Recherche d`indicateurs moléculaires sanguins de la variation de l

Recherched’indicateursmoléculairessanguins
delavariationdel’adipositécorporelleparuneapproche
transcriptomiquechezleporcencroissance
MaëvaJEGOU,AnnieVINCENT,FlorenceGONDRET,IsabelleLOUVEAU
INRA,UMR1348Pegase,F‐35590Saint‐Gilles,France
AgrocampusOuest,UMR1348Pegase,F‐35000Rennes,France
[email protected]
AveclacollaborationtechniquedeChristineTréfeu
Recherched’indicateursmoléculairessanguinsdelavariationd’adipositécorporelleparuneapprochetranscriptomiquechezle
porcencroissance
L’adipositécorporelleestunparamètreimportantpourl’efficiencedelaproductionporcine.Destravauxenlienavecl’obésité
suggèrentqu’ilexistedanslesangdesmarqueursmoléculairesdumétabolismelipidiquetissulairepourdiversesespèces.Notre
étudeviseàrechercherdesindicateursmoléculairessanguinsdelavariationdemasseadipeusechezleporcencroissance.Des
porcsmâlescastrésLargeWhiteissusdedeuxlignéesdivergentespourlaconsommationjournalièrerésiduelle(CMJR)ontété
nourrisavecdesrégimesiso‐énergétiquesetiso‐protéiques,richesencéréales(LF)oucomprenantuneproportionélevéedefibres
peudigestiblesetd’huilesvégétales(HF)pendant10semainesenengraissement(n=12parrégimeetparlignée).Al’abattageà
132joursd’âge,lesproportionsdebardière,depanneetdepoitrine,relativementaupoidsvif,étaientplusfaibles(P<0,001)chez
lesporcsayantreçulerégimeHFquechezlesporcsayantreçulerégimeLF.Letranscriptomedescellulessanguines,étudiéavec
unepuceàADNporcine(Agilent),diffère(P<0,01)fortemententrelignées(2154oligonucléotidesdifféremmentexprimés),avec
notammentunesurexpressiondesgènesimpliquésdanslaréponseimmunitaire,lecatabolismeprotéiqueetlasignalisation
cellulairepourlesporcsàfaibleCMJR.Lenombred’oligonucléotidesdanslesangaffectésparlerégimealimentaireestfaible(92;
P<0,01).Associéauxrésultatsdelalittérature,noussuggéronscependantquelegèneCPT1A,sur‐expriméchezlesporcsHF
comparativementauxporcsLF,pourraitconstituerunbonindicateurdesvariationsd’adiposité.
Useofwholebloodtranscriptomicstoidentifymolecularindicatorsofthevariationofbodyadiposityingrowingpigs
Adiposetissuemassisanimportanttraittobeconsideredforpigproductionefficiency.Researchworkrelatedtoobesityin
differentspeciessuggeststhatbloodbiomarkersoflipidmetabolismcanbefound.Theaimofthecurrentstudywastoidentify
wholebloodmolecularindicatorsassociatedwithvariationsinadiposetissuemassingrowingpigs.LargeWhitecastratedmale
pigsfromtwolinesdivergentlyselectedforresidualfeedintake(RFI)werefeddietswiththesamemetabolizableenergyleveland
thesameproteincontent,buteitherrichincereals(LF)orincrudefiberandlipids(HF)during10weeksinthegrowingperiod
(n=12bydietandbyline).Atthesameslaughterage(132d),relativeproportionsofbackfat,perirenalfatandbelly,relativeto
bodyweight,werelower(P<0.001)inpigsfedtheHFdietthaninpigsfedtheLFdiet.Analysesofthewholebloodtranscriptome
usingaporcinemicroarray(Agilent)revealedlargedifferencesbetweenlines(2154oligonucleotidesdifferentiallyexpressed;P<
0.01).Up‐regulationsofgenesinvolvedinimmuneresponse,proteincatabolismorcellularsignalingwereobservedinpigs
selectedforalowRFI.Thenumberofoligonucleotidesaffectedbythedietwaslow(92;P<0.01).Ourdataassociatedwithother
reportsinliteraturesuggestthatCPT1A,whichwasup‐regulatedinpigsfedtheHFcomparedwithpigsfedtheLFdiet,couldbea
goodindicatorofadiposity.
