EVALUATION DE NOUVEAUX OUTILS DIAGNOSTIQUES

ECOLE NATIONALE VETERINAIRE D’ALFORT
Année 2002
EVALUATION DE NOUVEAUX OUTILS DIAGNOSTIQUES
DE L’INSUFFISANCE CARDIAQUE CHEZ LE CHIEN :
ETUDE D’Et-1, DU N-ter proANP ET DU BNP.
THESE
pour le
DOCTORAT VETERINAIRE
présentée et soutenue publiquement
devant
LA FACULTE DE MEDECINE DE CRETEIL
le
par
David Antoine Baptiste BEMBARON
Né le 19 octobre 1974 à Alfortville (94)
JURY
Président :
Professeur à la faculté de Médecine de CRETEIL
Membres : MM. POUCHELON et BRUGERE
Professeurs à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort
Invités : Me CHETBOUL et M. ROSENBERG
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort
Maître de conférences contractuel à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort
REMERCIEMENTS
A Monsieur le Professeur,
Professeur à la Faculté de médecine de Créteil,
Président du jury de cette thèse, hommage respectueux.
A Monsieur le Professeur Jean Louis Pouchelon,
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort,
qui m’a accordé sa confiance et son soutien. Sincères salutations.
A Monsieur le Professeur Henri Brugère,
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort,
pour l’attention qu’il a bien voulu porter à l’examen de ce travail expérimental.
A Madame le Professeur Valérie Chetboul,
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort,
pour ses conseils et la confiance qu’elle m’a témoignés.
Au Docteur Dan Rosenberg,
Maître de conférences contractuel à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort,
qui, bien au delà de son rôle d’encadrement pour ce travail, a su me témoigner toute sa
confiance, son enthousiasme et ses conseils précieux, qu’il trouve ici le témoignage de
mon estime.
Au laboratoire Vétoquinol, pour son soutien scientifique et financier.
Au Ministère de l’Agriculture et de la Pêche pour la subvention attribuée à ce programme de
recherche.
A l’ensemble des membres du laboratoire de biochimie de l’hôpital Pitié Salpétrière, pour les
dosages des peptides sélectionnés dans cette étude.
A Madame Mireille Dubord pour ses analyses biochimiques.
A l’ensemble des propriétaires d’animaux ayant accepté de s’associer à ce travail de
recherche.
A ma femme, mon ange-gardien, ma vie.
A mes parents. Aucun mot ne sera jamais assez fort pour exprimer l’amour que je leur porte.
A l’ensemble de ma belle famille et notamment ma belle mère pour sa gentillesse.
A mes grands parents, exemplaires de tendresse et de gentillesse.
A la mémoire de ma regrettée grand-mère, de ma tante Julie, de mes arrières grands parents.
A ma tante Nicole et mon oncle André. A mon parrain Gérard, Norah et Benta.
A mes cousins et notamment Eric pour son amour respectueux des animaux et de la nature.
A Monsieur Yannick Guibon mon ami.
EVALUATION DE NOUVEAUX OUTILS DIAGNOSTIQUES DE L’INSUFFISANCE
CARDIAQUE CHEZ LE CHIEN : ETUDE D’Et-1, DU N-ter proANP ET DU BNP.
NOM : BEMBARON
Prénom : David Antoine Baptiste
RESUME
L’objet de cette étude était d’évaluer le N-ter proANP, le BNP et l’Et-1 comme
marqueurs de l’insuffisance cardiaque chez le chien : gradation des stades de l’insuffisance
cardiaque (IC) et distinction de l’origine cardiaque ou respiratoire des troubles respiratoires
chez le chien.
Elle a été réalisée sur 33 chiens non traités, indemnes d’autres entités pathologiques,
sans distinction d’âge, de sexe ni de race. Les animaux cardiaques ont été classés en fonction
de leur stade d’insuffisance cardiaque selon la classification ISACHC. Un regroupement
homogène a été réalisé en fonction de l’origine cardiaque ou respiratoire des troubles
respiratoires observés sur ces chiens. Cette classification a été validée par un examen clinique
complet, un examen radiographique, des mesures échocardiographiques et des dosages
biochimiques. Les dosage du N-ter proANP, du BNP et d’Et-1 ont été réalisés. Des
différences significatives entre les différents lots ou groupes ont été révélées par le test t de
Student pour p<0,05.
Les résultats des dosages du BNP s’accompagnent d’écarts types très importants et ne
conduisent pas à des différences significatives. En revanche, Et-1 et le N-ter proANP se
présentent comme des marqueurs fiables de l’insuffisance cardiaque chez le chien.
MOTS-CLES : Marqueur de l’insuffisance cardiaque – Et-1 – N-ter proANP – BNP – Origine
des troubles respiratoires- Chien.
JURY
Président :
Directeur : Pr. POUCHELON
Assesseur : Pr. BRUGERE
Invités : Pr. CHETBOUL et Dr. ROSENBERG
ADRESSE DE L’AUTEUR :
42 boulevard VAUBAN
78180 MONTIGNY LE BRETONNEUX
EVALUATION OF NEW DIAGNOSTICAL TOOLS IN CANINE HEART FAILURE :
STUDY OF Et-1, N-ter proANP and BNP.
NAME : BEMBARON
Surname : David Antoine Baptiste
SUMMARY
The aim of this study was to estimate N-ter proANP, BNP and Et-1 as markers of
canine cardiac insufficiency : to estimate the stages of heart failure and distinguish the cardiac
or respiratory origin of respiratory signs.
It was realized on 33 not treated, unhurt dogs of the other pathological entities,
without distinction of age, sex nor race. The cardiac animals were classified according to their
stage of heart failure with the ISACHC classification. A homogeneous grouping was made in
order to separate the cardiac origin and the respiratory origin of the respiratory signs observed
on these dogs. This classification was validated by a complete clinical exam, a radiographic
exam, echocardiographic measures and biochemical dosages. Dosage of N-ter proANP, BNP
and Et-1 were performed. Significant differences between the various groups were revealed
by the test t of Student for p<0,05.
The results of the dosages of BNP come along with very important standard deviations
and don’t lead to significant differences. On the other hand, Et-1 and N-ter proANP appear as
reliable markers of canine heart failure.
KEYWORDS : Marker of heart failure – Et-1 – N-ter proANP – BNP – origin of respiratory
signs – dog.
JURY
Président :
Director : Pr. POUCHELON
Assessor : Pr. BRUGERE
Guests : Pr. CHETBOUL et Dr. ROSENBERG
ADRESS OF THE AUTHOR :
42 boulevard VAUBAN
78180 MONTIGNY LE BRETONNEUX
TABLE DES MATIERES.
INTRODUCTION.
1
1.ETUDE DU FRAGMENT AMINOTERMINAL DU PROANP (N-TER PROANP),
DU BRAIN NATRIURETIC PEPTIDE (BNP) ET DE L’ENDOTHELINE (ET-1).
1.1
Un résidu inactif issu du proANP : le N-terminal pro ANP.
2
2
1.1.1. Synthèse et régulation de la sécrétion de N-ter proANP .
2
1.1.2. Mode d’action et effets biologiques du N-terminal proANP.
4
1.1.3. N-ter proANP et affections cardiovasculaires.
4
1.2. Un Autre peptide de la famille des peptides natriurétiques : le BNP.
5
1.2.1. Synthèse et régulation de la sécrétion de BNP.
5
1.2.2. Mode d’action et effets biologiques du BNP.
6
1.2.2.1. Mode d’action du BNP.
6
1.2.2.2. Effets biologiques du BNP.
7
1.2.2.2.1. Effet natriurétique et diurétique.
7
1.2.2.2.2. Effet vasodilatateur.
7
1.2.3. BNP et affections cardiovasculaires.
1.3. Une substance vasoactive d’origine endothélilale : l’endothéline.
7
8
1.3.1. Synthèse et régulation de la sécrétion d’Et-1.
8
1.3.2. Mode d’action et effets biologiques d’Et-1.
10
1.3.2.1. Mode d’action d’Et-1.
10
1
1.3.2.2. Effets biologiques d’Et-1.
11
1.3.2.2.1. Une vasoconstriction puissante, prolongée et peu réversible.
11
1.3.2.2.2. Effet sur la croissance cellulaire.
11
1.3.2.2.3. Effet vasodilatateur à dose faible.
11
1.3.3. Et-1 et affections cardiovasculaires.
11
1.3.3.1. Et-1 et insuffisance cardiaque.
12
1.3.3.2. Et-1 et hypertension artérielle pulmonaire (HTAP).
12
12
1.5. Objectif de recherche.
13
2.
1.4. Position du sujet.
ANIMAUX, MATERIEL ET METHODE.
14
2.1. Protocole.
14
2.2. Animaux.
14
2.3. Répartition des lots.
15
2.4. Examens radiographiques et radioscopiques.
16
2.5. Echocardiographies.
16
2.6. Dosages plasmatiques.
17
2.6.1. Dosage du N-ter proANP .
17
2.6.2. Dosage du BNP.
17
2.6.3. Dosage d’Et-1.
17
2
2.6.4. Biochimie sanguine.
18
2.7 Statistiques.
18
3.
19
RESULTATS.
3.1. Statistiques descriptives des différents lots.
19
3.2. Paramètres échocardiographiques enregistrés au cours de l’insuffisance cardiaque et de
l’insuffisance respiratoire.
28
3.3. Variations du N-ter proANP, du BNP et d’Et-1 enregistrés au cours de l’insuffisance
cardiaque et de l’insuffisance respiratoire.
37
3.3.1. Variations du N-ter proANP.
37
3.3.2. Variations du BNP.
39
3.3.3. Variations d’Et-1.
41
4. DISCUSSION.
43
4.1. Animaux indemnes d’autres entités pathologiques.
43
4.2. Chiens non traités : une grande originalité.
44
4.3. Paramètres échocardiographiques discriminants : une classification valide.
45
4.4. N-ter proANP et Et-1 : marqueurs de l’insuffisance cardiaque.
46
3
5. CONCLUSION
48
LISTE DES FIGURES
50
LISTE DES TABLEAUX
53
BIBLIOGRAPHIE
55
4
INTRODUCTION
Le tissu cardiaque admet de nombreuses fonctions, mécaniques bien sûr, mais aussi
endocrines. La mise en évidence de ces fonctions endocrines a été initiée par la découverte du
peptide atrial natriurétique (ANP). En 1981, De Bold et al. montraient que les oreillettes
cardiaques contenaient l’ANP en obtenant une natriurèse par injection d’extraits auriculaires
chez le rat (8). L’intérêt suscité par cette découverte a permis d’accroître les connaissances sur
cette hormone et notamment sur sa structure, son métabolisme, ses effets biologiques et a
orienté de nombreuses études vers des perspectives diagnostiques et thérapeutiques.
La famille des peptides natriurétiques comprend plusieurs représentants : l’ANP, son
chef de file, le Brain Natriuretic Peptide (BNP) et le CNP. D’autres segments protéiques
peuvent être exprimés à partir du même gène que l’ANP, notamment le fragment
aminoterminal du proANP (N-ter proANP).
Le système vasculaire possède également une activité endocrine. L’endothélium
vasculaire sécrète l’endothéline, responsable d’un effet vasoconstricteur. Largement étudiée
dans des modèles d’insuffisance cardiaque et d’hypertension artérielle pulmonaire,
l’endothéline présente, aujourd’hui, un intérêt majeur dans le diagnostic et le pronostic de
certaines maladies chez l’homme.
Cette étude propose d’objectiver l’intérêt du N-terproANP, du BNP et de
l’endothéline-1 dans la gradation de l’insuffisance cardiaque et la détermination de l’origine
des troubles respiratoires chez le chien.
Nous étudierons, dans un premier temps, le fragment aminoterminal du proANP (N-ter
proANP), le Brain Natriuretic Peptide (BNP) et l’endothéline-1 (Et-1). Nous envisagerons,
ensuite, les animaux, le matériel et la méthode utilisés pour ce travail. Les résultats de cette
étude seront présentés dans un troisième temps. Enfin, une quatrième partie sera attribuée à la
discussion.
5
1. ETUDE DU FRAGMENT AMINOTERMINAL DU PROANP (N-TER PROANP),
DU BRAIN NATRIURETIC PEPTIDE (BNP) ET DE L’ENDOTHELINE (ET-1).
1.1
Un résidu inactif issu du proANP : le N-ter proANP.
1.1.1
Synthèse et régulation de la sécrétion de N-ter proANP.
Le gène de l’ANP est formé de 3 exons séparés de 2 introns (15)(40). Les exons sont
transcrits en ARN messager (ARNm) et traduits en préproANP (figure 1). Chez l’homme, le
préproANP est constitué de 151 acides aminés. Sa taille est variable selon les espèces. Le
proANP est produit par clivage du peptide signal du préproANP. Ce peptide hydrophobe,
constitué chez l’homme de 25 acides aminés, correspond au signal d’entrée du proANP dans
le réticulum endoplasmique. Le proANP est donc formé de 126 acides aminés. Il est, par la
suite, véhiculé dans l’appareil de Golgi, puis vers les granules de sécrétion chargés de
l’entraîner vers la membrane et de le libérer. La partie N-terminal du proANP(1-44) semble
jouer un rôle important dans la détermination de la forme des vésicules, de leur taille et de
leur agrégation à la membrane plasmatique (5). Lors de l’exocytose , le proANP se clive en
deux fragments : le C-terminal proANP (99-126) ou ANP et le N-terminal proANP (1-98) ou
N-ter proANP (figure 1)(29)(18).
