Cytologie, histopathologie labor team w ag 341 Cytologie Cytologie gynécologique Frottis gynécologique conventionnel selon Papanicolaou (PAP) Il est nécessaire de prélever du matériel de l’exocol et de l’endocol. Préalable à un diagnostic fiable : la mise en évidence de cellules endocervicales ou de cellules de la zone de transformation. Sinon le matériel n’est pas représentatif. N’utiliser qu’une lame porte-objet à bande mate. N’écrire qu’avec un crayon noir (seule inscription qui ne disparaisse pas lors de la coloration). Les lames porte-objet qui ne comportent pas d’inscriptions suffisantes ne peuvent être utilisées pour des raisons de sécurité. Technique d’étalement: étaler le matériel sur la longueur de la lame porte-objets, ne pas répartir de façon circulaire car les cellules risquent d’être endommagées. Fixation au cytospray: fixer le frottis au cytospray, si possible en une seconde, en vaporisant à 20 cm de distance. Agiter le vaporisateur avant de l’utiliser et vérifier son fonctionnement. Utiliser suffisamment de cytospray pour un matériel très humide ou contenant du sang. Laisser sécher dix minutes avant d’expédier. Fixation à l’alcool à 96%: mettre la lame porte-objet dans la cuvette et fixer 20 minutes. Laisser sécher dix minutes avant d’expédier. Exemple d’une préparation de bonne qualité: Muster Rosa 1956 Prélèvement pancervical La spatule est introduite dans le canal du col de l’utérus de telle sorte que le côté latéral repose sur l’exocol. Ensuite tourner la spatule en grattant l’exocol, la zone de transformation et l’endocol. Etaler le matériel prélevé sur la lame porte-objet et fixer aussitôt au cytospray. Ce prélèvement pancervical permet d’obtenir du matériel de la lumière endocervicale, de la zone de transformation et du col extérieur. Prélèvement endocervical au cytobrush (oribrush) Cette méthode permet d’obtenir des cellules de l’endocol et de la zone de transformation avec une précision nettement meilleure. Meilleur diagnostic des néoplasies et des infections. Introduire doucement le cytobrush dans l’endocol et opérer lentement une rotation de ¼ à ½ dans une direction. Après le prélèvement étaler le cytobrush sur la lame porte-objet avec un mouvement de rotation. Fixer aussitôt au cytospray. Laisser sécher 10 minutes avant d’expédier. rotation ¼ - ½ Prélèvement endocervical au cervexbrush Introduire doucement dans l’endocol et le tourner cinq fois dans le sens des aiguilles d’une montre. Pour le reste de l’opération voir cytobrush (oribrush). 5x Prélèvement (étalement en couche mince) Indications générales Comme pour le frottis conventionnel une analyse cytologique fiable doit disposer d’un matériel de prélèvement issu de l’exocol et de l’endocol. Cytologie, histopathologie labor team w ag 342 L’échantillon est représentatif, lorsque des cellules endocervicales et/ou des cellules de la zone de transformation sont présentes. Avantages de la méthode La préparation microscopique est faite au laboratoire – la manipulation n’a donc pas lieu au cabinet médical. Microscopie: une couche mince à la place de plusieurs couches, qui rendent l’interprétation plus difficile. Possibilité de reproduire plusieurs fois les préparations. Cette préparation permet d’éviter le matériel qui gênerait l’analyse (sang ou mucosités). Une typisation HPV est possible sur le même matériel cellulaire, un frottis supplémentaire n’est pas nécessaire. Prélèvement pancervical Seulement avec une brosse spéciale. Ne pas utiliser de bâton d’ouate pour cette méthode. Procédure à suivre après le prélèvement Indiquer les coordonnées du patient et le lieu du prélèvement sur le récipient. Casser la tête de la brosse et la mettre dans le milieu liquide. Eviter tout contact avec la peau ou le talc des gants. Bien refermer