2015. Journées Recherche Porcine, 47, 13-18.
13

INTRODUCTION
Pouroptimiserlaproductiondeviande,ilestnécessairede
disposerd’animauxrobustes,efficaces,etcapablesde
s’adapteràdenombreusescontraintesd’élevage(Sauvantet
Martin,2010).Cecinécessitenotammentd’évaluerlacapacité
del’animalàconstituersesréservesénergétiquessousforme
delipidesd’unepart,etàmobilisercesréservesd’autrepart
pourfairefaceauxcontraintes.Pourmieuxcomprendreet
caractérisercetteflexibilitémétaboliqueénergétique,ilest
nécessairededisposerd’outilspeuinvasifs,etsurtoutquine
nécessitentpasl’abattagedel’animal.D’aprèsdesrésultats
récentsdelalittérature,lecompartimentsanguinmériterait
d’êtrepluslargementexploré.Destravauxenlienavec
l'obésitésuggèrenteneffetqu'ilexistedesmarqueurs
moléculairesdumétabolismelipidiquechezl'homme(Ghosh
etal.,2011)etleporc(Takahashietal.,2012)danslesang.Ila
aussiétémontréqueletranscriptomesanguin(ensembledes
ARNmessagers(ARNm)issudelatranscriptiondugénome)est
sensibleauxvariationsderégimesalimentaires(DeMelloet
al.,2012;Koniecznaetal.,2014).
L'objectifdecetteétudeestdedéterminersilavariation
d’adipositécorporellechezleporcencroissanceestassociéeà
desmodificationsdutranscriptomesanguin.Pourcela,nous
avonsutiliséundispositifexpérimentalquiimpliquedesporcs
encroissancesélectionnéspourleurconsommationmoyenne
journalièrerésiduelle(CMJR),etnourrisavecdesrégimesiso‐
énergétiquesetiso‐protéiquescontrastésquantàlasource
d’énergiealimentaire(Gondretetal.,2014).Descalculsde
corrélationentrel’expressiondecertainsdesgènesidentifiés
etlaproportiondepiècesgrassesdanslacarcasseontété
ensuiteréalisésafind’identifierdesindicateurspertinents
pourlavariationd’adipositécorporelle.
1. MATERIELETMETHODES
1.1. Dispositifexpérimental
Quarante‐huitmâlescastrésLargeWhiteissusdedeuxlignées
divergentespourlaCMJR(génération8desélection),ontété
élevésaprèslesevrageàl’INRAdeSaint‐Gilles(UMR1348
Pegase).Audébutdelapérioded’engraissement(74+3
jours),lesporcsayantunefaible(CMJR‐)ouuneforte(CMJR+)
CMJRsontrépartisentrelesrégimesexpérimentauxLFouHF
(n=12parlignéeetparrégime).LerégimeLFaétéformulé
principalementàbasedeblé(36%),d’orge(36%)etde
tourteaudesoja(20%).LerégimeHFsecaractérisepardes
quantitésimportantesdepaillebroyée(11,5%)etd’huiles
(colzaetsoja,7,5%)incorporéesensubstitutionpartielledes
céréales.LesrégimesLFetHFsontiso‐énergétiques(12,9
MJ/kgd’énergiemétabolisable)etiso‐protéiques(couvrantles
besoinsdesporcsenacidesaminés).Ilssontdistribuésà
volontésurlabased’uneformulecroissancependantles
7premièressemaines,puisd’uneformulefinitionjusqu’à
l’abattagedesporcsàl’âgede132,5+0,5jours.
Lacompositiondétailléedesrégimesetl’ensembledes
phénotypesanimauxontétéprécédemmentprésentéspar
Gondretetal.(2014).
1.2. Abattageetprélèvements
Lesporcsontétéabattusàl’abattoirexpérimentaldel’UMR
Pegase,deuxheuresaprèslepremierrepasmatinal,afinde
refléterunétatphysiologiquepost‐prandialdesanimaux.
Leséchantillonsdesangontétéprélevéslorsdelasaignée.
UnéchantillonaétécollectésurEDTApourlesnumérations
sanguines.UnautreéchantillonaétéplacésurEDTAen
présenced’unvolumedetampondelyse,puisaétéstockéà
‐70°Cjusqu’àlaréalisationdel'analysedesdonnées
transcriptomiques.Lapanneaétécollectéepuispeséelejour
del’abattage.Labardièreetlapoitrineontétéisoléesdela
carcasseaprès24hderessuyagepuispesées.