6
5'
Exon 1
Intron
Exon 2
Intron
Exon 3
3'
Transcription et epissage alternatif
ARNm
Traduction
Pré proANP
Passage dans le réticulum endoplasmique
ProANP
Stockage dans les granules de secretion puis exocytose
1
98 99
N-terminal proANP
126
ANP
Figure 1 : Biogenèse du N-ter pro ANP.
Le N-ter proANP, tout comme l’ANP, est précocement exprimé dans les atria, les
ventricules et le tissu de conduction ventriculaire au cours du développement embryonnaire
(57)(61). A l’état adulte, l’ANP et le N-ter proANP sont synthétisés principalement dans les
atria (prédominance dans l’aire subépicardiale et expression plus faible dans le septum
interatrial (2)), sources principales de l’ANP et du N-ter proANP circulants. Lors
d’insuffisance cardiaque, l’expression ventriculaire est réactivée et joue un rôle majeur dans la
synthèse de ces peptides (57)(47).
D’autres lieux de synthèse ont été décrits. A titre d’exemple, chez le rat, une
immunoréactivité ANP-like a été recensée au niveau de l’hypothalamus mais dans des
concentrations nettement inférieures à celles des oreillettes (2). Cependant l’importance
quantitative de l’hormone sécrétée par les tissus extracardiaques reste faible chez le sujet
adulte normal.
Différents stimuli peuvent venir modifier la sécrétion d’ANP et donc de N-ter
proANP. Le principal déterminant est la tension pariétale auriculaire. L’élévation de la
7
pression atriale entraîne une diurèse, une natriurèse et une kaliurèse (9) en conséquence de la
distension pariétale induite (10)(45).
1.1.2.
Mode d’action et effets biologiques du N-ter proANP.
Le N-ter proANP est une entité circulante stable et inactive.
La synthèse du N-ter proANP est directement liée à celle de l’ANP. En effet il existe
une cosécrétion des deux peptides en concentration équimolaire (16). Le N-ter proANP est,
par contre une forme circulante plus stable que l’ANP (46). En effet, le N-ter pro ANP a été
mis en évidence chez le chien et l’homme sain avec des concentrations nettement plus
importantes que pour l’ANP (53)(13). Ceci ne peut s’expliquer que par le fait qu’il persiste
plus longtemps dans le plasma que l’ANP (29). Aucune étude ne révèle une activité
biologique de ce peptide.
1.1.3.
N-terminal proANP et affections cardiovasculaires.
Lors des situations pathologiques telles l’insuffisance cardiaque ou l’HTA, on observe
une augmentation du N-ter proANP (43)(7) à des valeurs très supérieures à celles de l’ANP
(22). Chez l’homme, les taux de N-ter proANP sont différents selon les stades d’insuffisance
cardiaque (4).
Ainsi, le N-terminal proANP permet de grader les stades de l’insuffisance cardiaque
chez l’homme. Au début de l’étude réalisée ici, aucune information n’était disponible sur son
utilisation dans ce cadre chez le chien à cardiopathie spontanée.
Chez l’homme ce peptide a également été étudié pour sa valeur pronostique. Chez les
patients, dont la fraction d’éjection est maintenue, il se révèle être un facteur de prévision de
morbidité et de mortalité (1).
8
1.2
Un Autre peptide de la famille des peptides natriurétiques : le BNP.
Le Brain Natriuretic Peptide ou BNP a initialement été découvert dans le cerveau chez
le porc en 1988 (42). Il est, en fait, essentiellement synthétisé par le cœur, au même titre que
l’ANP (31).
1.2.1.
Synthèse et régulation de la sécrétion de BNP.
Le BNP présente une structure cyclique centrale de 17 acides aminés dont 11 sont
communs avec l’ANP (figure 2). Il existe une grande variabilité d’espèces : la forme
circulante chez l’homme est composée de 32 acides aminés et de 45 chez le rat.
NH2 -
Ser
Pro
Lys
Lys
Met
Val
Gln
Gly
Gly
Ser
Arg Lys Met
Asp
Phe
Arg
Gly
Cys
Val
Leu
Arg
Arg
COOH -
Lys
Ile
Cys
Gly
Leu
Ser
Ser
Gly Ser Ser
His
Figure 2. Structure du BNP humain. Les acides aminés communs avec l’ANP et le
CNP apparaissent en grisé.
D’après J.C Dussaule et R.Ardaillou (9 bis).
9
Le BNP est majoritairement synthétisé dans le cœur. Son ARN messager est moins
abondant que celui de l’ANP. Le rapport entre ARN messager ventriculaire et ARN messager
auriculaire est plus élevé pour le BNP que pour l’ANP, ce qui indique que la synthèse du BNP
est majoritairement ventriculaire (principalement ventriculaire gauche).
Le gène codant pour le BNP est distinct de celui de l’ANP (42) mais comprend
également 3 exons séparés de 2 introns. Le BNP est libéré, par le cœur, sous forme mature. Il
semblerait, toutefois que cette maturation interviendrait plus précocement que pour l’ANP.
Chez l’enfant, à la naissance, les concentrations plasmatiques sont extrêmement
élevées et nettement plus importantes que chez l’adulte sain (60).
La sécrétion du BNP est fonction de l’étirement des myocytes ventriculaires. Dans le
cadre expérimental de modèles d’hypertrophie ventriculaire gauche ou d’augmentation des
pressions ventriculaires, il existe des concentrations élevées de BNP.
1.2.2.
Mode d’action et effets biologiques du BNP.
1.2.2.1. Mode d’action du BNP.
Il existe 3 récepteurs des peptides natriurétiques. Les récepteurs de type 1 répartis en
un type 1a (ou guanylate cyclase-A) et un type 1b (ou guanylate cyclase-B) qui ont une
activité guanylate cyclase et les récepteur de type 2, non couplés à la guanylate cyclase,
récepteurs de clairance. Le BNP présente une affinité majoritaire pour les récepteurs de type
1a et de type 2 et très réduite pour le type 1b (19).
Les récepteurs de clairance sont très largement distribués et sont, de loin, les plus
abondants. Il représente plus de 90 % des récepteurs dans le cortex rénal, les vaisseaux, le
poumon et le cœur. Ils jouent un rôle dans le catabolisme des peptides natriurétiques avec l’
endopeptidase neutre.
La fixation du BNP sur les récepteurs de type 1 entraîne la formation d’un second
messager, le GMPc, après activation de la guanylate cyclase. Il existe trois cibles bien
caractérisées du GMPc : la protéine kinase, les canaux ioniques réglés par le GMPc et les
phosphodiestérases dépendantes du GMPc.
10
1.2.2.2. Effets biologiques du BNP
Les effets physiologiques du BNP sont proches de ceux de l’ANP. C’est un peptide
natriurétique, diurétique et vasodilatateur.
1.2.2.2.1.
Effet natriurétique et diurétique.
Le BNP provoque une natriurèse et une diurèse. L’effet natriurétique du BNP tel qu’il
a pu être analysé par des perfusions de l’hormone chez l’homme et chez l’animal est identique
à celui de l’ANP (le métabolisme des deux hormones est très proche et ils partagent des
récepteurs actifs identiques) mais son temps de demi vie est supérieur (38).
La perfusion de BNP, chez l’homme, provoque une augmentation de l’excrétion de
sodium, une nette diminution du taux plasmatique d’aldostérone et une augmentation du taux
plasmatique de GMPc et de son excrétion (28)(20).
1.2.2.2.2
Effet vasodilatateur.
Le BNP possède un effet vasodilatateur. Il provoque une relaxation artérielle (62) et
veineuse (37). Différents travaux ont permis de montrer la relation dose-dépendante de cet
effet. Mais, à doses équimolaires, la vasodilatation est moins prononcée que celle induite par
l’ANP (51)(21).
1.2.3.
BNP et affections cardiovasculaires.
Chez l’homme, le BNP plasmatique est élevé dans les cardiopathies s’accompagnant
d’une élévation de pression diastolique ventriculaire. La démonstration d’une augmentation
permanente de la sécrétion de BNP dans l’insuffisance cardiaque, a fait proposer l’utilisation
de son dosage plasmatique comme élément du diagnostic et du pronostic (17). En effet, le
11
dosage du BNP permet de déceler avec une bonne sensibilité les patients humains
asymptomatiques atteints d’insuffisance cardiaque (12)(59).
1.3 Une substance vasoactive d’origine endothéliale : l’endothéline.
A la suite d’une première série de travaux ayant révélé l’existence d’un facteur
constricteur d’origine endothéliale, l’endothéline a pu être isolée et purifiée, en 1991, par
Yanagisawa et coll.
1.3.1.
Synthèse et régulation de la sécrétion d’Et-1.
L’endothéline est un peptide, formé de 21 acides aminés, formant une double boucle
fermée par deux ponts disulfures (liaison cys-cys), et possédant une extrémité carboxylique
terminale très hydrophobe (figure 3).
Il existe trois isoformes de l’endothéline issues de trois gènes distincts (Et-1, Et-2, Et3). Parmi ces isoformes, l’endothéline 1 ou Et-1, est la seule produite par les cellules
endothéliales (27)(39).
Leu Ser
Met
Ser
Cys Ser Cys
NH2
Asp
Lys
Glu Cys Val Tyr Phe Cys His Leu Asp Ile
Ile Trp
COOH
Figure 3 : Structure de l’endothéline Et-1.
D’après Arnal et al. dans Hittinger et al. (19 bis).
12
L y s-A rg
A rg -A rg
P ré p ro E t-1
T ry-V al
B ig E t-1
ECE
E t-1
Figure 4 : représentation schématique de la maturation du préproEt-1 en Et-1.
D’après Arnal et al. dans Hittinger et al. (19 bis).
L’Et-1 provient d’un précurseur de grande taille, le préproendothéline, qui est clivé
enzymatiquement au niveau de deux paires d’acides aminés basiques (Lys-Arg, Arg-Arg)
pour donner naissance à un peptide biologiquement inactif constitué de 38 acides aminés chez
l’homme : la big-endothéline (figure 4). Cette dernière est elle-même scindée entre un
tryptophane et une valine par l’enzyme de conversion de l’endothéline (ECE) pour libérer le
peptide actif. Trois isoformes de l’ECE (ECE-1α, ECE-1β, ECE-2) ont été caractérisées par
leur structure moléculaire, leur localisation cellulaire et leur affinité pour les trois isopeptides,
les big-Et-1, 2 et 3. Dans les vaisseaux, l’ECE est présente à la fois sur les cellules
endothéliales et sur les cellules musculaires lisses.
La sécrétion d’endothéline 1 a été étudiée à partir de cellules endothéliales en culture.
La synthèse de l’ARNm de la préproEt-1 est stimulée par de nombreux facteurs,
notamment l’hypoxie (27) et est inhibée par le monoxyde d’azote (NO) et le facteur atrial
natriurétique. Consécutivement à l’augmentation de l’expression de l’ARNm, l’Et-1 et la big
13
endothéline apparaissent dans le milieu extracellulaire. Le temps de demi vie de l’ARNm est
très court, de l’ordre de 15 minutes.
1.3.2.
Mode d’action et effets biologiques d’Et-1.
1.3.2.1. Mode d’action d’Et-1.
L’endothéline exerce des effets par l’intermédiaire de récepteurs spécifiques localisés,
non seulement, au niveau des muscles lisses vasculaires, mais aussi, du cœur, des poumons,
des reins, des glandes surrénales, des nerfs et du tractus gastro-intestinal. L’Et-1 se lie de
manière spécifique et avec une forte affinité à ses récepteurs. Cette liaison est faiblement
réversible (ce qui pourrait expliquer la longue durée des effets).
Plusieurs sous types de récepteurs ont été identifiés. Ils appartiennent à la famille des
récepteurs couplés aux protéines G (26). Ils sont classés en fonction de l’affinité pour les
différentes isoformes :
Récepteur ET-A : affinité plus élevée pour Et-1
Récepteur ET-B : affinité égale pour les trois isoformes
Récepteur ET-C : affinité plus forte pour Et-3
L’étude des antagonistes de ces récepteurs offre des perspectives thérapeutiques
intéressantes pour certaines maladies cardiovasculaires.
La fixation de l’endothéline sur ses récepteurs active une cascade d’évènements
intracellulaires dont le premier élément est une augmentation du calcium intracellulaire.
D’autre part, l’endothéline active la phospholipase A2 avec libération d’acide arachidonique et
production de thromboxane et de prostaglandine. Elle stimule, également, les échanges
Na+/H+ avec acidification transitoire puis alcalinisation du milieu intracellulaire.
