Utilisation de la protéine Tat-Foxp3 pour induire la formation des

Utilisation de la protéine Tat-Foxp3 pour induire la
formation des lymphocytes T régulateurs,
dans le contexte de la thérapie cellulaire de la
dystrophie musculaire de Duchenne
Mémoire
Laetitia Mavinga
Maîtrise en Biologie cellulaire et moléculaire
Maître ès sciences (M.Sc.)
Québec, Canada
© Laetitia Mavinga, 2013

iii
Résumé
La dystrophie musculaire de Duchenne est une myopathie héréditaire récessive liée au chromosome X.
La 
des approches thérapeutiques possibles, mais son succès dépend du contrôle du rejet des myoblastes
greffés et des fibres musculaires hybrides. À 
presseurs puissants. Notre objectif à long terme est de développer un protocole de tolérance
immunologique qui permettrait de prévenir le rejet, sans recours à une immunosuppression soutenue. La
première étape du protocole de tolérance immunologique que nous souhaitons développer 
formation de lymphocytes T régulateurs en utilisant le facteur de transcription Foxp3. Nos travaux nous
ont permis de produire, dans des bactéries E. coli, la protéine de fusion Tat-Foxp3. Par des essais in vitro
  les lymphocytes T CD4+ naïfs
après transduction de la protéine Tat-Foxp3. Cela suggère que la protéine Tat-Foxp3 pourrait convertir les
lymphocytes T CD4+ naïfs en lymphocytes T régulateurs.     
confirmer que ces cellules exprimant le CD25 sont vraiment des T régulateurs.

v
Abstract
The Duchenne muscular dystrophy is the most common hereditary muscular disease. This disease is
inherited as an X-linked recessive trait. It is caused by the absence of dystrophin in muscle fibers. Cell
therapy is the potential treatment but, its success depends on the control of the rejection of the
transplanted myoblasts and of the hybrid fibers that they formed. At present, the control of the graft
rejection is achieved by administration of powerful immunosuppressive drug. Our long-term aim is to
develop a protocol for immune tolerance that would prevent the graft rejection without sustained
immunosuppression. The first step of this tolerance protocol that we want to develop is to induce the
formation of regulatory T cells using the transcription factor Foxp3. In this study we generated, in bacteria
E. coli, a fusion protein Tat-Foxp3. By in vitro assays, we demonstrated that Tat-Foxp3 protein up-
regulated the expression of CD25 in naïve CD4+ T cells. Additional experiments will be required to confirm
that these CD25 expressing cells are Treg.