18 - Le Spectromètre de masse « Malditof MS ».pptx

publicité
Le Spectromètre de masse « Malditof MS » :
Intérêt dans l’identification bactérienne au
Service de Microbiologie de l’HPD
Fall B1; Ba Samb B1; Diawara S1; Geye M W1; Ndiaye K S1; Sokhna C. S2 ;
Fenollar F2 ; Dieme Y1; Mbaye E3; Wade B3 & Raoult D2
1‐ Fédéra)on des Laboratoires
2‐ URMITE‐IRD
3‐ Direc)on
1
Introduction :
Processus renforcement plateau technique et développement Recherche =>
HPD  Collaborations scientifiques
(URMITE, IRD, Méditerranée Infections, Pharo)
Après Labo Chimiorésistance Plasmodium
=> MALDI TOF (depuis Juillet 2012)
Révolution technique utile  Identification pathogènes
( bactéries, virus, champignons, arthropodes)
Seul spécimen disponible  sous-région
2
Objectifs :
Décrire principales caractéristiques techniques plateforme
Expérience accumulée après 9 mois utilisation
3
Définition :
MALDITOF MS= Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Time Of Flight Mass
Spectrometry
Identification par mesure composition moléculaire pathogènes étudiés.
4
Principe :
* Eclatement agent pathogène par rayons laser puissants
* Ionisation molécules produite avec matrice
* Accélération ions produits / champs électrique puissant
* Vitesse déplacement (TOF) fonction masse molécules
* Formation spectre dont chaque pic  masse ion donné
* Spectre confronté avec base de données spectres connus
(> 40000 spectres)
* Identification précise pathogène avec taux concordance
(généralement > 99%)
5
Principales étapes :
6
Après 9 mois à HPD :
Juillet 2012 – Mars 2013
• 1931 souches idenKfiées en rouKne
(bactéries +++, champignons)
• Envoi souches parKculières :
 « No matches » :
‐ nouvelles découvertes potenKelles !
‐ Examens plus spécialisés (Biomol+++)
 Souches rares :
7
Envoi souches & No Matches :
207 souches envoyées dont 13 « No Matches »
4 souches inhabituelles après confirmation:
 Kytococcus schroeteri
(Abcès ORL récidivant avec ATB sensible!)
 Exiguobacterium aurantiacum
 Exiguobacterium profundum
 Bacillus nealsonii
8
Envoi souches & No Matches :
EFGEGHG
EFGEEIE
#()*+,-,./+,0*&
$!%&#'
'/1/2&
34/2/5,67
!"#"$%&&'& ()%*+,-.
!"#"$%&&&/ ()%*+,-.
!"#$%$%%&'('%)*$+#+*,
4%,/+#$50%#+*(50&60//,,(
:;%&'%'</
!"#"$%&&:= ()%*+,-.
(),%54>?+@>4%?A40,?B?-+,?)0
:;%&'%'<C
!"#"$%&&:D ()%*+,-.
;$*"/+50%#+*,&6(0&*,6&%$'&6
:;%&'%'<<
!"#"$%&&': ()%*+,-.
(),%54>?+@>4%?A40,?B?-+,?)0
:;%&'%;&;
!"#"$%&&D/ ()%*+,-.
;0/.,.0(085,%0/'
!"#$%$%%&'('%)*$+#+*,
01%234-,546-)*3+545%7%!+8+59
7-(6&%,809,/$'0(
:;7(<=>?(4:@<<AB@-<(1CCD<BE3
;-(0&*,6&%$'&6(
EF$%:DGH%FE&&:D&:I:%J<<KLMN
>#0F)-(4*8+##0+
(:;7(<=>?(G7H@IB==B-<(1CCDJE3
;0/.,.0(085,%0/'
:;%&'%;'<
!"#"$%&&<L ()%*+,-.
KL,9&$50%#+*,&6(0&*0/#,0%&6
KL,9&$50%#+*,&6(0&*0/#,0%&6
:;%&=%:&D
!"#"$%:;=
()%*+,-.
M0%,88&'(0/#)*0%,'
:;%&=%:'&
!"#"$%:=&
()%*+,-.
(),%54>?+@>4%?A40,?B?-+,?)0
:;%&=%:;/
!"#"$%:D/
()%*+,-.