14
1.3.2.2. Effets biologiques d’Et-1.
1.3.2.2.1. Une vasoconstriction puissante, prolongée et peu réversible.
L’endothéline possède un effet vasoconstricteur de longue durée. Il résulte d’une
vasoconstriction intense plus ou moins marquée selon les lits vasculaires, les veines étant
généralement plus sensibles que les artères.
1.3.2.2.2. Effet sur la croissance cellulaire.
L’endothéline provoque une stimulation de la croissance des cellules musculaires
lisses, et une hypertrophie vasculaire et cardiaque.
1.3.2.2.3. Effet vasodilatateur à dose faible.
A dose faible, l’endothéline entraîne une vasodilatation plutôt qu’une vasoconstriction
dans certains lits vasculaires en fonction de la voie et du mode d’administration employés.
Cet effet vasodilatateur, particulièrement remarquable pour l’Et-3, résulte d’une libération de
NO ou de prostacycline, secondaire à la stimulation des récepteurs ET-B localisés sur les
cellules endothéliales.
1.3.3.
Et-1 et affections cardiovasculaires.
Dans les conditions physiologiques, les quantités d’endothéline mesurées dans le sang,
chez l’homme, sont très faibles, de l’ordre de 0,25 à 2 pg/ml. Toutefois, dans certaines
conditions pathologiques, les taux circulants d’endothéline peuvent être augmentés d’un
facteur 2 à 10. C’est le cas lors d’insuffisance cardiaque et d’hypertention artérielle
pulmonaire chez l’homme et dans des situations expérimentales impliquant divers modèles
animaux.
15
1.3.3.1
Et-1 et insuffisance cardiaque.
La concentration plasmatique d’Et-1 et l’expression de ses récepteurs augmentent
lors d’insuffisance cardiaque. On a pu montrer le rôle délétère de l’endothéline lors de
l’évolution de l’insuffisance cardiaque, à travers différents modèles expérimentaux tel que le
« pacing » ventriculaire chez le chien (54).
Dans l’espèce humaine, les taux importants d’endothéline mesurés dans les stades
avancés de la maladie, sont, de très mauvais pronostic. C’est, en effet, un marqueur prédictif
de la mortalité chez ces sujets (36).
1.3.3.2.
Et-1 et hypertension artérielle pulmonaire (HTAP).
Lors d’insuffisance respiratoire, l’hypoxie est à l’origine d’une hypertension artérielle
pulmonaire (HTAP). Dans les divers modèles animaux d’HTAP, les concentrations
plasmatiques d’endothéline sont augmentées. Ce sont les vaisseaux les plus muscularisés qui
expriment et libèrent l’ET-1 (14).
1.4. Position du sujet.
Le développement d’une maladie cardiaque s’accompagne, dans l’espèce canine d’une
longue phase asymptomatique ou compensée, au cours de laquelle, la détection de la
cardiopathie est possible (présence d’un souffle par exemple), mais les conséquences
cliniques de la maladie restent absentes (c’est la phase de compensation qui correspond au
stade I de l’insuffisance cardiaque selon la classification ISACHC (30)). Ensuite, l’animal
développe des symptômes comme une fatigue à l’effort (stade II de l’insuffisance cardiaque),
puis permanente (stade III ), une dyspnée, de la toux… .
16
Le diagnostic clinique de l’insuffisance cardiaque est parfois malaisé chez le chien. En
effet, de nombreuses affections strictement respiratoires peuvent occasionner des symptômes
semblables à ceux d’une décompensation cardiaque. Face à un animal symptomatique, le
clinicien devra différencier une cause cardiaque, d’une cause respiratoire. Sa tâche est rendue
difficile car certaines races canines sont prédisposées à des affections cardiaques et
respiratoires. Il est même fréquent qu’un animal présente à la fois les deux affections, avec
des symptômes pouvant être expliqués par l’une ou par l’autre de ces affections, ou même par
les deux. Outre son examen clinique, le clinicien dispose d’examens complémentaires
permettant de distinguer les affections cardiaques et respiratoires (radiographie, radioscopie,
fibroscopie, échocardiographie…). Malgré ce large éventail d’outils et leur intérêt, le coût
parfois élevé de certains de ces examens, leur difficulté d’interprétation, leur non disponibilité
ou leur manque de sensibilité expliquent l’existence d’imperfections diagnostiques.
Ces imperfections conduisent naturellement à rechercher de nouveaux examens
complémentaires à réaliser chez l’animal présentant des troubles respiratoires.
1.5. Objectif de recherche.
Nous proposons d’évaluer l’utilisation potentiellement discriminante (entre origine
cardiaque et respiratoire) de l’endothéline 1, du N-ter proANP et du BNP dans l’évaluation de
l’origine des troubles respiratoires chez le chien et de répondre ainsi à une question
spécifiquement vétérinaire. Nous examinerons également l’intérêt potentiel de ces marqueurs
dans la gradation de l’insuffisance cardiaque.
17
2.
ANIMAUX, MATERIEL ET METHODE.
2.1. Protocole.
Le protocole d’étude a été mené entre1998 et 2001.
Les caractéristiques du protocole sont présentées, de manière synthétique, dans le
tableau 1.
Nombre d’animaux
33 chiens
Examens radiographiques et radioscopiques
Face et Profil du thorax
Radioscopie de la trachée
Examens échocardiographiques
Mode bidimensionnel, TM, doppler
Examens biochimiques sanguins
Urée,
Créatinine,
ALAT,
Phosphatases
alcalines, Protéines totales, Glucose
Dosage hormonaux
N-ter proANP, BNP, Et-1
Tableau I : Caractéristiques synthétiques du protocole d’étude.
2.2. Animaux.
33 chiens ont participé au protocole. Parmi eux, 28 chiens, non médicamentés,
insuffisants cardiaques (endocardiose mitrale ou myocardiopathie dilatée) et/ou insuffisants
respiratoires (collapsus trachéal, paralysie du larynx, syndrome obstructif respiratoire des
races brachycéphales) ont été inclus dans l’étude. Ils ont été recrutés par l’intermédiaire d’une
consultation spécialisée en cardiologie et pathologie respiratoire, spécifiquement créée par le
service de médecine de l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort. Cinq chiens sains témoins ont
également été inclus dans l’étude.
18
Aucune distinction d’âge, de sexe ou de race n’a été faite. Ce recrutement large
correspond à une volonté de s’inscrire dans un modèle le plus proche de celui rencontré par
n’importe quel praticien lors de son exercice courant.
2.3. Répartition des lots.
Les 33 animaux inclus dans l’étude ont été répartis selon six lots distincts :
Lot témoin : 5 chiens
Lot d’insuffisants cardiaques I/III : 5
Lot d’insuffisants cardiaques II/III : 4
Lot d’insuffisants cardiaques III/III : 6
Lot d’insuffisants respiratoires : 13
Le
stade
d’insuffisance
cardiaque
I/III,
définit
les
animaux
cardiaques
asymptomatiques. Les stades II/III et III/III regroupent les animaux exprimant des
symptômes. Cette classification a été proposée par le conseil international de cardiologie des
animaux de compagnie (International Small Animal Cardiac Health Council )(30).
Afin de répondre à la question posée dans cette étude (discrimination entre origine
cardiaque et respiratoire), ces lots ont été regroupés en fonction de l’existence de symptômes
respiratoires. Ainsi, nous avons pu définir 3 groupes :
Groupe des animaux sans symptôme respiratoire (regroupe les chiens
témoins et les IC I/III), n=10.
Groupe des animaux symptomatiques d’origine cardiaque (regroupe les IC
II/III et les IC III/III), n=10.
Groupe des animaux symptomatiques d’origine respiratoire, n=13.
Ce regroupement de lot a été possible grâce à la vérification préalable de leur
homogénéité (absence de différence significative concernant l’âge, le format, le sexe des
animaux).
19
2.4. Examens radiographiques et radioscopiques.
Des clichés du thorax de face (incidence dorso-ventrale) et de profil (en décubitus
latéral droit), sans préparation, ont été réalisés sur un appareil TROPHY® VETOX 300 ST.
Ces examens ont permis d’évaluer les modifications des éléments intra et
extrathoraciques.
Une attention particulière à l’examen de la trachée, a été portée ; cet examen a parfois
été complété en cas de nécessité par un examen radioscopique de la trachée, autorisant une
appréciation dynamique de l’organe.
2.5. Echocardiographies.
Les examens échocardiographiques ont été réalisés à l’aide d’un échographe
ESAOTE® (SIM 7000-Challenge), équipé de deux sondes sectorielles multifréquences 3.5-5
et 7.5-10 Mhz, de doppler pulsé, couleur, et continu.
A partir de l’incidence temps-mouvement transventriculaire (coupe 2 de
Feigenbaum)(11) ont été calculés les paramètres suivants : Dd (diamètre diastolique du
ventricule gauche), Ds (diamètre systolique du ventricule gauche), PPVGd (paroi postérieure
du ventricule gauche en diastole), PPVGs (paroi postérieure du ventricule gauche en systole),
Sd (septum interventriculaire en diastole), Ss (septum interventriculaire en systole), VDd
(diamètre diastolique du ventricule droit), PVDs (mesure de la paroi postérieure du ventricule
droit en systole), ainsi que l’indice d’inotropisme FR (fraction de raccourcissement)
(FR=(Dd-Ds)/Dd ).
A partir de la coupe transaortique (coupe 4 de Feigenbaum) ont été déterminés : Ao
(diamètre aortique en mm), AG( diamètre atrial en mm) et le rapport AG/Ao (diamètre atrial
gauche/ diamètre aortique)(11).
Des mesures doppler de l’ensemble des valves cardiaques ont été réalisés : flux
antérogrades et régurgitations aortique, pulmonaire, mitral et tricuspidien.
20
2.6. Dosages plasmatiques.
Toutes les prises de sang ont été effectuées de manière atraumatique à la veine
jugulaire. La même position a été adoptée pour l’ensemble des prélèvements : animal assis
avec encolure en extension.
2.6.1.
Dosage du N-ter proANP.
7 ml de sang ont été recueillis dans un tube réfrigéré contenant 10 mg d’éthylène
diamine tétraacétique acide (EDTA), des inhibiteurs de protéases (0,1 mg d’aprotinine, 0,2 mg
de phénylméthyl-sulfonyl fluoride et 0,05 mg d’inhibiteur de trypsine). Le plasma a été séparé
par centrifugation 1000 G/min, 10 min à 4°C puis congelé à –60°C (34). Les dosages de Nterminal proANP ont été réalisés au laboratoire de biochimie de l’hôpital La Pitié Salpétrière
(Pr Carayon) par radioimmunologie.
2.6.2.
Dosage du BNP.
7 ml de sang ont été recueillis dans un tube réfrigéré contenant 10 mg d’éthylène
diamine tétraacétique acide (EDTA), des inhibiteurs de protéases (0,1 mg d’aprotinine, 0,2 mg
de phénylméthyl-sulfonyl fluoride et 0,05 mg d’inhibiteur de trypsine). Le plasma a été séparé
par centrifugation 1000 G/min, 10 min à 4°C puis congelé à –60°C. Les dosages du BNP ont
été réalisés au laboratoire de biochimie de l’hôpital La Pitié Salpétrière (Pr Carayon) par
radioimmunologie.
2.6.3. Dosage d’Et-1.
4 ml de sang ont été recueillis dans un tube refrigéré contenant 10 mg d’éthylène
diamine tétraacétique acide (EDTA). Le plasma a été séparé par centrifugation 1000 G/min,
21
10 min à 4°C puis congelé à –60°C. Les dosages d’Et-1 ont été réalisés au laboratoire de
biochimie de l’hôpital La Pitié Salpétrière (Pr Carayon) par radioimmunologie.
2.6.4. Biochimie sanguine.
1 ml de sang a été recueilli sur tube sec réfrigéré. Après décantation du sérum, les
dosages d’Urée, Créatinine, ALAT, Phosphatases alcalines, Protéines totales et Glucose ont
été réalisés au laboratoire d’analyse de l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort par Mme M.
Dubord.
2.7.Statistiques.
Les résultats sont exprimés en valeur de la moyenne +/- SEM (écart type de la
moyenne). Pour chaque paramètre étudié, d’éventuelles différences entre les lots ou groupes
ont été analysées par test de Student. Les différences ont été jugées significatives pour
p<0,05.
22
3.
RESULTATS.
3.1. Statistiques descriptives des différents lots.
33 chiens, 19 mâles et 14 femelles, ont été inclus dans cette étude. 18 chiens ont un
poids inférieur à 20 kg et 15 ont un poids supérieur à 20 kg. Les animaux sont âgés de 9 mois
à 15 ans.
L’âge des animaux des différents lots est présenté dans le tableau II. Les cardiaques en
stade II et III sont significativement plus âgés que les témoins (figure 5). Il existe également
une différence significative entre les IC I/III et II/III.
