antigène » est pris en sandwich entre deux anticorps: – – Compétition Sandwich : la plus utilisée pour ce propos l ’anticorps de capture immobilisé en excès sur la plaque solide le conjugué enzymatique Utilisé pour le dosage d ’antigènes multivalents Poids moléculaire élevé de l ’antigène étapes de séparations nécessaires ELISA sandwich Anticorps de capture immobilisés Elimination des antigènes non retenus Antigènes à doser 1ère étape d ’incubation immunologique ELISA sandwich Conjugué immuno-enzymatique 2ème étape d ’incubation immunologique ELISA sandwich S P S P Produit coloré Enzymes et substrats Phosphatase alcaline P-nitrophényl Phosphate ELISA 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate nitro blue tetrazolium Blotting Histologie Naphtol AS-TR phosphate Fast red RC Blotting Histologie 2,2 ’-azino-bis (3-ethylbenz thiazoline-6-sulfonic acid) O-phenylenediamine ELISA ELISA 3,3 ’-5,5 ’ teramethylbenzidine base or dihydrochloride (TMB) ELISA 3,3 ’-diaminobenzidine Blotting Histologie 3-amino-9-ethylcarbazole (AEC) Blotting Histologie 4-chloro-1-naphtol (4ClN) Blotting Histologie Peroxidase Sélection du clone producteur Sélection d ’une seule cellules et mise en culture. – – – – – Clonage dans l’Agar, dans l’Agarose Clonage sur méthyle cellulose par dilution limite par micromanipulation par trieur de cellules Technique d'hybridation cellulaire ou hybridome Clonage dans l’Agar, dans l’Agarose – on visualise directement les colonies cellulaires dans l ’agar, que l ’on remet en culture après dilution. Clonage par dilution limite – – – – la plus utilisée dans les laboratoires. Réalisée directement dans une plaque de microtitration peu onéreuse longue, fastidieuse, laborieuse. Production des anticorps monoclonaux en grande quantité Production en en batch – – – – – flacons, ou plaques de cultures cellulaires 40 à 100ml rendement de de l ’ordre du µg/ml production relativement pure contaminant par les substituts de sérum Techniques de microencapsulation – – – flacons rendement de de l ’ordre de 0,1g/ml exemple du procédé de la société DAMON corporation Production en micro particules Capture des hydridomes dans des billes d ’alginate pas de contamination purification simplifiée Production en micro particules (2) 100 mg à 1g/ml Production industrielle possible Production en ascites Injection des hybridomes dans le péritoine de souris Développement d ’une tumeur : ascite Prélèvement des anticorps par ponction de liquide d ’ascite Purification du liquide d ’ascite nécessaire Rendement élevé 20 g/l C’est la souris qui régule les conditions de culture ! Production par les bio réacteurs Basé sur la technologie des fibres creuses. Diminution des coûts, du temps. Augmentation de la production 3 à 5 g/l, de la pureté Éthiquement acceptable Pas ou peu de contaminant (6 x moins) Réacteur à fibres creuses : principe Capillaire qui forme des fibres avec un seuil de dialyse bien calibré. Circulation du milieu nutritif les cellules se développent dans le milieu extra capillaire Seuls les nutriments peuvent passer d ’un milieu à l ’autre. Réacteur à fibres creuses Nutriments Métabolites Oxygène Cellules Anticorps Tec No Mouse 200 mg à qq g/mois http://www.integra-biosciences.com/e-ftecnomouse.html Biovest Primer HF Production de petite quantité d’anticorps XCell De 60 à 200 g/mois http://www.biovest.com/ Cellex Biosciences Maximizer production de l’ordre de 5 g/mois Production in vitro Avantages – – – – – Pas d’utilisation d ’animal Production de grandes quantité d’anticorps Pas de contraintes légales à l’utilisation d’animaux Pas de personnel d’animalerie Pas de contaminant Inconvénients – – – – – – – Tous les hybridomes ne prolifèrent pas en réacteur Nécessite l’utilisation de sérum de veau fœtal Problèmes lorsque les glycosylations sont nécessaires Productions moins concentrées. Contamination par les hybridomes morts Mab de plus faible affinité Plus chère pour de petites production Production in vivo Avantages – – Concentration