le récipient et agiter fortement. Ajouter le formulaire de demande, emballer et expédier. Cytologie clinique Ponctions avec une aiguille fine Seins, ganglions lymphatiques, thyroïde, glandes salivaires, œil etc. Indications cliniques importantes Localisation exacte (en particulier pour les organes en paire , indiquer le côté) Taille en centimètres Consistance Durée de l’évolution Indications relatives aux procédés d’imagerie (ultrasons, mammographie, radios) Ponctions de ganglions lymphatiques Faire toujours un frottis fixé Si possible faire un autre frottis non fixé et séché à l’air. Technique de prélèvement ( 1-15) 1. Utiliser des aiguilles d’un diamètre extérieur de 0,45 mm à 0,6 mm 2. Désinfecter la peau 3. Saisir la tumeur avec les doigts 4. Ponctionner rapidement 5. Aspirer et créer ainsi un vide Déplacer l’aiguille fixée dans la tumeur de façon à obtenir un cône 6. Avant de retirer l’aiguille, relâcher le piston comme indiqué 7. Ne pas aspirer pendant que l’aiguille est retirée sinon du matériel cellulaire pénètre dans la seringue (difficile de récupérer les cellules) 8. Enlever l’aiguille de la seringue 9. Tirer le piston vers le haut 10. Remettre l’aiguille sur la seringue Cytologie, histopathologie labor team w ag 343 11. Pousser lentement le piston et déposer le contenu de la seringue juste en dessous de la bande mate de la lame porte-objet. 12. Poser une deuxième lame porte-objet propre avec un angle de 90° sur le matériel cellulaire et la faire passer précautionneusement, rapidement et en exerçant une pression régulière sur la première lame porte-objet. Ne pas appuyer. 13. Fixation immédiatement après la préparation en mettant le porteobjet dans une cuvette contenant de l’alcool à 96%. 14. Fixer vingt minutes. 15. Prendre ensuite les préparations et fixer au cytospray. Cette fixation double est importante car l’alcool empêche l’agglutination des cellules et la fixation au cytospray permet d’éviter le dessèchement. Les frottis sont prêts à être expédiés. Sécrétion mammaire Prélèvement de matériel et fixation Presser le mamelon avec le pouce et les autres doigts Aussitôt qu’une sécrétion apparaît, poser la lame porte-objet contre le mamelon et répartir la sécrétion latéralement Faire deux préparations s’il y a suffisamment de sécrétion Fixer immédiatement dans la cuvette à l’alcool à 96% Liquides de ponction (par exemple liquides articulaires) Epanchements (ascite, pleurésie) Données cliniques importantes localisation exacte Interrogatoire clinique Suspicion de tumeur Diagnostics connus et traitements etc. Prélèvement: Si possible prélever une quantité suffisante, pour les cavités corporelles jusqu’à un litre Envoyer le matériel natif, sans anticoagulants, sans fixation Ne pas faire d’envoi pendant le week-end (risque de croissance bactérienne, dégénération cellulaire) – s’il n’y pas d’autre possibilité, mettre le matériel au réfrigérateur et envoyer par express Voies urinaires Urine: Envoyer la deuxième urine matinale (au milieu du jet) sans additif. La première urine n’est pas appropriée car elle contient des cellules dégénérées après le repos nocturne. L’urine collectée au cours d’une journée ne convient pas non plus pour les analyses cytologiques. Lavage de la vessie Optimal: obtention de matériel par lavage 1: introduire le cathéter – vider la vessie – instillation et aspiration de solution salée stérile au moyen d’une grande seringue Ce premier lavage élimine impuretés, bactéries et cellules déjà desquamées ; il est à jeter 2: procéder de la même façon avec une solution physiologique salée et stérile – instiller environ 10 fois le liquide et aspirer à nouveau Envoyer immédiatement Cytologie, histopathologie labor team w ag 344 Voies respiratoires Données cliniques importantes Symptômes