Age des animaux
Age (ans)
15,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
10,00
5,00
0,00
Age (an)
Figure 5 : Comparaison de l’âge des animaux en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
Age (ans)
témoins
3,80 +/- 0,97
IC I/III
5,70 +/- 1,39
IC II/III
12,25 +/- 1,89
IC III/III
7,50 +/- 1,18
Tableau II : Age des animaux en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
23
L’âge des animaux en fonction de l’origine des symptômes respiratoires est présenté
dans le tableau III. Les symptomatiques cardiaques sont significativement plus âgés que les
animaux asymptomatiques (figure 6). Il existe une différence non significative entre
symptomatiques d’origine cardiaque et symptomatiques d’origine respiratoire.
Age des animaux
12,00
Age (ans)
10,00
Asymptomatiques
8,00
6,00
Symptomatiques d'origine
cardiaque
4,00
Symptomatiques d'origine
respiratoire
2,00
0,00
Age (an)
Figure 6 : Comparaison de l’âge des animaux en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Age (an)
Asymptomatiques
4,75 +/- 0,86
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
9,40 +/- 1,24
6,60 +/- 1,35
Tableau III : Age des animaux en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
24
L’ensemble des chiens inclus sont indemnes d’autres maladies.
Comparaison des taux plasmatiques
d'urée
1,00
Urée g/l
0,80
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
0,60
0,40
0,20
0,00
Urée g/l
Figure 7 : Comparaison des taux plasmatiques d’urée en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
Comparaison des taux plasmatiques de
créatinine
Créatinine mg/l
25,00
20,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
15,00
10,00
5,00
0,00
Créatinine mg/l
Figure 8 : Comparaison des taux plasmatiques de créatinine en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
25
UI/l
Comparaison des taux plasmatiques
d'ALT et de PAL
140,00
120,00
100,00
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
ALT UI/l
PAL UI/l
Figure 9 : Comparaison des taux plasmatiques d’ALT et de PAL en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
Protéines totales g/l
Comparaison des taux plasmatiques de
protéines totales
80,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
60,00
40,00
20,00
0,00
Protéines totales g/l
Figure 10 : Comparaison des taux plasmatiques de protéines totales en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
26
Glucose g/l
Comparaison des taux plasmatiques
de glucose
1,50
Témoins
1,00
IC I/III
0,50
IC II/III
IC III/III
0,00
Glucose g/l
Figure 11 : Comparaison des glycémies en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
Urée g/l
Créatinine mg/l
ALT UI/l
PAL UI/l
Protéines totales g/l
Glucose g/l
témoins
0,34 +/- 0,05
9,28 +/- 2,56
44,40 +/- 11,81
68,80 +/- 15,50
57,20 +/- 1,77
0,91 +/- 0,03
IC I/III
0,31 +/- 0,05
9,54 +/- 1,48
26,60 +/- 6,58
62,00 +/- 8,69
60,80 +/- 2,52
1,05 +/- 0,03
IC II/III
0,65 +/- 0,15
15,75 +/- 3,82
41,00 +/- 7,36
130,75 +/- 47,17
IC III/III
0,44 +/- 0,07
11,50 +/- 1,23
59,83 +/- 9,19
124,50 +/- 23,42
68,50 +/- 4,94
0,81 +/- 0,20
61,83 +/- 3,98
1,02 +/- 0,08
Tableau IV : Valeurs des dosages plasmatiques d’urée, de créatinine, d’ALT, de PAL, de
protéines totales et de glucose en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
Les résultats des dosages biochimiques des différents lots sont présentés dans le
tableau IV. Nous avons pu relever un taux d’urée supérieur à la normale chez les IC II/III (33)
(figure 7). En revanche les taux de créatinine sont restés compris dans les normes (33) (figure
8). Les concentrations plasmatiques moyennes d’ALT sont augmentées chez les témoins et les
cardiaques décompensés et semblent s’accroître avec le stade d’insuffisance (33) (figure 9). Il
existe une différence significative entre les IC I/III et les IC III/III. Nous relevons également
une augmentation non significative des concentrations plasmatiques des PAL chez les stades
2 et 3 (33).
La protéinémie est normale (33) (figure 10).
La glycémie est normale (33) (figure 11). Toutefois une différence significative est à
retenir entre les témoins et les IC I/III.
27
Comparaison des taux plasmatiques d'urée
0,70
Urée g/l
0,60
0,50
Asymptomatiques
0,40
0,30
Symptomatiques d'origine
cardiaque
0,20
Symptomatiques d'origine
respiratoire
0,10
0,00
Urée g/l
Figure 12 : Comparaison des taux plasmatiques d’urée en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
Créatinine mg/l
Comparaison des taux plasmatiques de
créatinine
20,00
Asymptomatiques
15,00
Symptomatiques
d'origine cardiaque
10,00
Symptomatiques
d'origine respiratoire
5,00
0,00
Créatinine mg/l
Figure 13 : Comparaison des taux plasmatiques de créatinine en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
Urée g/l
Créatinine mg/l
Asymptomatiques
0,32 +/- 0,03
9,41 +/- 1,40
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
0,52 +/- 0,07
0,35 +/- 0,04
13,20 +/- 1,71
9,65 +/- 0,55
Tableau V : Valeurs des dosages d’urée et de créatinine en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
28
Les résultats des dosages biochimiques des différents groupes étudiés sont présentés
dans les tableaux V, VI, VII et VIII.
Les concentrations plasmatiques moyennes d’urée des différents groupes étudiés,
varient, entre 0,32 +/- 0,03 (asymptomatique) et 0,52 +/- 0,07 g/L (cardiaque) (figure 12).
Cette dernière valeur est très légèrement en excès par rapport aux normes du laboratoire (33).
Il existe une différence significative entre les groupes asymptomatique et cardiaque.
Les concentrations plasmatiques moyennes de créatinine des différents groupes
étudiés, varient, entre 9,41 +/- 1,40 (asymptomatique) et 13,20 +/- 1,71 mg/L (cardiaque)
(figure 13). Il n’existe pas de différence significative entre les groupes.
Protéines totales g/l
Comparaison des taux plasmatiques de
protéines
70,00
68,00
66,00
64,00
62,00
60,00
58,00
56,00
54,00
52,00
Asymptomatiques
Symptomatiques
d'origine cardiaque
Symptomatiques
d'origine respiratoire
Protéines totales g/l
Figure 14 : Comparaison des taux plasmatiques des protéines totales en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
Protéines totales
g/l
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
59,00 +/- 1,57
64,50 +/- 3,12
61,08 +/- 1,73
Tableau VI : Valeurs des dosages des protéines totales en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
29
Les concentrations plasmatiques moyennes de protéines totales varient très faiblement
d’un groupe à un autre, et sont comprises dans les normes (33) (figure 14). Il n’existe pas de
différence significative entre les groupes.
Comparaison des taux plasmatiques de
glucose
1,20
Glucose g/l
1,00
Asymptomatiques
0,80
Symptomatiques d'origine
cardiaque
0,60
0,40
Symptomatiques d'origine
respiratoire
0,20
0,00
Glucose g/l
Figure 15 : Comparaison des glycémies en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
Glucose g/l
Asymptomatiques
0,98 +/- 0,03
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
0,93 +/- 0,09
1,01 +/- 0,04
Tableau VII : Valeurs de la glycémie en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
Les concentrations plasmatiques moyennes de glucose varient faiblement d’un groupe
à un autre, et restent dans les normes (33) (figure 15). Il n’existe pas de différence
significative entre les groupes.
30
UI/l
Comparaison des taux plasmatiques d'ALT
et de PAL
180,00
160,00
140,00
120,00
100,00
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine
cardiaque
Symptomatiques d'origine
respiratoire
ALT UI/l
PAL UI/l
Figure 16 : Comparaison des taux plasmatiques d’ALT et de PAL en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
ALT UI/l
PAL UI/l
Asymptomatiques
35,50 +/- 7,03
65,40 +/- 8,45
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
52,30 +/- 6,70
55,00 +/- 12,17
127,00 +/- 21,92
167,73 +/- 52,28
Tableau VIII : Valeurs des dosages d’ALT et de PAL en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Les dosages d’ALT sont supérieurs à la valeur de référence pour les groupes cardiaque
et respiratoire (33) (figure 16). Il n’existe, cependant, aucune, variation significative entre les
différents groupes étudiés.
Les concentrations plasmatiques moyennes de phosphatases alcalines varient entre
65,40 +/- 8,45 (asymptomatique) et 167,73 +/- 52,28 UI/l (respiratoire) (figure 16). Il existe
une différence significative entre les groupes asymptomatique et respiratoire.
31
3.2. Paramètres échocardiographiques enregistrés au cours de l’insuffisance
cardiaque et de l’insuffisance respiratoire.
Comparaison des diamètres de l'aorte et de
l'atrium gauche
50,00
mm
40,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
30,00
20,00
10,00
0,00
Ao mm
AG mm
Figure 17 : Comparaison des diamètres de l’aorte et de l’atrium gauche en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
Comparaison du rapport entre le
diamètre atrial gauche et aortique
AG/Ao
2,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
1,50
1,00
0,50
0,00
AG/Ao
Figure 18 : Comparaison du rapport du diamètre atrial gauche et aortique en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
32
témoins
25,78 +/- 1,20
22,92 +/- 1,22
0,89 +/- 0,03
Ao mm
AG mm
AG/Ao
IC I/III
19,16 +/- 1,32
19,32 +/- 1,22
1,01 +/- 0,02
IC II/III
18,73 +/- 2,66
25,50 +/- 2,78
1,38 +/- 0,06
IC III/III
22,68 +/- 3,47
40,77 +/- 5,50
1,82 +/- 0 06
Tableau IX : Valeurs du diamètre aortique, du diamètre atrial gauche, et du rapport AG/Ao en
fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
Lors d’insuffisance cardiaque, le diamètre atrial gauche augmente avec l’aggravation
de la maladie et le développement de symptômes, alors que le diamètre aortique se maintient
dans les trois stades (figure 17) (les résultats sont présentés dans le tableau IX). Ainsi, le
rapport AG/Ao devient supérieur à 1,5 chez les IC III/III, et il existe une différence
significative entre tous les lots étudiés pour ce paramètre (tableau IX) (figure 18).
70,00
60,00
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
SI
Vd
VG mm
PP d
VG mm
d
S I mm
Vs
V G mm
PP s
VG mm
s
V D mm
d
PV m
D m
s
m
m
FR
%
mm ou %
Paramètres septaux et ventriculaires
Figure 19 : Comparaison des paramètres échocardiographiques septaux et ventriculaires en
fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
33
m/s
Comparaison des paramètres Doppler
1,40
1,20
1,00
0,80
0,60
0,40
0,20
0,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
TP
m/s
Ao E mit A mit E tri A tri
m/s m/s m/s m/s m/s
Figure 20 : Comparaison des paramètres Doppler en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
SIVd mm
VGd mm
PPVGd mm
SIVs mm
VGs mm
PPVGs mm
VDd mm
PVDs mm
FR %
TP m/s
Ao m/s
E mit m/s
A mit m/s
E tri m/s
A tri m/s
témoins
9,56 +/- 0,90
41,32 +/- 3,40
9,40 +/- 0,78
15,26 +/- 1,17
25,42 +/-2,43
12,84 +/- 0,59
5,34 +/- 1,24
5,58 +/-1,09
32,46 +/- 8,11
0,85 +/- 0,06
1,00 +/- 0,09
0,71 +/- 0,08
0,48 +/- 0,06
0,45 +/- 0,02
0,34 +/- 0,01
IC I/III
8,60 +/- 1,25
32,78 +/- 5,01
7,48 +/- 1,00
10,96 +/- 0,98
20,72 +/- 3,58
11,78 +/- 1,03
6,52 +/- 1,29
5,40 +/- 0,79
37,20 +/- 2,35
0,70 +/- 0,05
1,26 +/- 0,07
0,58 +/- 0,06
0,49 +/- 0,06
0,61 +/- 0,07
0,38 +/- 0,04
IC II/III
7,40 +/- 0,36
38,38 +/- 4,31
7,45 +/- 0,89
10,68 +/- 0,61
23,30 +/- 5,69
11,45 +/- 0,96
5,03 +/- 1,81
6,15 +/- 0,83
36,05 +/- 12,14
0,66 +/- 0,06
0,86 +/- 0,06
0,77 +/- 0,10
0,46 +/- 0,24
0,53 +/- 0,03
0,28 +/- 0,14
IC III/III
7,95 +/- 1,05
58,63 +/- 7,44
7,12 +/- 1,27
12,62 +/- 1,35
45,57 +/- 8,80
10,82 +/- 2,23
7,82 +/- 1,85
5,30 +/- 2,09
26,17 +/- 6,85
0,92 +/- 0,06
0,88 +/- 0,05
0,88 +/- 0,15
0,38 +/- 0,21
0,59 +/- 0,13
0,21 +/- 0,07
Tableau X : Valeurs échocardiographiques en mode TM et Doppler en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
34
Les résultats de l’échocardiographie en mode TM (tableau X) montre que la maladie
cardiaque évolue vers une dilatation ventriculaire gauche en diastole et en systole avec une
diminution de la fraction de raccourcissement (figure 19). Il existe une différence significative
pour le paramètre VGd entre les IC I/III et les III/III, et pour le paramètre SIVs entre les
témoins et les IC I/III et entre témoins et II/III.