élevée en Mab Pas d’intermédiaire industriels Inconvénients – – – – Utilisation de l’animal Présence de protéines murines Contaminants Stress de la souris Purification des liquides contenant les anticorps. Préparation de l’échantillon Purification principale – Chromatographie d’affinité Affinité immunologiques – – – spécifique du Fc. spécifique de l’antigène. Chromatographie échangeuses d’ions Chromatographie échangeuse d’anion. – L’échange de cation Hydroxylapatite Ligand Analyte Impuretés Chromatographie d’affinité Fixation Elution Chromatographie d’affinité Elution par déplacement avec l’antigène libre Elution par déplacement avec un analogue Critères de qualité Spécificité – – – L'affinité – – Reconnaissance d ’un seul motif épitopique Réactions croisées, non-spécifiques. Maintient de l ’activité après modification chimique Élevée Constante et contrôlée Avantages de ce type de production – – – Constante reproductible Utilisation de la souris Limites de ce type de production La souris ne reconnaît pas tous les motifs antigéniques Répertoire immunologique limité Manifestations secondaires – – Difficulté pour obtenir des anticorps monoclonaux humains – – Inflammation Nécrose tissulaire … Immortalisation des cellules B humaines très difficile Volet éthique de la manipulation de cellules humaines Qualité des plasmocytes humains très variable – 109 cellules B par immunisation Les anticorps recombinants Anticorps coliclonaux Les moyens actuels Immunologie fondamentale – Génie génétique, clonage, systèmes d ’expression – – – Phage display Library Développement de techniques d’indentification performantes Industries pharmaceutiques et sociétés biotechnologies – E.coli sécrétion périplasmique Levure Pichia pastoris Cellules d’insectes Création de banques de données de gènes d’immunoglobulines – Connaissance du génome des immunoglobulines Sanofi Aventis, Genovac, FDA, AFFSAPS Production des anticorps monoclonaux. Nouvelles technologies dans la production d'anticorps monoclonaux – – Système d’anticorps à partir de phage recombinant exemple du kit Pharmacia (Voir cours sur les anticorps recombinants) Principe d’obtention d’une « Phage Display Library » Méthode Extraction de l’ARNm d’un plasmocyte ou d’une cellule B : matrice – – – Hybridomes pour des anticorps murins Cellules de la rate chez des souris immunisées Cellules du sang, Tissus lymphoïdes humains Obtention du cDNA par action de la transcriptase reverse Amplification du cDNA par Polymerase Chain Reaction (PCR) Sélection des gènes codant pour les chaines lourdes et légères. Construction d’un plasmide avec les deux gènes Intégration dans un phage pour expression Sélection du bactériophage pour introduction dans le système d’expression Mise en culture Extraction des anticorps sécrétés Obtention par électroporation Gènes des immunoglobulines Avantages Fragment de liaison minimal – – – Augmentation de la valence – valence supérieure à 2 Liaison à deux antigène différents Augmentation de l’avidité – taille variable et adaptable, minimise la clearance Facilite la pénétration dans les cellules tumorales Taux de dissémination plus rapide vitesse de réaction augmentée Flexibilité augmentée – facilitation de la liaison avec l ’antigène Nouvelles molécules Monovalents – Fragments Fv (30 kDa) Multivalents, Multispécifiques – – – – ScFv (60 kDa) diabodies (60 kDa) triabodies (90 kDa) tétrabodies Synopsis Extraction Transcriptase reverse PCR H Cellule B L ARNm cDNA clonage Sélection Infection Expression Bactériophage Sécrétion Plasmide Sélection du phage Immobilisation de l’antigène sur colonne Fixation de ou des anticorps spécifique parmi la banque Élution par le système CysDisplay™ Élution par agent réducteur – Réduction chimique Indépendance de l’affinité Spécificité de la sélection Test du phage élué par ELISA Structures des anticorps Anticorps humanisés Heavy chain CDR 1 = Light blue CDR 2 = Cerise CDR 3 = Yellow Light Chain CDR 1 = Red CDR 2 = Green CDR 3 = Blue Définition Parties