1.3. Numérationssanguines
Lenombretotaldelymphocytes,monocytesetgranulocytesa
étédéterminéàl’aided’uncompteurautomatiquedecellules
sanguinescalibrépourleporc(MS‐9‐3®,MeletSchloesing
laboratories).
1.4. Mesuredesexpressionsdegènes
1.4.1. ExtractiondesARN
LesARNtotauxontétéextraitsàpartirdesangtotal(kit
Nucleospin®8RNABlood,Macherey‐Nagel).LesARNontété
quantifiésparspectrophotométrie(NanoDrop®)etleurqualité
aensuiteétévérifiéeàl’aideduBioanalyseurAgilent2100
(AgilentTechnology;kitRNA6000NanoAssay).
1.4.2. Analysedutranscriptome
L’expressiondesgènesaétémesuréeàpartird’unepuce
d’oligonucléotides(puceAgilent‐037880/INRA_Sus
scrofa_60K_v1,GPL16524).Leséchantillonsontétémarqués
parlefluorochromeCy3(One‐ColorMicroarray‐BasedGene
ExpressionAnalysis,Agilent).Aprèshybridation,lespucesont
éténumériséesàl’aideduscannerdelamesAgilentG2505B.
Lesdonnéesbrutesd’expressionontétéobtenuespar
traitementdecesimages,àl’aidedulogicielFeature
ExtractionSoftwarev9.5(Agilent)etontétéfiltréesen
prenantencomptelesvaleursd’intensitédubruitdefondsur
lapuce,lediamètre,lasaturation,etl’uniformitéduspot.Ces
donnéesontensuiteététransforméesparunefonction
logarithmedebase2,puiscentréesparéchantillonparla
médianedesniveauxd’expressiondeséchantillons.Les
analysesstatistiquesontétéréaliséesaveclelogicielRversion
3.0.2(RDevelopmentCoreTeam,2013).Lesdonnéesontété
analyséesparANOVAenconsidérantleseffetsdelalignée(L),
durégime(R)etdel’interaction(LxR).Pourétablirlalistede
gènesdifféremmentexprimésenfonctiondelalignée(CMJR‐
vsCMJR+)etdurégime(HFvsLF),unseuildeprobabilité
P<0,01aétéretenu(Fuetal.,2010).
L’analysefonctionnelledesgènesdifféremmentexprimésa
étéréaliséeàl’aidedel’outilDAVID(theDatabasefor
Annotation,VisualizationandIntegratedDiscovery
bioinformaticsresources).Cetoutilestdisponibleenligne
(http://david.abcc.ncifcrf.gov)etpermetderegrouperles
gènesparleurfonctionmoléculaireetleprocessusbiologique
danslequelilsinterviennent,processusréférencédansles
basesd’ontologiegénique(Huangetal.,2009aetb).Seulsles
groupesd'ontologiesdegènessignificativementenrichispar
rapportaugénomederéférencehumain(P<0,05,score
d'enrichissement>1,3)ontétéretenus.
1.4.3.AnalysedegènesciblesparqPCR
Troisgènescodantrespectivementpourlacarnitinepalmitoyl
transférase1A(CPT1A),lalipocaline2(LCN2),etla
prosaposine(PSAP),identifiéscommedifférentielsentreles
deuxrégimesparl’approchetranscriptomique,ontété
2015. Journées Recherche Porcine, 47.
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quantifiésparqPCR,réactiondepolymérisationenchaineen
tempsréel.AprèsuntraitementDNase(kitDNA‐free,
Ambion®),l’ADNcomplémentaireaétésynthétiséàl’aidedu
kitHighcapacitycDNAreversetranscription(Applied
Biosystems).Lesamorcesontétéélaboréesàpartirde
séquencesporcinesaveclelogicielPrimerExpress3.0(Applied
Biosystems).L’expressiondechaquegèneestnormaliséepar
unfacteurcalculécommelamoyennedesexpressionsdedeux
gènesderéférence:TATAboxBindingprotein1(TBP1)et
TopoisoméraseIIβ(TOP2B).Lesanalysesstatistiquesontété
effectuéesparANOVAenconsidérantleseffetsdelalignée
(L),durégime(R)etdel’interaction(LxR)parlelogicielR.