Pour l’examen Doppler (tableau X), il existe une variation significative pour le débit
sanguin pulmonaire entre les IC I/III et les III/III et pour le flux aortique entre les I/III et les
II/III mais aussi entre les I/III et III/III (figure 20).
Comparaison du reflux mitral
Reflux mitral m/s
5,00
4,00
IC I/III
IC II/III
IC III/III
3,00
2,00
1,00
0,00
Insuffisance mitrale
Figure 21 : Comparaison du reflux mitral en fonction stade d’insuffisance cardiaque.
témoins
Mit m/s
IC I/III
0,99 +/- 0,16
IC II/III
3,13 +/- 0,00
IC III/III
3,80 +/- 0,09
Tableau XI : Valeurs du reflux mitral en fonction stade d’insuffisance cardiaque.
Le reflux mitral est d’autant plus important que le stade d’insuffisance est élevé
(tableau XI) (figure 21). Une différence significative est relevée entre les IC I/III et les III/III.
35
mm
Comparaison des diamètres de l'aorte et de
l'atrium gauche
40,00
35,00
30,00
25,00
20,00
15,00
10,00
5,00
0,00
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine
cardiaque
Symptomatiques d'origine
respiratoire
Ao mm
AG mm
Figure 22 : Comparaison des diamètres de l’aorte et de l’atrium gauche en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
Ao mm
AG mm
Asymptomatiques
22,47 +/- 1,39
21,12 +/- 1,01
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
21,10 +/- 2,32
17,88 +/- 1,28
34,66 +/- 4,16
18,48 +/- 1,26
Tableau XII : Valeurs des diamètres aortique et atrial gauche en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
Le diamètre moyen aortique varie entre 17,88 +/- 1,28 (groupe respiratoire) et 22,47
+/- 1,39 mm (asymptomatiques) (tableau XII). Il existe une différence significative entre le
groupe respiratoire et le groupe asymptomatique (figure 22).
Le diamètre moyen de l’atrium gauche varie entre 18,48 +/- 1,26 (groupe respiratoire)
et 34,66 +/- 4,16 mm (groupe cardiaque) (tableau XII). Il existe une différence significative
entre le groupe asymptomatique et le groupe cardiaque (figure 22). Il en est de même entre le
groupe cardiaque et le groupe respiratoire.
36
AG/Ao
Comparaison du rapport du diamètre
atrial gauche et aortique
2,00
1,80
1,60
1,40
1,20
1,00
0,80
0,60
0,40
0,20
0,00
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine
cardiaque
Symptomatiques d'origine
respiratoire
1
Figure 23 : Comparaison du rapport du diamètre atrial gauche et aortique en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
AG/Ao
Asymptomatiques
0,95 +/- 0,03
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
1,65 +/- 0,08
1,04 +/- 0,03
Tableau XIII : Valeurs du rapport AG/Ao en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Pour le groupe cardiaque, le diamètre moyen de l’atrium gauche est supérieur à celui
de l’aorte, avec un rapport AG/Ao égal à 1,65 +/- 0,08. Pour les autres groupes étudiés, ce
rapport est proche de 1 (tableau XIII) (figure 23). Il existe une différence significative entre
chaque groupe étudié : asymptomatique / cardiaque, asymptomatique / respiratoire, cardiaque
/ respiratoire.
37
Paramètres septaux et ventriculaires
60,00
Asymptomatiques
mm ou %
50,00
40,00
Symptomatiques d'origine
cardiaque
30,00
20,00
Symptomatiques d'origine
respiratoire
10,00
PP
m
VG m
d
m
m
SI
Vs
m
VG m
PP s m
VG m
s
m
VD m
d
PV mm
D
s
m
m
FR
%
d
VG
SI
Vd
m
m
0,00
Figure 24 : Comparaison des paramètres échocardiographiques septaux et ventriculaires en
fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
SIVd mm
VGd mm
PPVGd mm
SIVs mm
VGs mm
PPVGs mm
VDd mm
PVDs mm
FR %
Asymptomatiques
9,08+/- 0,74
37,05 +/- 3,19
8,44 +/- 0,68
13,11 +/- 1,02
23,07 +/- 2,19
12,31 +/- 0,59
5,93 +/- 0,87
5,49 +/- 0,63
34,83 +/- 4,06
Symptomatiques d'origine cardiaque
7,73 +/- 0,63
50,53 +/- 5,64
7,25 +/- 0,80
11,84 +/- 0,87
36,66 +/- 6,58
11,07 +/- 1,34
6,70 +/- 1,34
5,64 +/- 1,25
30,12 +/- 6,15
Symptomatiques d'origine respiratoire
7,57 +/- 0,43
27,51 +/- 2,59
7,22 +/- 0,38
10,48 +/- 0,76
17,46 +/- 1,64
10,48 +/- 0,64
7,61 +/- 0,83
6,58 +/- 0,53
38,62 +/- 2,21
Tableau XIV : Valeurs des paramètres échocardiographiques en mode TM en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
La figure 24 montre, globalement, des épaisseurs moyennes septales et ventriculaires
proches pour les différents groupes étudiés, excepté pour la taille de la cavité ventriculaire
gauche en diastole et en systole (les résultats sont présentés dans le tableau XIV). Pour ce
paramètre, il existe, en diastole, une différence significative entre les groupes asymptomatique
et respiratoire et entre les groupes cardiaque et respiratoire. En systole, il existe une différence
significative entre les groupes cardiaque et respiratoire.
38
Comparaison des paramètres Doppler
1,20
1,00
Asymptomatiques
m/s
0,80
Symptomatiques d'origine
cardiaque
0,60
0,40
Symptomatiques d'origine
respiratoire
0,20
0,00
TP
m/s
Ao
m/s
E mit A mit
m/s m/s
E tri
m/s
A tri
m/s
Figure 25 : Comparaison des paramètres Doppler en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
TP m/s
Ao m/s
E mit m/s
A mit m/s
E tri m/s
A tri m/s
Asymptomatiques
0,77 +/- 0,05
1,13 +/- 0,07
0,64 +/- 0,05
0,49 +/- 0,04
0,53 +/- 0,05
0,36 +/- 0,02
Symptomatiques d'origine cardiaque
0,82 +/- 0,06
0,87 +/- 0,04
0,84 +/- 0,10
0,42 +/- 0,14
0,57 +/- 0,08
0,24 +/- 0,07
Symptomatiques d'origine respiratoire
0,83 +/- 0,06
1,09 +/- 0,04
0,65 +/- 0,04
0,48 +/- 0,04
0,49 +/- 0,04
0,37 +/- 0,03
Tableau XV : Valeurs des paramètres Doppler en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Les résultats de l’examen Doppler sont présentés dans le tableau XV. Pour le débit
sanguin aortique, il existe une différence significative entre les groupes asymptomatique et
cardiaque et entre le groupe respiratoire et le groupe cardiaque (figure 25).
39
Reflux mitral
Reflux mitral m/s
4,00
3,50
3,00
Asymptomatiques
2,50
Symptomatiques d'origine
cardiaque
2,00
1,50
Symptomatiques d'origine
respiratoire
1,00
0,50
0,00
Mit m/s
Figure 26 : Comparaison du reflux mitral en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Mit m/s
Asymptomatiques
0,99 +/- 0,16
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
3,57 +/- 0,23
1,56 +/- 0,49
Tableau XVI : Valeurs du reflux mitral en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
La figure 26 montre que le reflux mitral est nettement plus important chez les
cardiaques décompensés. Les résultats sont présentés dans le tableau XVI. Il existe une
différence significative entre le groupe asymptomatique et le groupe symptomatique d’origine
cardiaque. Il en est de même entre le groupe symptomatique d’origine cardiaque et celui
d’origine respiratoire.
40
3.3. Variations du N-ter proANP, du BNP et d’Et-1 enregistrés au cours de
l’insuffisance cardiaque et de l’insuffisance respiratoire.
3.3.1 Variations du N-ter proANP.
N-ter proANP pg/ml
Comparaison des taux plasmatiques de Nter proANP
200,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
150,00
100,00
50,00
0,00
N-ter proANP
Figure 27 : Comparaison des taux plasmatiques de N-ter proANP en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
N-terminal proANP pg/ml
témoins
71,20 +/- 17,93
IC I/III
68,80 +/- 19,55
IC II/III
124,25 +/- 53,47
IC III/III
123,50 +/- 20,93
Tableau XVII : Valeurs des dosages de N-ter proANP en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
Les concentrations moyennes brutes de N-ter proANP en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque varient entre 68,80 +/- 19,55 et 124,25 +/- 53,47 pg/ml (tableau
XVII). Les concentrations sont supérieures chez les stades cardiaques II et III mais il n’existe
pas de différence significative (figure 27).
41
N-ter proANP pg/ml
Comparaison des taux plasmatiques de
N-ter proANP
160,00
140,00
120,00
100,00
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine
cardiaque
symptomatiques d'origine
respiratoire
Nter Pro ANP
Figure 28 : Comparaison des taux plasmatiques de N-ter proANP en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
N-ter pro ANP
pg/ml
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
70,00 +/- 12,51
123,80 +/- 22,96
65,92 +/- 5,15
Tableau XVIII : Valeurs des dosages de N-ter proANP en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
Les résultats des dosages moyens de N-ter proANP des différents groupes étudiés,
varient, en concentration brute, entre 65,92 +/- 5,15 (groupe respiratoire) et 123,80 +/- 22,96
pg/ml (groupe cardiaque) (tableau XVIII). La figure 28 fait apparaître une concentration
moyenne nettement supérieure pour le groupe cardiaque et des moyennes proches pour le
groupe respiratoire et le groupe asymptomatique. Ce détachement du groupe cardiaque est
significatif par rapport au groupe respiratoire.
42
3.3.2.Variations du BNP.
BNP pg/ml
Comparaison des taux plasmatiques de
BNP
120,00
100,00
80,00
60,00
40,00
20,00
0,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
BNP
Figure 29 : Comparaison des taux plasmatiques de BNP en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
BNP pg/ml
témoins
40,90 +/- 5,98
IC I/III
10,04 +/- 2,38
IC II/III
56,07 +/- 50,98
IC III/III
34,87 +/- 17,45
Tableau XIX : Valeurs des dosages de BNP en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
Les concentrations moyennes brutes de BNP varient entre 10,04 +/- 2,38 (IC I/III) et
56,07 +/- 50,98 pg/ml (IC II/III) (tableau XIX). Il existe une très grande variabilité de
résultats notamment pour les stades II et III. Une différence significative existe entre les lots
témoins et IC I/III (figure 29).
43
BNP pg/ml
Comparaison des taux plasmatiques de
BNP
70,00
60,00
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
Asymptomatiques
Symptomatiques d'origine
cardiaque
Symptomatiques d'origine
respiratoire
BNP
Figure 30 : Comparaison des taux plasmatiques de BNP en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
BNP pg/ml
Asymptomatiques
25,47 +/- 5,97
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
41,93 +/- 18,86
22,95 +/- 3,59
Tableau XX : Valeurs des dosages de BNP en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Les résultats des dosages moyens de BNP, varient entre 22,95 +/- 3,59 (groupe
respiratoire) et 41,93 +/- 18,86 pg/ml (groupe cardiaque) (tableau XX). Il existe une marge
d’erreur importante pour le groupe cardiaque. Il n’existe pas de différence significative entre
les groupes (figure 30).
44
3.3.3.Variations d’Et-1.
Comparaison des taux plasmatiques
d'ET-1
Et-1 pg/ml
5,00
4,00
Témoins
IC I/III
IC II/III
IC III/III
3,00
2,00
1,00
0,00
Et-1
Figure 31 : Comparaison des taux plasmatiques d’Et-1 en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
Et-1 pg/ml
témoins
1,62 +/- 0,25
IC I/III
1,46 +/- 0,13
IC II/III
2,82 +/- 0,39
IC III/III
3,54 +/- 0,58
Tableau XXI : Valeurs des dosages d’Et-1 en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
Les concentrations moyennes d’Et-1 augmentent avec le stade d’insuffisance
cardiaque (figure 31). Elles varient entre 1,46 +/- 0,13 et 3,54 +/- 0,58 pg/ml (tableau XXI). Il
existe une différence significative entre le lot témoin et les IC II/III. Il en est de même entre
les témoins et les IC III/III, les IC I/III et les IC II/III, les IC I/III et les IC III/III.