variables d’origine murine (5 à 10 % de la structure) Parties constantes d’origine humaine – – Spécificité et affinité murine Immunogénicité humaine Production d’anticorps humanisés Immunisation in vitro – L'électrofusion – immunisation des cellules immunocompétentes directement in vitro augmentation des rendements de fusion Fusion dirigée – Utilisation d ’agent de couplage chimiques : avidine/biotine, ac/ag. Production d’anticorps humanisés Vecteurs rétroviraux – Milieux conditionnés – Immortalisation de la cellule par des virus Augmentation de l ’efficacité de culture des cellules Recombinaison génétique – – – Aeres Biomédical : ABC-48, anticorps humanisé dirigé contre les plaquettes activées Prévention des thromboses ABC-120, anticorps humanisé anti malaria, inhibition de l’invasion des parasites du globule rouge Prophylaxie et traitement Applications Immunologie fondamentale – – – – – Etude des lignées cellulaires Etude des marqueurs des cellules non lymphocytaire Etudes des cellules pathologiques Protéomique Drug discovery Thérapie – – – – Traitement de cancer (cancer du sein) Traitement des rejets de greffes Anticorps catalytiques : enzymothérapie Vaccin ? Applications Fusion avec de nombreux ligands – – – – – – Radioisotopes Enzymes Toxines Virus Lipides Biocapteurs Imagerie médicale (RAIT) Thérapie Destruction de cellules (Immuntoxines) Thérapie génique Libération de médicaments Détection en temps réel Diagnostic Chromatographie – – – – Phénotypage Cytométrie en flux Imagerie médicale Ligands pour la chromatographie Terminologies des mAbs: Anticorps monoclonaux: mAbs - omab: - ximab: - zumab: - (m) umab: Ac murin Ac chimérique Ac humanisé Ac humain - tu-: - ci-: cible= tumeur cible=cardio-vasculaire le S c leros is HIV Auto immu ne Tox ic sho c k Myo c RSV ar dia l Infa r ction Cr oh n' s Multip Str ok e SLE Gv H D Ca nc er Allo g ra ft r ejec t ion P sor ia Rh eu sis mato id A r th ritis Asth ma/A ller gy NH L Répartition par pathologie 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 Anticorps thérapeutiques : anti-cancer Utiliser le système immunitaire pour détruire des tumeurs – – L’anticorps doit atteindre les cellules tumorales dans tout l’organisme – – Antigènes tumoraux trop peu immunogènes Anticorps agents thérapeutiques Problème des tumeurs volumineuses Problème des antigènes circulants L’hôte ne doit pas développer d’anticorps contre l’anticorps thérapeutique – Anticorps humanisés : très faible immunogénicité Demie-vie et activité longue Meilleure mobilisation du système immunitaire de l’hôte (cytotoxicité cellulaire, médiée par le complément) Aspects industriels défavorisant Faible marché – – – – – Très grande variabilité des cancers Investissement très important pour la recherche clinique Plusieurs anticorps pour une même pathologie Besoin de grandes quantité de réactifs Propriété intellectuelle Thérapie passive Un immun sérum pour protéger l’individu de l’infection Un anticorps monoclonal – – – Plus efficace Reproductible Absence de contaminants Exemple : – Mab anti cytomégalovirus (agent pathogène responsable de pneumonie) – – Mab anti synticial virus (responsable de maladie chez les jeunes enfants) Mab anti rhésus Transplantation de moelle osseuse Transplantation – OKT3 Mab anti cellule T CAMPATH-1M (IgM de rat) – – Élimination des cellules T du donneur et du receveur Éviter les phénomènes de destruction cellulaire de l’hôte. Rituximab IDEC-C2B8 Anticorps anti CD 20 – – Spécifique des cellules B, par intermédiaire du CD 20 Activité importante dans les lymphomes B folliculaires Activation de l’ADCC et CDC* Toxicité faible Simplicité d’administration – Régions variables murines Régions constantes humaines 100 000 patients traités Très prometteur http://www.rituxan.com/rituxan/professional/pro_index.htm *Complément Dépendant Cytotoxicité Cellule B CD 20 Leucémie et lymphome CAMPATH-1G (IgG2a rat) – Destruction des lymphocytes après injection intraveineuse CAMPATH-1H (IgG1 humanisé) Anti CD3/CD19 