1.5. Analysesdecorrélations
Pourdéterminerlescorrélationsentrel’expressiondegènes
ciblesetlamassedesdifférentespiècesgrassesrelativement
aupoidsvifdesanimaux,unerégressionlinéairesimpleaété
réaliséeàl’aidedulogicielR.Lacorrélationentreces
paramètresestconsidéréesignificativeavecP<0,05,etun
coefficientdecorrélation,r,supérieurà|0,3|.
2. RESULTATSETDISCUSSION
2.1. Rappelsdeseffetsdurégimeetdelalignéesurles
paramètresphénotypiques
Al’abattage,lesproportionsrelativesdebardière,de
poitrineetdepanne,relativementaupoidsvif,sontplus
faibles(P<0,001)chezlesporcsayantreçulerégimeHF
quechezlesporcsayantlerégimeLF(Tableau1).
Laréductiondel’adipositéparlerégimeHFestenaccord
avecdestravauxbaséssurdesrégimesfibreuxchezleporc
(Yanetal.,2013).Lesproportionsdecesdifférentespièces
nediffèrentpassignificativemententrelignées.
Tableau1–Effetsdelalignéeetdurégimealimentaire
surlespoidsdespiècesgrassesàl’abattage
CMJR+CMJR‐
ETRS1
LFHFLFHF
Poidsviffinal
(PV),kg77,669,082,772,95,5L** R***
Bardière,
%PV5,94,15,73,90,8R***
Poitrine,%PV 9,28,48,88,40,5R***
Panne,%PV0,80,50,80,60,1R***
1ANOVApourleseffetsdelalignée(L)etdurégime(R),etdeleur
interaction(aucuneinteractionsignificative).**P<0,01;***P<0,001.
2.2. Numérationssanguines
Leslymphocytes,monocytesetgranulocytessontdescellules
sanguinesnuclééeschezleporc,etappartiennentausystème
immunitaireinné.Lenombredecescellulesestsimilaire
(P>0,1)danslesquatregroupesexpérimentaux(Tableau2).
Parconséquent,unevariationduniveaud’expressiondegènes
neserapasdueàunevariationdunombredecellules
nuclééesdusang.
Tableau2–Effetdelalignéeetdurégimealimentaire
surlenombredecellulessanguinesnucléées
CMJR+CMJR‐
ETR
LFHFLFHF
Lymphocytes
(x1000/mm3)12,313,112,113,72,1
Monocytes
(x1000/mm3)0,60,60,60,60,1
Granulocytes
neutrophiles
(x1000/mm3)
10,612,011,110,52,4
L’effetdelalignée,durégimeetdel’interactionlignéexrégimeaététesté
pourcestroispopulationsdecellules.Aucuneffet(P>0,1)n’aétéobservé.
2.3. Analysedesgènesdifféremmentexprimésenfonction
durégimeetdelalignée
L’analysedestranscriptomessanguinsrévèledesdifférences
dansl’expressiondesgènesentrelesdeuxlignéesetentreles
deuxrégimes.L’influencedelalignéesurlenombre
d’oligonucléotidesdifféremmentexprimés(DE)auseuilde
probabilitéretenu(P<0,01)estplusélevéequecelledu
régimealimentaire(Tableau3).Ilexisteuneinteraction
(P<0,01)entrelalignéeetlerégimepour106
oligonucléotidescorrespondantà57gènesuniques.
Parmiles2154oligonucléotidesDEselonlalignée,1216ontun
ratiod’expressionsupérieurà1,2ouinférieurà0,8(=1/1,2)
entrelesdeuxlignées.Cecicorrespondà260gènesuniques
surexprimés(supérieursà1,2)et310gènesuniquessous‐
exprimés(inférieursà0,8),respectivement,chezlesporcs
CMJR‐comparésauxporcsCMJR+.L’analysefonctionnellede
cesgènesapermisd’identifierlesvoiesmétaboliquesdans
lesquelleslesgènesDEsontimpliqués.LesgènesDEsous‐
expriméschezlesCMJR‐sontessentiellementassociésàla
réponseimmunitaire(30%desgènesuniquesconstituentce
groupe)etautransportnucléotidique(23%desgènesuniques
constituentcegroupe).Demême,lesgènesDEsurexprimés
chezlesCMJR‐sontessentiellementimpliquésdanslaréponse
immunitaire(45%desgènesuniquesconstituentcegroupe),
ainsiquedanslecatabolismeprotéique(37%desgènes
uniquesconstituentcegroupe)etlasignalisationcellulaire
(18%desgènesuniques).Cesobservationssuggèrentdes
différencesentrelignéessurleplanimmunitaire.Elles
confortentlesrésultatsd’uneétuderécenteindiquantquele
transcriptomesanguinreflètelestatutimmunitairechezle
porc(Machetal.,2013).