Tabagisme Interrogatoire clinique Résultats thorax etc. Analyse de crachat: Analyse indiquée dans le cas de: Symptômes pouvant être le signe d’une tumeur: toux, expectoration, toux accompagnée de sang, détresse respiratoire, faiblesse soudaine Résultat radiologique avec suspicion de tumeur ( même si d’autres symptômes manquent) Pneumonies ou affections fìévreuses pouvant accompagner une tumeur maligne Chez les fumeurs de plus de 40 ans avec ou sans toux chronique Chez les patients de plus de 35 ans exposés à des inhalations de produits toxiques Prélèvement Envoyer un crachat et non pas de la salive Pratiquer l’analyse trois jours de suite (en général, les cellules malignes ne sont pas trouvés tout de suite dans le premier crachat) Prendre de préférence le crachat le matin. À jeun, rincer la bouche et la gorge (gargarisme) Ensuite tousser pour obtenir une expectoration Si nécessaire, déclencher le crachat par inhalation; le choix de l’aérosol est secondaire (mucolytiques, solution d’eau salée hypertonique ou vapeur d’eau. Chez les patients asthmatiques, il est recommandé d’administrer des dilatateurs de bronches ou de tapoter la partie du thorax affectée afin de détacher la sécrétion bronchique Bronchoscopie: Frottis de sécrétion bronchique: Bonne méthode de déclenchement. Préparation de tampons pour les tumeurs bronchiques centrales (seulement possible avec cette méthode). Faire le frottis immédiatement avec le tampon de plastique ou d’ouate. Fixer tout de suite pour la coloration de Papanicolaou. Brosse bronchique: Biopsie après injection du produit de contraste par le cathéter sous contrôle scopique Une brosse fine de nylon est introduite dans les bronches sous contrôle scopique. Passer la brosse rapidement sur deux lames porte-objet avec un mouvement de rotation. Fixer immédiatement dans la cuvette à l’alcool à 96%. La brosse peut aussi être rincée dans un tube à centrifugation avec 2 ml de solution physiologique salée Envoyer immédiatement Lavage bronchique: Envoyer immédiatement le matériel dans la solution physiologique Aspiration bronchique: Mettre le matériel bronchique dans la solution salée physiologique («avant» et «après» le prélèvement à brosse) Liquide céphalorachidien A noter Analyse cytologique - qualitative, pas d’indication quantitative relative au nombre de cellules Expédier rapidement au laboratoire le matériel prélevé réfrigéré Prévenir le laboratoire par téléphone Œil Frottis: gratter la lésion avec une petite spatule de platine sous anesthésie locale Déposer sur au moins deux lames porte-objet Éviter le dessèchement du matériel : tenir la lame porte-objet à l’horizontale – recouvrir le matériel d’alcool à 96% (laisser gonfler) – attendre jusqu’à ce que l’alcool soit évaporé – étaler le matériel – fixer immédiatement les préparations dans la cuvette à l’alcool à 96% Ponction avec une aiguille fine: Les ponctions de l’œil, de la paupière et des cavités oculaires ne peuvent être effectués que par un ophtalmologiste Lavage intraoculaire (vitrectomie): Expédier rapidement le liquide de lavage réfrigéré. Histopathologie Données cliniques importantes: Question posée Topographie, indication du côté Rapports précédents Opérations/ traitements Gynécologie: date dernière menstruation, pilule, DIU, grossesse (semaine+jour) Matériel: fixation et marquage: Mettre toujours les tissus dans le formol, sinon risque de destruction du matériel. Mélanger un volume de tissu pour dix volumes de formol. Il faut veiller à bien recouvrir de formol. Marquer les coordonnées du patient en veillant à bien marquer des numéros identiques sur le récipient et le formulaire. Ne jamais mettre dans un récipient des tissus prélevés de diverses origines sans une marque spéciale. Bien refermer le couvercle et envoyer.