bispécifique – Activation des cellules T et ciblage des cellules B Mode d’action Rituximab http://www.rituxan.com/rituxan/professional/e_product_info/mode_of_action.htm Autres Acm thérapeutiques Centocor http://centocor.com – – Genentech, http://gene.com – – Reopro anticorps antithrombotique, inhibition de la formation de caillots Remicad, traitement de la maladie de Crohn, maladie gastro intestinale. Herceptin, anticorps humanisé utilisé dans le traitement des métastases dans le cancer du sein. Anticorps humanisé anti IgE, utilisé dans le traitement de certaines allergies. Proteins Design Labs – Production par des cellules végétales •Herceptin, •Anticorps humanisé IgG1 •(human/mouse) •mode d’action proposé •HER2 récepteur membranaire de facteur de croissance Maladies auto-immunes Diabète Arthrite rhumatoïde Sclérose en plaque Arthrite rhumatoïde Anti CD25 – Anti CD4 – Blocage des cellules T helper Anti CD18 – Spécifique des cellules T activées Inhibition de la migration des leucocytes du sang vers les zones d’inflammation Ig récepteur au TNF – – Chimère :récepteur membranaire du TNF associé à un Fc d’IgG1 Blocage du TNF dans les phénomènes d’inflammation Nouveautés thérapeutiques des Maladies Inflammatoires Chroniques de l’Intestin (MICI) Comment prescrire un anti-TNF dans les MICI ? Quel anti-TNF choisir en 2006 dans la maladie de Crohn Quel est le rapport bénéfice/risques pour les antiTNF dans les MICI ? L’infliximab (Rémicade®) et la révolution des biothérapies… < 1999 5-ASA, corticoïdes, azathioprine, méthotrexate L’infliximab (Rémicade®) et la révolution des biothérapies… < 1999 1999 2003 2006 5-ASA, corticoïdes, azathioprine, méthotrexate Maladie de Crohn active sévère réfractaire et fistulisée réfractaire : traitement d’induction (S0, 2 et 6) puis perfusions à la demande Maladie de Crohn active sévère réfractaire et fistulisée réfractaire : traitement d’induction (S0, 2 et 6) puis traitement d’entretien (perfusions toutes les 8 semaines) Rectocolite Hémorragique (RCH) active, modérée à sévère réfractaire (AMM européenne du 28 février 2006) L’infliximab (Rémicade®) et la révolution des biothérapies… < 1999 1999 2003 2006 ? 5-ASA, corticoïdes, azathioprine, méthotrexate Maladie de Crohn active sévère réfractaire et fistulisée réfractaire : traitement d’induction (S0, 2 et 6) puis perfusions à la demande Maladie de Crohn active sévère réfractaire et fistulisée réfractaire : traitement d’induction (S0, 2 et 6) puis traitement d’entretien (perfusions toutes les 8 semaines) Rectocolite Hémorragique (RCH) active, modérée à sévère réfractaire (AMM européenne du 28 février 2006) Autres anti-TNF : adalimumab, certolizumab (Natalizumab, visilizumab…) Anti-TNF Infliximab Crohn RCH Adalimumab Certolizumab Autres biothérapies Natalizumab Visilizumab Anti-TNF Infliximab Crohn Adalimumab Certolizumab RCH 3 anti-TNF sont efficaces dans la maladie de Crohn Ac monoclonal chimérique Ac monoclonal humain Fragment Fab’ humanisé VL Ck VH CH1 Fc IgG1 PEG PEG Infliximab Adalimumab mAb mAb Rémicade® Isotype IgG1 75% humain Humira® Isotype IgG1 100% humain Certolizumab (CDP870) Fab’ Cimzia® Isotype IgG4 95% humain Caractéristiques des anti-TNF Modes d’action Infliximab Neutralisation du TNF Apoptose Autres* + + CD40/ Mode Demi d’admi -vie nistrati (jours) on Intervalle entre les injections (semaines) i.v. 89.5 8 sc 12-14 2 sc 14 4 CD40L *, ADCC, CDC ** Adalimumab + + ADCC, CDC ** Certolizumab + No (?) No * Blocage de la voie CD40/CD40L impliquée dans l’inflammation et l’immunité innée ** Antibody dependent cell mediated cytotoxicity (ADCC) and complement dependent cytotoxicity (CDC) Anti-TNF et maladie de Crohn: 11 larges essais randomisés contrôlés ! Nom de l’essai Référence But principal Targan et al. NEJM 1997 Induction (MC luminale) Rutgeerts et al. Gastroenterology 1999 Maintien (MC luminale) Hanauer et al. Lancet 2002 Maintien (MC luminale) Present et al. NEJM 1999 Induction (MC fistulisante) ACCENT II Sands et al. NEJM 2004 Maintien (MC