Tableau3–Bilandunombredegènesdifféremmentexprimés
selonlalignéeetlerégimealimentaire
SondesGènesuniques
TotalR>1,2et<0,8R>1,2R<0,8
Lignée121541216260310
Régime29243163
LxR10657‐‐
Calculduratiod’expression(R)dessondesetdesgènesdifféremment
exprimés(P<0,01)1entreCMJR‐vsCMJR+pourl’effetdelalignée,2entre
HFvsLFpourl’effetdurégime.
2015. Journées Recherche Porcine, 47.
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Parmiles92oligonucléotidesDEselonlerégime,43ontun
ratiod’expressionsupérieurà1,2(surexprimésdanslerégime
HF)ouinférieurà0,8(sous‐exprimésdanslerégimeHF)entre
régimes(Tableau3).Cesoligonucléotidescorrespondentà19
gènesuniquesavec16gènessurexpriméset3gènessous‐
expriméschezlesporcsnourrisaveclerégimeHFcomparés
auxporcsnourrisaveclerégimeLF.Quatregènessont
associésàlaréponseimmunitaireettroisgènessontassociés
aumétabolismelipidique.
2.4. Relationentrel’expressiondegènesinfluencésparle
régimealimentaireetlamassegrasse
Parmiles19gènesinfluencésparlerégime,nousavonschoisi
d’étudierplusendétaillestroisgènesliésaumétabolisme
lipidiquecarilssontsusceptiblesd’êtreassociésàlavariation
delamassegrasse.Ils’agitdelaformehépatiquedela
carnitinepalmitoyltransférase1A(CPT1A),impliquéedansla
β‐oxydationdesacidesgrasetsensibleauxvariationsde
régimealimentaire(LyversPefferetal.,2004);laprosaposine
(PSAP),impliquéedansl’hydrolysedessphingolipides(O’Brien
etKishimoto,1991);etlalipocaline2(LCN2)également
connuesouslenomdeneutrophilgelatinaseassociated
lipocalin(NGAL)impliquéedansdenombreuxmétabolismes
dontl’homéostasielipidique(Jinetal.,2011).
Tableau4–Effetdurégimealimentairesurl’expression
desgènesCPT1,LCN2etPSAPmesuréesurlapuce
d’oligonucléotidesetparqPCR
GènesMéthodePvalRatioHFvsLF
CPT1APuce<0,011,3
qPCR<0,0011,3
LCN2Puce<0,011,6
qPCR<0,052,3
PSAPPuce<0,010,8
qPCR>0,10,9
L’étudetranscriptomiquemetenévidenceunesurexpression
desgènesCPT1AetLCN2etunesous‐expressiondugènePSAP
(P<0,01,Tableau4)chezlesporcsayantreçulerégimeHF
comparésauxporcsayantlerégimeLF.Leprofild’expression
decestroisgènesévaluéparqPCR,estglobalementsimilaireà
celuimesuréparl’approchetranscriptomique(Tableau4),à
l’exceptiondugènePSAPdontladifférenced’expressionentre
régimesn’estpassignificativelorsqu’elleestmesuréepar
qPCR.CesdonnéessuggèrentquelesgènesCPT1AetLCN2
constituentdescandidatsintéressantspourpermettre
d’évaluerdemanièreindirectel’adiposité.Pourcompléterces
observations,nousavonseffectuéuneétudedecorrélation
(Tableau5).Ellemontrequel’expressiondesgènesCPT1Aet
LCN2,mesuréeparl’approchetranscriptomiqueouparqPCR,
estnégativementcorrélée(P<0,05)aveclesmassesrelatives
delapanne,delabardièreetdelapoitrine.
Lamiseenévidenced’unesurexpressiondelaCPT1Adansle
sangdesanimauxlesmoinsgrasestenaccordavecuneétude
récentechezlejeuneratsoumisàunerestrictioncalorique
(Koniecznaetal.,2014).Al’inverse,uneétudeconduitechez
leratplusâgémontrequel’obésitén’estpasassociéeàune
modificationdel’expressiondecegènedanslescellulesdu
sang(Oliveretal.,2013).