45
Comparaison des taux plasmatiques d'Et-1
4,00
3,50
Et-1 pg/ml
3,00
Asymptomatiques
2,50
Symptomatiques
d'origine cardiaque
2,00
1,50
Symptomatiques
d'origine respiratoire
1,00
0,50
0,00
Et-1
Figure 32 : Comparaison des taux plasmatiques d’Et-1 en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
Et-1 pg/ml
Asymptomatiques
1,54 +/- 0,13
Symptomatiques d'origine cardiaque Symptomatiques d'origine respiratoire
3,25 +/- 0.,38
1,80 +/- 0,13
Tableau XXII : Valeurs des dosages d’Et-1 en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
Les résultats des dosages moyens d’endothéline 1 des différents groupes étudiés
varient, en concentration moyenne brute, entre 1,54 +/- 0,13 pg/ml (groupe asymptomatique)
et 3,25 +/- 0,38 pg/ml (groupe cardiaque) (tableau XXII). La figure 32 montre des valeurs
moyennes supérieures chez les symptomatiques d’origine cardiaque (IC II/III et IC III/III), par
rapport aux asymptomatiques et symptomatiques d’origine respiratoire. Il existe une
différence significative entre les asymptomatiques et les symptomatiques d’origine cardiaque
ainsi qu’entre les symptomatiques d’origine respiratoire et les cardiaques symptomatiques.
46
4.
DISCUSSION.
L’objet de cette étude était d’obtenir une distinction entre insuffisance cardiaque et
insuffisance respiratoire et de grader l’insuffisance cardiaque à partir du dosage plasmatique
du N-ter proANP, du BNP et d’Et-1.
4.1. Animaux indemnes d’autres entités pathologiques.
L’exclusion d’autres entités pathologiques potentiellement responsables d’une
modification des quantités circulantes plasmatiques de N-ter proANP, de BNP et d’Et-1
constitue un objectif essentiel pour permettre la constitution de lots homogènes.
Chez le chien, le taux de N-ter proANP augmente lors d’insuffisance rénale et diminue
lors de syndrome de Cushing (53). Dans un modèle expérimental d’hyperglycémie, chez le
rat, la concentration plasmatique d’ANP augmente (25); ce qui laisse supposer une probable
variation du N-ter proANP lors de diabète chez le rat.
Le taux de BNP plasmatique augmente lors d’insuffisance rénale chronique et
d’hypertension artérielle chez l’homme (23).
La
concentration
sanguine
d’Et-1
augmente
lors
d’hypertension
artérielle
expérimentale chez le rat (41).
L’hypertension artérielle est majoritairement secondaire chez le chien. Les affections
rénales et endocriniennes en sont les causes principales. Ainsi l’insuffisance rénale, le
syndrome de Cushing et le diabète sont fréquemment associés à une augmentation de la
pression artérielle.
Un examen clinique approfondi, associé à un examen biochimique sanguin ( urée,
créatinine, SGPT, PAL, glucose, protéines totales) ont permis d’exclure, avec une bonne
sensibilité, les animaux insuffisants rénaux, diabétiques ou atteints d’un syndrome de Cushing
(90% d’augmentation des PAL dans ce cas).
47
L’ensemble des chiens de cette étude sont globalement comparables car il existe peu
de différence significative concernant leurs profils biochimiques et échocardiographiques.
Toutefois certaines variations entre ces lots doivent être soulignées.
Les chiens présentant une décompensation cardiaque sont plus âgés.
Chez le chien, l’insuffisance cardiaque connaît un mode d’évolution lent qui aboutit à
une phase de décompensation tardive. Parmi les cardiopathies acquises, l’endocardiose
mitrale est l’affection la plus couramment rencontrée chez le chien. Elle constitue l’affection
la plus souvent retrouvée dans notre étude. A l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort, une
étude sur 110 chiens atteints de cette valvulopathie (pas de distinction de race) a démontré
une sur-représentation des individus âgés (nette prédominance des individus de plus de 9
ans)(35).
Il existe, au cours de l’insuffisance cardiaque, une augmentation associée du taux
d’urée plasmatique résultant d’une baisse de débit au niveau rénal. Dans cette étude, cette
augmentation a été retrouvée puisque la concentration d’urée est significativement plus élevée
dans le groupe des chiens présentant des symptômes d’origine cardiaque. Dans cette situation,
la concentration plasmatique de créatinine reste inchangée.
4.2. Chiens non traités : une grande originalité.
Vasodilatateurs mixtes, diurétiques et digitaliques sont fréquemment utilisés en
cardiologie vétérinaire. L’administration de spironolactone durant quatre mois entraîne une
diminution de la concentration plasmatique de BNP (50) chez l’homme. Au contraire, la
digoxine provoque une augmentation du taux de BNP plasmatique (24). Cette même étude
précise une augmentation du taux d’ANP, ce qui laisse supposer une probable augmentation
du taux de N-ter proANP. A notre connaissance, toutes les études évaluant les taux circulants
de peptides natriurétiques ou d’endothéline lors d’insuffisance cardiaque, ont été effectuées
sur des lots hétérogènes (coexistence de patients traités et non traités au sein des mêmes lots,
diversité des traitements administrés).
48
Notre étude s’est intéressée, exclusivement, à des animaux non traités. Ceci représente
une première en médecine humaine comme vétérinaire, expliquant probablement
partiellement les faibles écarts types enregistrés pour certains marqueurs.
Toutefois, cette originalité représente, également, une limite puisqu’elle a contraint le
nombre d’animaux à être plus faible. En effet, la mise en place d’un traitement est souvent
précoce en cardiologie vétérinaire et il est rare d’avoir à faire face à un patient présentant une
décompensation cardiaque non traitée.
Malgré cette limite, le nombre d’animaux en stade II et III est de 10, une situation
comparable à celles d’autres études effectuées sur des lots hétérogènes quant à leur traitement
(3).
4.3. Paramètres échocardiographiques discriminants : une classification valide.
Les cardiopathies acquises les plus fréquemment rencontrées en médecine vétérinaire
sont les atteintes valvulaires atrio-ventriculaires et les atteintes myocardiques. Notre étude
regoupe une majorité d’endocardioses mitrales.
Le paramètre AG/Ao est significativement discriminant entre les insuffisants
respiratoires et les insuffisants cardiaques symptomatiques. La taille de l’atrium gauche ainsi
que celle de l’aorte dépendent directement du poids du chien. Toutefois, ce rapport reste
proche de 1 chez un chien sain. Lorsque l’atrium gauche tend à se dilater, ce rapport
augmente ; c’est le cas lors d’endocardiose mitrale ou lors de cardiomyopathie dilatée (CMD).
Cette discrimination entre animaux atteints d’insuffisance cardiaque et les autres
groupes n’est donc pas surprenante et valide notre classification.
Le reflux mitral est le signe doppler de l’insuffisance mitrale. Ce paramètre est
discriminant pour notre étude. L’épaississement valvulaire, lors d’endocardiose mitrale,
entraîne une mauvaise coaptation des valvules. Il en résulte un reflux de sang depuis la cavité
ventriculaire gauche vers l’atrium gauche. Un reflux mitral est également observé lors de
CMD. Lors de dilatation diastolique importante, la distension secondaire de l’anneau
valvulaire entraîne fréquemment une insuffisance mitrale.
49
En revanche, la fraction de raccourcissement (FR), n’est pas un paramètre
discriminant pour notre étude. Une étude portant sur 110 chiens atteints d’endocardiose
mitrale a montré qu’il n’existait aucune corrélation entre la FR et le stade de la valvulopathie
(35). Le caractère prédominant des cas d’endocardiose au sein de cette étude explique qu’un
résultat analogue soit retrouvé. La seconde cardiopathie représentée, la CMD, est elle aussi
caractérisée par une faible capacité pronostique des FR enregistrées sur les individus atteints
par cette affection (48)(32).
4.4. N-ter proANP et Et-1 : marqueurs de l’insuffisance cardiaque.
Les résultats obtenus avec le BNP s’accompagnent d’écarts-types trop importants pour
grader les stades d’insuffisance cardiaque ou déterminer l’origine des symptômes
respiratoires. Il existe depuis peu une trousse de réactifs spécifique chez le chien pour le BNP.
Nous pensons que la variabilité des résultats obtenus provient de la non spécificité de la
trousse diagnostique utilisée dans cette étude (spécificité humaine). Il semble nécessaire de
reconduire de nouvelles études utilisant, cette fois, une trousse de réactifs spécifique au chien.
Le dosage du N-ter proANP et Et-1 permet de grader les stades d’insuffisance
cardiaque chez le chien. Ces résultats confirment les résultats publiés chez l’homme et
l’animal.
Chez l’homme, le N-ter proANP augmente avec le stade d’insuffisance cardiaque.
C’est un facteur diagnostic et pronostic. Chez le Cavalier King Charles, le N-ter proANP
augmente avec le stade d’insuffisance cardiaque et sa concentration plasmatique est 3 à 7 fois
plus importante chez le chien présentant des signes de décompensation par rapport au chien
normal (16). Cette étude confirme ce résultat sur un panel de races canines beaucoup plus
étendu.
L’endothéline est sécrétée par l’endothélium vasculaire. Chez l’homme, au cours de
l’insuffisance cardiaque, on peut observer une augmentation de sa concentration plasmatique.
Le taux d’endothéline est particulièrement élevé chez les patients humains insuffisants
50
cardiaques en stade III et IV de la classification NYHA (55) (correspondant à nos stades II et
III). Le peptide est un marqueur de la sévérité de l’insuffisance cardiaque. En médecine
humaine, l’endothéline est avant tout un facteur pronostique fiable lors d’insuffisance
cardiaque avancée. La circulation de ce peptide est augmentée après un infarctus du
myocarde. Il représente alors un facteur associé au risque de mortalité (49). Une étude
incluant 120 patients atteints de cardiomyopathie ischémique ou non ischémique a révélée le
fort pouvoir pronostique du peptide. Chez les patients possédant un taux d’Et-1 supérieur à 5
pg.ml-1, le taux de mortalité est plus important (36).
Chez le chien, dans un modèle d’ischémie myocardique induit, le taux d’Et-1
augmente significativement (6). Sa concentration plasmatique double lors de pacing
ventriculaire (44).
Notre étude constitue la première étude évaluant le taux d’Et-1 chez le chien atteint
d’insuffisance cardiaque spontanée. Elle montre que l’endothéline constitue un très bon
marqueur de l’insuffisance cardiaque. Son taux est particulièrement augmenté dans les stades
évolués.
Outre l’intérêt de permettre une gradation de l’insuffisance cardiaque chez le chien,
l’endothéline-1 permet clairement une distinction significative des chiens atteints de
symptômes d’origine cardiaque et des chiens atteints de symptômes d’origine respiratoire sur
des animaux non traités et ne présentant aucun signe Doppler d’HTAP. En effet, dans le
groupe respiratoire, il existe un seul chien avec un reflux tricuspidien et son taux plasmatique
propre d’Et-1 de 1,63 pg/ml est moins élevée que la moyenne du groupe. Elle s’impose donc
comme un nouvel outil diagnostique particulièrement utile en médecine vétérinaire.
L’endothéline-1 et le N-ter proANP, se présentent donc, désormais, comme des
marqueurs fiables de l’insuffisance cardiaque chez le chien. Il est probable que ces nouveaux
outils diagnostiques puissent, à l’avenir, s’associer aux méthodes traditionnelles d’imagerie
médicale de plus en plus largement utilisées en cardiologie vétérinaire. Ces résultats
encourageants doivent, toutefois, motiver des études supplémentaires afin d’être confirmés
sur un nombre plus important d’animaux. Le suivi de leur variation au cours du traitement de
l’insuffisance cardiaque constitue également un enjeu de taille.
51
CONCLUSION
La détermination de l’origine cardiaque des manifestations respiratoires chez le chien
est un enjeu majeur en médecine vétérinaire. En effet certaines maladies cardiaques comme
l’endocardiose mitrale ou les cardiomyopathies dilatées peuvent avoir une expression clinique
identique à celle d’une maladie respiratoire. De plus il n’est pas rare d’observer une atteinte
associée des voies respiratoires et du cœur rendant la tâche du praticien d’autant plus difficile.
Les progrès réalisés en matière d’examens complémentaires en cardiologie,
notamment en échocardiographie et Doppler, offrent au praticien un diagnostic de précision
lui permettant de distinguer l’origine des symptômes respiratoires de son patient. Toutefois, la
non disponibilité de ce type d’examen, son coût parfois prohibitif pour le propriétaire et sa
technicité rendent l’utilisation de cette application peu fréquente en routine. De ce fait, la
recherche de nouveaux outils diagnostiques de l’insuffisance cardiaque est nécessaire.
L’objectif de cette étude était d’évaluer le N-ter proANP, le BNP et l’Et-1 comme
marqueurs de l’insuffisance cardiaque. Permettent-ils d’établir la gradation de l’insuffisance
cardiaque ? Permettent-ils de distinguer l’origine de ses manifestations respiratoires chez le
chien ?
