le spectrophotometre - Direction des laboratoires

CHAPITRE 6
:LE SPECTROPHOTOMETRE
CHAPITRE
6
:
LE
SPECTROPHOTOMETRE
Objectifspédagogiques :
Citer les principaux éléments d
’
un
‐
Citer
les
principaux
éléments
dun
spectrophotomètre
‐Décrirelesprocéduresd’entretien
d’uns
p
ectro
p
hotomètre
pp
‐Savoirchangerl’ampouled’un
thtèt
spec
t
rop
h
o
t
om
èt
re

I
‐
Généralités sur le spectrophotomètre
I
Généralités
sur
le
spectrophotomètre
1
‐
Définition
et utilité:
1
‐
Définition
et
utilité:
Lemotspectrophotomètreestdérivé dulatinspectrum,
qui signifie image et du grec
phos
ou photos
qui
qui
signifie
image
,
et
du
grec
phos
ou
photos
,
qui
signifielumière.
Le spectrophotomètre est un des principaux appareils
Le
spectrophotomètre
est
un
des
principaux
appareils
utilisésdanslesdomainesdudiagnosticbiologiqueetde
larecherche.
Ilutiliselespropriétésdelalumièreetsoninteraction
aveclessubstances.Lespectrophotomètreestutiliséau
laboratoirepourledosagedesparamètresbiochimiques
telsque :glucose,créatinine,transaminases,…

2‐Principauxélémentsd’unspectrophotomètre :
Le schéma de la figure 1décrit la relation entre les différents
Le
schéma
de
la
figure
1
décrit
la
relation
entre
les
différents
élémentsd’unspectrophotomètre.Lesélémentslesplusimportants
sont:
‐Lasourcelumineuse(lampeàvapeurdemercure,lampeàarcau
xénon,lampeàfilamentdetungstène) ;
‐Lemonochromateur (fentes,réseau) :c’estunensemble
d’élémentsquisertàdécomposerlalumièreblancheenradiations
dedifférenteslongueursd’onde,dontl’uneestutiliséepourlirele
résultatdel’analyse
L
(à fllèl li )
‐
L
acuve
(à
f
acespara
llèl
esenverre,quartzoup
l
ast
i
que
)
ouporte‐
échantillons
Le
système détecteur
:détection de la lumière transmise
I
(cellules
‐
Le
système
détecteur
:
détection
de
la
lumière
transmise
I
(cellules
photoélectriques,tubesphotoélectriques,photodiodes.)
‐
Le
système de lecture
:Micro
‐
ampèremètre ou affichage digital de
‐
Le
système
de
lecture
:
Micro
‐
ampèremètre
ou
affichage
digital
de
l’absorbanceoudelaconcentration.

Schémadeprincipeduspectrophotomètre

3- Principaux types de spectrophotomètre
3
1
Spectrophotomètre à lecture tube par tube
3
-
1
-
Spectrophotomètre
à
lecture
tube
par
tube
Légende
A : Cuve de mesure
B : couvercle
C : Incubateur
D : Imprimante
E : Rouleau de papier
d
’
imprimante
d imprimante
F : Afficheur
alphanumérique
G: Clavier