0),%54>?+@>4%?A40,?B?-+,?)0
:;%&=%:L<
!"#"$%:/<
()%*+,-.
M0%,88&'(R8+L&'
M0%,88&'(R8+L&'
:;%&=%:=/
!"#"$%:CC
()%*+,-.
4%,/+#$50%#+*(8U$RR,,
:;%&=%:/=
!"#"$%'&C
()%*+,-.
:0+/,50%,88&'(50*%,/$/+/','
4%,/+#$50%#+*(8U$RR,,
:0+/,50%,88&'(06"8$8"#,%&'
(:;7(<=>?(!;NAAICB(1CCDCNE3
!"#
#()*+,-,./+,0*&8/26),99)
3%2:1)2&5,.20-9);7
&<=&>0*.9:6,0*&8/26),99)
M0%,88&'(%+*+&'
:;7(<=>?(;:@@N<JO(1<@@E3
M0%,88&'(/+08'$/,,(
:;7(<=>?(QG=BBAA=(1CCDJ@E3
KL,9&$50%#+*,&6(F*$R&/.&6(
:;7(<=>?(QG=BBA<@(1CCDOJE3
=%Q!%R#6/%24S%0O-O22+?5426:9
#()*+,-,./+,0*&?,08@2,):;
A#BCD&84&#A'
&<=&>0*.9:6,0*&?5;
!"#$%$%-'+.+/#0*,&'
4%,/+#$50%#+*(50&60//,,(
!"#$%$%%&'('%)*$+#+*,(1'+23
4%,/+#$50%#+*(50&60//,,(
7$#),0(6&%,809,/$'0
7$#),0(6&%,809,/$'0
;$*"/+50%#+*,&6(0&*,6&%$'&6
;$*"/+50%#+*,&6(0&*,6&%$'&6
>#0F)-0*8+##0+
>#0F)-0*8+##0+
;0/.,.0(085,%0/'
()%?A40,?B?-+,?)0%J3+2%A+02%
@+24%A4%A)00O42N
;0/.,.0(085,%0/'
M0%,88&'(
%+*+&'P#)&*,/9+/','P6"%$,.+'
()%?A40,?B?-+,?)0%J3+2%A+02%
@+24%A4%A)00O42N
()%?A40,?B?-+,?)0%J3+2%A+02%
@+24%A4%A)00O42N
:*$#+&'(S&890*,'PF+//+*,(T(
;,*#$-U+*V60/,,
4%,/+#$50%#+*(8U$RR,,
:0+/,50%,88&'(F05&8,P'FF
KL,9&$50%#+*,&6(0&*0/#,0%&6(
M0%,88&'(%+*+&'
M0%,88&'(/+08'$/,,
KL,9&$50%#+*,&6(F*$R&/.&6
P)5,4
4%,/+#$50%#+*(8U$RR,,
:0+/,50%&88&'(06"8$8,#,%&'(WW
>X2&+/Y09+(+/(%$&*'
/%?A%R#6%L%0),%?0%#T6%:%PR$UV6%:GVW
9
Aspects techniques :
En permanence sous tension et climatisation
2 pannes sérieuses ayant nécessité télémaintenance
Quelques discontinuités électriques des Splits (redémarrage sans problème)
Manipulations par Mme Ba, Dr Fall, Dr Diawara
10
Avantages constatés :
Rapidité & fiabilité d’identification (Quelques mn Vs 24H)
Réalisation plus ciblée ATB
Economie en temps de travail et consommables
Possibilité découvertes nouvelles (No matches+++)
11
Perspectives:
Identification insectes vecteurs de pathologies (IRD)
Identification colonies mycobactéries (Tuberculose)
Identification bactéries à partir bouillons d’Hémoculture suspects
Identifications à partir prélèvements d’origine (urine, LCR…)
Détection des profils de résistance selon spectre !
12
Conclusion:
Spectromètre de masse MALDI-TOF
Méthode rapide & fiable identification pathogènes d’intérêt médical
Economies substantielles en temps et consommables
Meilleure qualité et délais de rendu résultats partiels
Prise en charge plus optimale patients
Ouverture à la Recherche de pointe en Microbiologie
Invitation Collègues Chercheurs (UCAD, IPD…)
13
MERCI
14
Téléchargement