L’originedecesdifférencesderésultatsn’estpasconnue.Une
hypothèseestquel’expressiondecegèneseraitplussensible
àuneréductiondelamassegrassequ’àuneforte
augmentationdecelle‐ci.Ellecorrespondaussiàl’idéeselon
laquellel’oxydationmitochondrialedesacidesgrasdansles
tissus(àlaquelleparticipel’enzymecodéeparCPT1A)est
positivementassociéeauphénotypemaigre(Flachsetal.,
2013).Ilresteàdéterminersiladifférenced’expressionde
CPT1Adanslesangestassociéeàunedifférenced’expression
decegènedansletissuadipeuxoudanslefoiedesporcs
nourrisaveclesrégimesHFouLF.Eneffet,destravauxrécents
indiquentqueletranscriptomesanguinpourraitrefléter
l’expressiondesgènesdanslefoiechezlesrongeursetchez
l’homme(Caimarietal.2010,deMelloetal.,2012).
Pourcequiconcernel’expressiondugèneLCN2dansles
cellulessanguines,lesdonnéesdelalittératuresontplusrares
quepourlegèneCPT1A.Chezlasouris,uneétudemontreque
l’augmentationdelamassegrasseinduiteparunrégime
hypercaloriqueestassociéeàuneaugmentationdela
lipocaline2sérique(Guoetal.,2013).Cetterelationest
inverseàcellequenousobservonsauniveaudel’expression
dugènedanslesangdesporcsencroissance.Toutefois,la
concentrationdelalipocaline2sériqueestcertainement
influencéeparlasécrétiondelipocaline2pardifférentstissus
(Cowlandetal.,1997),dontletissuadipeux(Guoetal.,2013).
Lalipocalineseraitnotammentimpliquéedanslaréponse
immunitaireinnée,pourlaquelleletissuadipeuxjoueunrôle
importantvialasécrétiondecytokinespro‐inflammatoirestel
quel’IFNγetleTNFα(Zhaoetal.,2014).
Tableau5–Corrélationsentrel’expressiondegènescibles
etl’adipositécorporelle
GènesMéthodeBardièrePoitrinePanne
CPT1APuce‐0,50‐0,44‐0,36
qPCR‐0,52 ‐0,43‐0,46
LCN2Puce‐0,55‐0,48‐0,45
qPCR‐0,52‐0,43‐0,43
Lescorrélationssontsignificativespourl’ensembledesdonnées(P<0,05).
CONCLUSION
Notreétudemontrequeletranscriptomesanguinestaffecté
parletypegénétiqueetlerégimealimentairedesporcs.Elle
suggèredefortesdifférencesentrelignéesquantàlaréponse
immunitairequ’ilconviendraitdeconfirmerenprésencede
challengesimmunitaires. 
Nosrésultatsmontrentaussiquelaréductiondelamasse
adipeuseassociéeàladistributiond’unrégimefibreuxmais
richeenlipidesestassociéeàuneaugmentationde
l’expressiondesgènesCPT1AetLCN2danslescellulesdusang
desporcs.L’expressiondecesgènesestnégativement
corréléeaveclamasserelativedesdifférentespiècesgrasses.
Parconséquent,lesgènescodantpourlaCPT1Aetpourla
lipocaline2pourraientconstituerdesindicateursdel’adiposité
chezleporcencroissance.
Toutefois,ilconviendradevérifierlelienentrel’expressionde
cesgènesauniveausanguin,lefonctionnementtissulaireet
l’adipositécorporelledansd’autresdispositifsexpérimentaux.
2015. Journées Recherche Porcine, 47.
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REMERCIEMENTS
LesauteursremercientH.Gilbert(GenPhySE)etY.Billonet
A.Priet(INRA,UE1372GenESI,LeMagneraud,F‐17700
Surgères)pourlaproductiondeslignéesCMJR,P.Rogeret
J.Delamarre(INRA,UMRPegase)pourlessoinsauxanimaux,
G.Guillemois(INRA,UMRPegase)pourlapréparationdes
régimes,etJ.LigeretJ.F.Rouault(INRA,UMRPegase)pourles
mesuresàl’abattage.Cetteétudeaétéfinancéeparl’Agence
NationaledelaRecherche(ANR‐11‐SVSE7004FatInteger).La
régionBretagneetl’INRA(DépartementPhysiologieAnimale
etSystèmesd’Elevage)cofinancentlathèsedeM.Jégou.
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17