fistulisante) CLASSIC I Hanauer et al. Gastroenterology 2006 Induction CLASSIC II Sandborn et al. UEGW 2005 Maintien CHARM Colombel et al. DDW 2006 Maintien Schreiber et al. Gastroenterology 2005 Induction Precise 1 Sandborn et al. DDW 2006 Induction et maintien Precise 2 Sandborn et al. UEGW 2005 Maintien Infliximab ACCENT I Adalimumab Certolizumab Nouveautés dans la maladie de Crohn: Adalimumab et certolizumab Nom de l’essai Référence But principal Targan et al. NEJM 1997 Induction (MC luminale) Rutgeerts et al. Gastroenterology 1999 Maintien (MC luminale) Hanauer et al. Lancet 2002 Maintien (MC luminale) Present et al. NEJM 1999 Induction (MC fistulisante) ACCENT II Sands et al. NEJM 2004 Maintien (MC fistulisante) CLASSIC I Hanauer et al. Gastroenterology 2006 Induction CLASSIC II Sandborn et al. UEGW 2005 Maintien CHARM Colombel et al. DDW 2006 Maintien Schreiber et al. Gastroenterology 2005 Induction Precise 1 Sandborn et al. DDW 2006 Induction et maintien Precise 2 Sandborn et al. UEGW 2005 Maintien Infliximab ACCENT I Adalimumab Certolizumab Quels objectifs thérapeutiques dans les MICI ? - Mise en rémission de la maladie (induction) - Maintien de la rémission - Sevrage en corticoïdes - Cicatrisation muqueuse endoscopique - Amélioration de la qualité de vie - Réduction du recours à la chirurgie et du taux d’hospitalisations - Rapport bénéfices > risques Peut-on comparer ces 3 anti-TNF dans la maladie de Crohn ? Induction (mise en rémission) Essai randomisé contre placebo Objectif :4 ou 12 semaines Randomisation 1:1:1:1 (3 doses pour l’anti-TNF) Réponse ( 70 ou 100 points du CDAI) Rémission (CDAI < 150) Targan, CLASSIC I, Schreiber Maintien de la rémission Essai ouvert puis randomisation des répondeurs contre placebo Objectif:6 ou 12 mois Réponse ( 70 ou 100 points du CDAI) Rémission (CDAI < 150) ACCENT I, CHARM, PRECISE 2 Mise en rémission à 1 mois avec les anti-TNF Placebo Patients en Rémission (%) 100 90 5 mg/kg p<0.001 100 mg p=0.014 80 200 mg p=0.0031 70 400 mg p=0.019 160/80 mg p=0.05 60 48 50 36 40 25 30 20 10 4 25 5 10 mg/ 20 mg/ mg/ kg kg kg 23 8 100 mg 21 200 mg 24 22 400 mg 18 12 40/ 20 mg 80/ 40 mg 160/ 80 mg 0 N=25 N=27 N=28 N=28 Infliximab Targan et al. N Engl J Med 1997 N=73 N=74 N=72 N=72 Certolizumab Schreiber et al. Gastroenterology 2005 N=74 N=72 N=70 N=74 Adalimumab Hanauer et al. Gastroenterology 2006 (CLASSIC I) Mise en rémission à 1 mois avec les anti-TNF Placebo Patients en Rémission (%) 100 90 5 mg/kg p<0.001 100 mg p=0.014 80 200 mg p=0.0031 70 400 mg p=0.019 160/80 mg p=0.05 60 48 50 18-35% 40 25 30 20 10 4 25 5 10 mg/ 20 mg/ mg/ kg kg kg 23 8 100 mg 36 21 200 mg 24 22 400 mg 18 12 40/ 20 mg 80/ 40 mg 160/ 80 mg 0 N=25 N=27 N=28 N=28 Infliximab Targan et al. N Engl J Med 1997 N=73 N=74 N=72 N=72 Certolizumab Schreiber et al. Gastroenterology 2005 N=74 N=72 N=70 N=74 Adalimumab Hanauer et al. Gastroenterology 2006 (CLASSIC I) ACT 1 Cicatrisation endoscopique à S8, S30 et S54 100 Placebo Infliximab 5 mg/kg (n=121) % Patients 80 Infliximab 10 mg/kg (n=122) 62* 59* 60 50* 49* 46* 47* 40 20 0 S8 * P < 0.001 vs placebo S 30 S 54 ACT 1 Amélioration de la qualité de vie : Modification médiane vs valeur à l’inclusion Evolution du score IBDQ jusqu’à la semaine 54 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 *P < 0.001 Placebo Combined Infliximab 36* 27* 23* 16 S8 0 0 S 30 S 54 ACT 1 & 2 Réduction du nombre d’hospitalisations Rapport bénéfices/risques des anti-TNF dans les MICI En dehors du risque infectieux (3-4 % d’infections sévères) et du risque de tuberculose qui est à présent bien « maîtrisé », le risque de lymphomes doit faire l’objet d’une attention particulière: 6 cas de lymphome T hépato-splénique chez des jeunes patients avec une maladie de Crohn (âge:12-31 ans); tous recevaient également un traitement par azathioprine ou 6mercaptopurine Pronostic effroyable: 5/6 décès 120 cas reportés dans la littérature mais aucun cas chez les sujets avec PR, SPA, psoriasis, RCH Centocor on file.