Trente trois chiens sans distinction d’âge, de sexe ni de race ont été inclus dans cette
étude. L’ensemble des animaux sont indemnes d’entités pathologiques autres que cardiaque
et/ou respiratoire. Des lots ont été constitués après examen clinique, radiographie de face et de
profil du thorax, échocardiographie Doppler et un examen biochimique, selon la classification
proposée par le conseil international de cardiologie des animaux de compagnie (International
Small Animal Cardiac Health Council) (IC I/III, IC II/III et IC III/III). Puis ces lots ont été
regroupés de manière homogène en fonction de l’absence ou de l’existence de manifestations
respiratoires : le groupe asymptomatique (témoins et IC I/III) et le groupe symptomatique
d’origine cardiaque (IC II/III et IC III/III). Un groupe symptomatique d’origine respiratoire a
également été constitué, intégrant des chiens insuffisants respiratoires sans signe
d’hypertension artérielle pulmonaire (HTAP). Un dosage plasmatique du N-ter proANP, du
52
BNP et d’Et-1 a été réalisé. Un test t de Student a permis d’identifier d’éventuelles
différences. Celles-ci ont été jugées significatives pour p<0,05.
Les résultats du dosage plasmatique du N-ter proANP en pg/mL sont : 71,20 +/- 17,93
(témoins), 68,80 +/- 19,55 (IC I/III), 124,25 +/- 53,47 (IC II/III), 123,50 +/- 20,93 (IC III/III),
70,00 +/- 12,51 (Asymptomatiques), 123,80 +/- 22,96 (Symptomatiques d'origine cardiaque),
65,92 +/- 5,15 (Symptomatiques d'origine respiratoire). Pour le BNP en pg/mL : 40,90 +/5,98 (témoins), 10,04 +/- 2,38 (IC I/III), 56,07 +/- 50,98 (IC II/III), 34,87 +/- 17,45 (IC
III/III), 25,47 +/- 5,97 (Asymptomatiques), 41,93 +/- 18,86 (Symptomatiques d'origine
cardiaque), 22,95 +/- 3,59 (Symptomatiques d'origine respiratoire). Pour Et-1 en pg/mL : 1,62
+/- 0,25 (témoins), 1,46 +/- 0,13 (IC I/III), 2,82 +/- 0,39 (IC II/III), 3,54 +/- 0,58 (IC III/III),
1,54 +/- 0,13 (Asymptomatiques), 3,25 +/- 0.,38 (Symptomatiques d'origine cardiaque), 1,80
+/- 0,13 (Symptomatiques d'origine respiratoire).
Les résultats des dosages du BNP s’accompagnent d’écarts types très importants et ne
conduisent pas à des différences significatives entre lots ou groupes. En revanche, l’Et-1 et le
N-ter proANP se présentent comme des marqueurs fiables de l’insuffisance cardiaque chez le
chien non traité permettant, notamment, de distinguer les insuffisants cardiaques et les
insuffisants respiratoires (sans HTAP).
53
LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Biogenèse du N-ter proANP
3
Figure 2 : Structure du BNP humain.
5
Figure 3 : Structure de l’endothéline Et-1.
8
Figure 4 : Représentation schématique de la maturation du préproEt-1 en Et-1.
9
Figure 5 : Comparaison de l’âge des animaux en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
19
Figure 6 : Comparaison de l’âge des animaux en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
20
Figure 7 : Comparaison des taux plasmatiques d’urée en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
21
Figure 8 : Comparaison des taux plasmatiques de créatinine en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
21
Figure 9 : Comparaison des taux plasmatiques d’ALT et de PAL en fonction du
stade d’insuffisance cardiaque.
22
Figure 10 : Comparaison des taux plasmatiques de protéines totales en fonction
du stade d’insuffisance cardiaque.
22
Figure 11 : Comparaison des glycémies en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
23
Figure 12 : Comparaison des taux plasmatiques d’urée en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
24
54
Figure 13 : Comparaison des taux plasmatiques de créatinine en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
24
Figure 14 : Comparaison des taux plasmatiques des protéines totales en fonction
de l’origine des symptômes respiratoires.
25
Figure 15 : Comparaison des glycémies en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
26
Figure 16 : Comparaison des taux plasmatiques d’ALT et de PAL en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
27
Figure 17 : Comparaison des diamètres de l’aorte et de l’atrium gauche en
fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
28
Figure 18 : Comparaison du rapport du diamètre atrial gauche et aortique en
fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
28
Figure 19 : Comparaison des paramètres échocardiographiques septaux et
ventriculaires en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
29
Figure 20 : Comparaison des paramètres Doppler en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
30
Figure 21 : Comparaison du reflux mitral en fonction stade d’insuffisance
cardiaque.
31
Figure 22 : Comparaison des diamètres de l’aorte et de l’atrium gauche en
fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
32
Figure 23 : Comparaison du rapport du diamètre atrial gauche et aortique en
fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
33
55
Figure 24 : Comparaison des paramètres échocardiographiques septaux et
ventriculaires en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
34
Figure 25 : Comparaison des paramètres Doppler en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
35
Figure 26 : Comparaison du reflux mitral en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
36
Figure 27 : Comparaison des taux plasmatiques de N-ter proANP en fonction du
stade d’insuffisance cardiaque.
37
Figure 28 : Comparaison des taux plasmatiques de N-ter proANP en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
38
Figure 29 : Comparaison des taux plasmatiques de BNP en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
39
Figure 30 : Comparaison des taux plasmatiques de BNP en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
40
Figure 31 : Comparaison des taux plasmatiques d’Et-1 en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
41
Figure 32 : Comparaison des taux plasmatiques d’Et-1 en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
42
56
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : Caractéristiques synthétiques du protocole d’étude.
14
Tableau II : Age des animaux en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
19
Tableau III : Age des animaux en fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
20
Tableau IV : Valeurs des dosages plasmatiques d’urée, de créatinine, d’ALT, de
PAL, de protéines totales et de glucose en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
23
Tableau V : Valeurs des dosages d’urée et de créatinine en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
24
Tableau VI : Valeurs des dosages des protéines totales en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
25
Tableau VII : Valeurs de la glycémie en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
26
Tableau VIII : Valeurs des dosages d’ALT et de PAL en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
27
Tableau IX : Valeurs du diamètre aortique, du diamètre atrial gauche, et du
rapport AG/Ao en fonction du stade d’insuffisance cardiaque.
29
Tableau X : Valeurs échocardiographiques en mode TM et Doppler en fonction
du stade d’insuffisance cardiaque.
30
Tableau XI : Valeurs du reflux mitral en fonction stade d’insuffisance cardiaque.
31
57
Tableau XII : Valeurs des diamètres aortique et atrial gauche en fonction de
l’origine des symptômes respiratoires.
32
Tableau XIII : Valeurs du rapport AG/Ao en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
33
Tableau XIV : Valeurs des paramètres échocardiographiques en mode TM en
fonction de l’origine des symptômes respiratoires.
34
Tableau XV : Valeurs des paramètres Doppler en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
35
Tableau XVI : Valeurs du reflux mitral en fonction de l’origine des symptômes
respiratoires.
36
Tableau XVII : Valeurs des dosages de N-ter proANP en fonction du stade
d’insuffisance cardiaque.
37
Tableau XVIII : Valeurs des dosages de N-ter proANP en fonction de l’origine
des symptômes respiratoires.
38
Tableau XIX : Valeurs des dosages de BNP en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
39
Tableau XX : Valeurs des dosages de BNP en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
40
Tableau XXI : Valeurs des dosages d’Et-1 en fonction du stade d’insuffisance
cardiaque.
41
Tableau XXII : Valeurs des dosages d’Et-1 en fonction de l’origine des
symptômes respiratoires.
42
58
BIBLIOGRAPHIE
(1)
ANDERSSON B., HALL C. : N- terminal proatrial natriuretic peptide and
prognosis in patients with heart failure and preserved systolic function. J. Card. Fail.,
2000, 6(3), 208-13.
(2)
ANDERSSON J.V., CHRISTOFIDES N.D., VINAS P., WHARTON J.,
VARNDELL I.M., POLAK J.M., BLOOM S.R. : Radioimmunoassay of alpha rat
atrial natriuretic peptide. Neuropeptides, 1986, 7(2), 159-73.
(3)
ASANO K., MASUDA K., OKUMURA M., KADOSAWA T., FUJINAGA T.
: Plasma atrial and brain natriuretic peptide levels in dogs with congestive heart
failure. J. Vet. Med. Sci., 1999, 61(5), 523-529.
(4)
AZIZI C., MAISTRE G., KALOTKA H., ISNARD R., BARTHELEMY C.,
MASSON F., PHAM P., POUSSET F., EURIN J., LECHAT P., KOMADJA M ET
CARAYON A. : Plasma levels and molecular forms of proatrial natriuretic peptides in
healthy subjects and in patients with congestive heart failure. J. Endocrinol., 1996,
148, 51-57.
(5)
BAERTSCHI A.J., MONNIER D., SCHMIDT U., LEVITAN E.S., FAKAN
S., ROATTI A. : Acid prohormone sequence determines size, shape, and docking of
secretory vesicles in atrial myocytes. Circ. Res., 2001, 89(3), E23-9.
(6)
BATTISTINI B., KINGMA J.G. : Changes in plasma levels of Et-1 and its
precursor, big Et-1, in the arterial and venous circulation following double myocardial
ischemia-reperfusion injury in dogs. J. Cardiovasc. Pharmacol., 2000, 36(5 suppl. 1),
215-20.
(7)
BUCKLEY M.G., SAGNELLA G.A., MARKANDU N.D., SINGER D.R.,
MACGREGOR G.A. : Immunoreactive N-terminal pro-atrial natriuretic peptide in
human plasma: plasma levels and comparisons with alpha-human atrial natriuretic
peptide in normal subjects, patients with essential hypertension, cardiac transplant and
chronic renal failure. Clin. Sci., 1989, 77(5), 573-9.
(8)
DE BOLD A.J., BORENSTEIN H.B., VERESS A.T. ET SONNENBERG H. :
A rapid and potent natriuretic response to intravenous injection of atrial myocardial
extract in rats. Life Sci., 1981, 28, 89-94.
(9)
DIETZ J.R. : Release of natriuretic factor from rat heart-lung preparation by
atrial distension. Am. J. Physiol., 1984, 247(6 pt 2), R1093-6.
(9 bis)
DUSSAULE J.C., ARDAILLOU R. : Peptides natriurétiques et inhibition de
l’endopeptidase neutre. Encycl. Med. Chir. (Paris, france), Elsevier, EndocrinologieNutrition n° 10353 AIO, 1995.
59
(10)
EDWARDS B.S., ZIMMERMAN R.S., SCHWAB T.R., HEUBLEIN D.M.,
BURNETT J.C. Jr. : Atrial stretch, not pressure, is the principal determinant
controlling the acute release of atrial natriuretic factor. Circ. Res., 1988, 62(2), 191-5.
(11)
FEIGENBAUM H. : Echocardiography. Lea and Febiger, Philadelphia, 1981,
580 pages.
(12) FRIEDL W., MAIR J., THOMAS S., PICHLER M ET PUSCHENDORF B. :
Natriuretic peptides and cyclic guanosine 3’,5’-monophosphate in asymptomatic and
symptomatic left ventricular dysfunction. Heart, 1996, 76, 129-136.
(13) GERBES A.L., VOLLMAR A.M. : Water immersion increases the concentrations of
the immunoreactive N-terminal fragment of proatrial natriuretic factor in human
plasma. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988,156.
(14)
GIAID A., YANAGISAWA M., LANGLEBEN D., MICHEL R.P., LEVY R.,
SHENNIB H., KIMURA S., MASAKI T., DUGUID W.P., PATH F.R.C., STEWARD
D.J. : Expression of endothelin-1 in the lungs of patients with pulmonary
hypertension. N. Engl. J. Med., 1993, 328, 1732-9.
(15)
GREENBERG B.D., BENCEN G.H., SEILHAMER J.J., LEWICKI J.A. ET
FIDDES J.C. : Nucleotid sequence of the gene encoding human atrial natriuretic factor
precursor. Nature, 1984, 312, 656-658.
(16)
HAGGSTROM J., HANSSON K., KVART C., PEDERSEN H.D.,
VUOLTEENAHO O., OLSSON K : Relationship between different natriuretic
peptides and severity of naturally acquired mitral regurgitation in dogs with chronic
myxomatous valve disease. J. Vet. Cardiol., 2000, 2, 7-16.
(17)
HAMMERER-LERCHER A., NEUBAUER E., MULLER S., PACHINGER
O., PUSCHENDORF B., MAIR J. : Head-to-head comparison of N-terminal pro-brain
natriuretic peptide, brain natriuretic peptide and N-terminal pro-atrial natriuretic
peptide in diagnosing left ventricular dysfunction. Clin. Chim. Actua., 2001, 310(2),
193-7.
(18)
HASSAL C.J., WHARTON J., GULBENKIAN S., ANDERSON J.V.,
FRATER J., BAILEY D.J., MERIGHI A., BLOOM S.R., POLAK J.M.,
BURNSTOCKN G. : Ventricular and atrial myocytes of newborn rats synthetise and
secrete atrial natriuretic peptide in culture: light- and electron-microscopical
localisation and chromatographic examination of stored and secreted molecular forms.
