Caractérisation fonctionnelle d` AtSNAP29

Caractérisation fonctionnelle d’ AtSNAP29,
un t-SNARE d’Arabidopsis thaliana
QUINODOZ Anne-Laure
Département de Biologie, Biologie végétale, Université de Fribourg
Rue Albert Gockel 3, CH-1700 Fribourg
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Mots clés:
Arabidopsis thaliana, AtSNAP29, gène reporteur GUS, SNAREs, trafic
vésiculaire .
Résumé
Le système sécrétoire soutient entre autre la synthèse de polysaccharides et de protéines et
leur livraison à différents organites ainsi qu’à l’espace extracellulaire. Cette livraison est
réalisée par des vésicules hautement sélectives qui bourgeonnent d’un compartiment donneur
et circulent jusqu’à une destination bien spécifique où elles fusionnent avec un compartiment
cible pour y décharger leur contenu. L’arrimage et la fusion des vésicules avec une membrane
cible nécessitent l’interaction de t-SNAREs (« target SNAREs », (« soluble Nethylmaleimide-sensitive factor attachement protein receptors »)) portés par la membrane
cible avec des v-SNAREs (« vesicle SNAREs ») situés sur la membrane de la vésicule. Dans
les plantes, ce trafic vésiculaire est essentiel aussi bien pour la polarité et la croissance de
chaque cellule, que pour le développement de toute la plante.
AtSNAP29 d’Arabidopsis thaliana est un t-SNARE homologue à la protéine SNAP25
impliquée, chez les animaux, dans l’exocytose de neurotransmetteurs et localisée à la
membrane synaptique. Lors d’une étude préalable, AtSNAP29 a été localisé à la membrane
plasmique (A. Gauthier et L. Sticher, non publié). Pour déterminer la fonction d’AtSNAP29
chez les plantes, le phénotype du mutant atsnap29 d’A. thaliana a été caractérisé et
l’expression d’AtSNAP29 a été analysée dans différentes conditions.
Une altération morphologique est apparue dans les poils racinaires du mutant atsnap29
comparé au type sauvage Columbia.. Le transcrit AtSNAP29 est exprimé dans les siliques
mais non dans les racines, feuilles et fleurs. Aucune expression d’AtSNAP29 n’a été observée
dans les plantes soumises à différents stress biotiques (pathogènes) et abiotiques (UV,
sécheresse, blessure, sel...). Pour analyser plus précisément l’expression d’AtSNAP29, une
construction codant pour le gène reporteur GUS (-glucuronidase) sous le contrôle du
promoteur SNAP29 a été réalisée et utilisée pour transformer A. thaliana. Une étude
préliminaire a montré une expression de l’enzyme GUS dans les tissus vasculaires des racines
et des feuilles.
Ces résultats laissent avancer l’hypothèse qu’AtSNAP29, acteur du trafic vésiculaire, serait
impliqué dans un processus affectant les poils racinaires ainsi que dans le système vasculaire
de la plante.
Réalisé sous la direction de Dr. Liliane STICHER