Cell Tissue Res., 1988, 251(1), 161-9.
(19)
HITTINGER L., BERTHEZENE F., CASTAIGNE A., DUBOIS-RANDE J.L.,
PLOUIN P.F. : Hormones coeur et vaisseaux. INSERM, Paris, 1997, 440 pages.
(19 bis) HITTINGER L., BERTHEZENE F., CASTAIGNE A., DUBOIS-RANDE J.L.,
PLOUIN P.F. : Hormones, cœur et vaisseaux. INSERM, Paris, 1997, chap. 9, p. 289.
60
(20)
HOLMES S.J., ESPINER E.A., RICHARDS A.M., YANDLE T;G.,
FRAMPTON C. : Renal, endocrine, and hemodynamic effects of human brain
natriuretic peptide in normal man. J. Clin. Endocrinol. Metab., 1993, 76(1), 91-6.
(21)
HUNT P.J., ESPINER E.A., NICHOLLS M.G., RICHARDS A.M., YANDLE
T.G. : Differing biological effects of equimolar atrial and brain natriuretic peptide
infusions in normal man. J. Clin. Endocrinol. Metab., 1996, 81(11), 3871-6.
(22)
ITOH H., NAKAO K., SUGAWARA A., SAITO Y., MUKOYAMA M.,
MORII N., YAMADA T., SCHIOO S., ARAI H., HOSODA K., et al. : Gamma-atrial
natriuretic polypeptide (gamma ANP)-derived peptides in human plasma : cosecretion
of N-terminal gamma ANP fragment and alpha ANP. J. Clin. Endocrinol. Metab.,
1988, 67(3), 429-37.
(23)
JENSEN K.T., CARSTENS J., IVARSEN P., PEDERSEN E.B. : A new, fast
and reliable radioimmunoassay of brain natriuretic peptide in human plasma.
Reference values in healthy subjects and in patients with different diseases. Scand. J.
Clin. Lab. Invest., 1997, 57(6), 529-40.
(24)
KOBUSIAK-PROKOPOWICZ M., SWIDNICKA-SZUSZKOWSKA,
MYSIAK A. : Effect of digoxin on atrial natriuretic peptide (ANP), brain natriuretic
peptide (BNP) and cyclic 3’, 5’-guanosine monophosphate (cGMP) in patients with
chronic congestive heart failure. Pol. Arch. Med. Wew, 2001, 105(6), 475-82.
(25)
KOOK H., LEE J., KIM S.W., BAIK Y.H. : Augmented natriuretic peptideinduced guanylyl cyclase activity and vasodilatation in experimental hyperglycemic
rats. Jpn. J. Pharmacol., 2002, 88(2), 167-73.
(26)
LANGILLE B.L.: Remodeling of developing and mature arteries :
endothelium, smooth muscle, and matrix. J. Cardiovasc. Pharmacol., 1993, 21 (suppl
1), S11-S17.
(27)
MASAKI T., KIMURA S., YANAGISAWA M., GOTS K. : Molecular and
cellular mechanism of endothelin regulation. Circulation, 1991, 80, 219-233.
(28)
McGREGOR A., RICHARDS M., ESPINER E., YANDLE T., IKRAM H. :
Brain natriuretic peptide administreted to man : actions and metabolism. J. Clin.
Endocrinol. Metab., 1990, 70(4), 1103-7.
(29)
MICHENER M.L., GIERSE J.K., SEETHARAM R., FOK K.F., OLINS P.O.,
MAI M.S., NEEDLEMAN P. : Proteolytic processing of atriopeptin prohormone. Mol.
Pharmacol., 1986, 30(6), 552-7.
(30)
MILLER M.S., TILLEY L.P. : Manual of canine and feline cardiology.
Paperback, 1995, 2° édition, 562 p.
(31)
MINAMINO N., KANGAWA K., MATSUO H. : Isolation and identification
of a high molecular weight brain natriuretic peptide in porcine cardiac atrium.
Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 157(1), 402-9.
61
(32)
MONNET E., ORTON E.C., SALMAN M., BONN J. : Idiopathic dilated
cardiomyopathy in dogs : survival and prognostic indicators. J. Vet. Intern. Med.,
1995, 9(1), 12-17.
(33)
MORAILLON R., LEGEAY Y., FOURRIER P., LAPEIRE C. : Dictionnaire
pratique de thérapeutique canine et féline. Masson, Paris, 1995, 3° édition, 526 p.
(34)
NELESEN R.A., DIMSDALE J.E., ZIEGLER M.G. : Plasma atrial natriuretic
peptide is unstable under most storage conditions. Circulation, 1992, 86, 463-466.
(35)
POUCHELON J.L., CHETBOUL V. : Etude de la fraction de raccourcissement
chez 110 chiens insuffisants mitraux par endocardiose. Rec. Med. Vét. 1989, 165(10),
801-806.
(36)
POUSSET F., ISNARD R., LECHAT P., KALOTKA H., CARAYON A.,
MAISTRE G., ESCOLANO S., THOMAS D. ET KOMADJA M. : Prognostic value
of plasma endothelin-1 in patients with chronic heart failure. Eur. Heart J., 1997, 18,
254-258.
(37)
PROTTER A.A., WALLACE A.M., FERRARIS V.A., WEISHAAR R.E. :
Relaxant effect of human brain natriuretic peptide on human artery and vein tissue.
Am. J. Hypertens., 1996, 9, 432-436.
(38)
RICHARDS A.M., CROZIER I.G., HOLMES S.J., ESPINER E.A., YANDLE
T.G., FRAMPTON C. : Brain natriuretic peptide : natriuretic and endocrine effects in
essential hypertension. J. Hypertens., 1993, 11(2), 163-70.
(39)
RUBANYI G.M., POLKOFF M.A. : Endothelins : molecular biology,
biochemistry, pharmacology, physiology, and pathophysiology. Pharmacol. Rev.,
1994, 46, 325-415.
(40)
SEIDMAN C.E., BLOCH K.D., KLEIN K.A., SMITH J.A. ET SEIDMAN
J.G. : Nucleotid sequences of the human and mouse atrial natriuretic factor genes.
Science, 1984, 226, 1206-1209.
(41)
SCHIFFRIN E.L. : Role of endothelin-1 in hypertension and vascular disease.
Am. J. Hypertens., 2001, 14(6 Pt 2), 83-89.
(42)
SUDOH T., KANGAWA K., MINAMIO N., MATSUO H. : A new natriuretic
peptide in porcine brain. Nature, 1988, 332, 78-81.
(43)
SUNDSFJORD J.A., THIBAULT G., LAROCHELLE P., CANTIN M. :
Identification and plasma concentrations of the N-terminal fragment of proatrial
natriuretic factor in man. J. Clin. Endocrinol. Metab., 1988, 66(3), 605-10.
(44)
TADANO K., SUZUKI J., HANADA K., NAKAO M;, UEHARA S., OHTA
H., MIYAUCHI T., NISHIKIBE M. : Pathophysiological roles of endogenous
endothelin-1 in dogs with chronic heart failure produced by rapid right ventricular
pacing. J. Pharmacol. Exp. Ther., 2001, 298(2), 729-36.
62
(45)
TAKEMURA N., KOYAMA H., SAKO T.,ANDO K.,MOTOYOSHI S.,
MARUMO F. : Bovine atrial natriuretic peptide in heart failure. J. Endocrinol., 1990,
124(3), 463-467.
(46)
THIBAULT G., MURTHY K.K., GUTKOWSKA J., SEIDAH N.G.,
LAZURE C., CHRETIEN M., CANTIN M. : NH2-terminal fragment of rat pro-atrial
natriuretic factor in the circulation : identification, radioimmunoassay and half-life.
Peptides, 1988, 9(1), 47-53.
(47)
THIBAULT G., NEMER M., DROUIN J., LAVIGNE J.P., DING. J.,
CHARBONNEAU C., GARCIA R., GENEST J., JASMIN G., SOLE M., et al. :
Ventricles as a major site of atrial natriuretic factor synthesis and release in
cardiomyopathic hamsters with heart failure. Circ. Res., 1989, 65(1), 71-82.
(48)
TIDHOLM A., SVENSSON H., SYLVEN C. : Survival and prognostic
factors in 189 dogs with dilated cardiomyopathy. J. Am. Anim. Hosp. Assoc., 1997, 33,
364-8.
(49)
TOMODA H. : Plasma endothelin-1 in acute myocardial infarction with heart
failure. Am. Heart J., 1993, 125(3), 667-72.
(50)
TSUTAMOTO T., WADA A., MAEDA K., MABUCHI N., HAYASHI M.,
TSUTSUI T., OHNISHI M., SAWAKI M., FUJII M., MATSUMOTO T., MATSUI
T., KINOSHITA M. : Effect of spironolactone on plasma brain natriuretic peptide and
left ventricular remodeling in patients with congestive heart failure. J. Am. Coll.
Cardiol., 2001, 37(5), 1228-33.
(51)
VAN DER ZANDER K., HOUBEN A.J., KROON A.A., DE LEEUW P.W. :
Effects of brain natriuretic peptide on forearm vasculature : comparison with atrial
natriuretic peptide. Cardiovasc. Res., 1999, 44(3), 595-600.
(52)
VESELY D.L.,NORSK P., WINTERS C.J., RICO D.M., SALLMAN A.L.,
EPSTEIN M. : Increased release of the N-terminl and C-terminal portions of the
prohormone of atrial natriuretic factor during immersion induced central hypervolemia
in normal humans. Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1989, 192(3), 230-5.
(53)
VOLLMAR A.M., REUSCH C., KRAFT W., SCHULZ R. : Immunoreactive
N-terminal fragment of proatrial natriuretic peptide , ANP (1-98), in plasma of healthy
dogs and dogs with impaired volume regulation: a comparison with the C-terminal
ANP (99-126). Res. Vet. Sci., 1991, 50(3), 264-268.
(54)
WANG X., OHNISHI M., WADA A., TSUTAMOTO T., SAWAKI M., FUJII
M., MATSUMOTO T., YAMAMOTO T., KUROKAWA K., YAMADA H.,
KINOSHITA M. : Endothelin-1 promotes vascular structural remodeling during the
progression of heart failure prevention of vascular remodeling using a specific
endothelin-converting enzyme inhibitor. Life Sci. 2001, 69(21), 2477-88.
63
(55)
WEI C.M., LERMAN A., RODEHEFFER R.J., MCGREGOR C.G., BRANDT
R.R., WRIGHT S., HEUBLEIN D.M., KAO P.C., EDWARDS W.D., BURNETT J.C.
JR. : Endothelin in human congestive heart failure. Circulation, 1994, 89(4), 1580-6.
(56)
WEIR M.L., HONRATH U., FLYNN T. G., SONNENBERG H. : Lack of
biologic activity or specific binding of amino-terminal pro-ANP segments in the rat.
Regul. Pept. 1994, 53(2), 111-22.
(57)
WHARTON J., ANDERSON R.H., SPRINGALL D., POWER R.F., ROSE
M., SMITH A., ESPEJO R., KHAGHANI A., WALLWORK., YACOUB M.H., ET
AL. : Localisation of atrial natriuretic peptide immunoreactivity in the ventricular
myocardium and conduction system of the human fetal and adult heart. Br. Heart J.,
1988, 60(4), 267-74.
(58)
WINTERS C.J., SALLMAN A.L., BAKER B;J;, MEADOWS J., RICO D.M.,
VESELY D.L.: The N-terminus and a 4,000-MW peptide from the midportion of the
N-terminus of the atrial natriuretic factor prohormone each circulate in humans and
increase in congestive jeart failure. Circulation, 1989, 80(3), 438-49.
(59)
YAMAMOTO K., BURNETT J.C. JR, JOUGASAKI M., NISHIMURA R.A.,
BAILEY K.R., SAITO Y., NAKAO K. ET REDFIELD M.M. : Superiority of brain
natriuretic peptide as a hormonal marker of ventricular systolic and diastolic
dysfunction and ventricular hypertrophy. Hypertension, 1996, 28, 988-994.
(60)
YOSHIBAYASHI M., KAMIYA T., SAITO Y., NAKAO K., NISHIOKA K.,
TEMMA S., ITOH H., SHIRAKAMI G., MATSUO H. : Plasma brain natriuretic
peptide concentrations in healthy children from birth to adolescence: marked and rapid
increase after birth. Eur. J. Endocrinol., 1995, 133(2), 207-9.
(61)
ZELLER R., BLOCH K.D., WILLIAMS B.S, ARCECI R.J. ET SEIDMAN
C.E. : Localized expression of the atrial natriuretic factor gene during cardiac
embryogenesis. Genes Dev., 1987, 1, 693-698.
(62)
ZELLNER C, PROTTER A.A., KO E., POTHIREDDY M.R., DEMARCO T.,
HUTCHISON S.J., CHOU T.M., CHATTERJEE K., SUDHIR K. : Coronary
vasodilator efects of BNP : mechanisms of action in coronary conductance and
resistance arteries. Am. J. Physiol., 1999, 276(3), 1049-1057.
64