Fiche maître
et assistant
technique
Collège de Genève - Laboratoire de biologie
Antibiotiques
et
microorganismes
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Objectif
principal
• Mettre en évidence les effets des antibiotiques sur les cellules procaryotes ou eucaryotes.
• Utiliser des techniques simples de microbiologie.
Durée
• préparation avec des boîtes déjà coulées: 30 minutes
• incubation: 3 jours à 30 °C puis conservation au réfrigérateur jusqu’à l’observation des résultats.
• observation, conclusions, discussion des résultats: 15 minutes.
Conseils
pratiques
• Le matériel spécifique (voir ci-dessous) peut être obtenu auprès du laboratoire de M. Patrick
Linder à l'adresse suivante:
Biochimie Médicale
CMU
1 rue Michel Servet
1211 Genève 4
Téléphone: 702 54 84
On peut envisager, si l’on a le temps (OS), de faire couler les boîtes par les élèves:
• marquez sur les boîtes le nom de l’antibiotique choisi ainsi que les points A et B pour situer le
gradient d’antibiotique.
• mélangez 15 ml d’agar avec l’antibiotique indiqué
• coulez l’agar dans une boîte inclinée (posée de biais sur un crayon par exemple), laissez refroidir.
• après refroidissement, coulez à plat par dessus, 15 ml d’agar sans antibiotique.
• fermez les boîtes avec du Parafilm pour éviter toute contamination.
• laissez les boîtes incuber 3 jours à 30 °C ou plus longtemps à température ambiante.
Matériel
pour la classe
A disposition auprès du labo de P. Linder
• boîtes déjà coulées au prix de CHF 20.–-/ 20 boîtes,
ou
• matériel nécessaire pour couler les boîtes au prix de CHF 15.– / 20 boîtes:
- YPD liquide: 1 % yeast extract, 2 % Bacto-peptone, 2 % glucose, 15g d'agar-agar
- YPD avec 0,015 ml Ampicilline (100 mg/ml H2O)
- YPD avec 0.001 ml Cycloheximide (10 mg/ml H2O)
- YPD avec 0,75 ml Chloramphenicol (4 g/50 ml éthanol).
Matériel
pour 2 élèves
• 10 pipettes Pasteur stériles
• stylo pour annoter les boîtes
A disposition auprès du labo de P. Linder
• suspension de levures
• suspension de bactéries.
Webographie
www.expasy.ch/linder/ecole/Protocols.html ➞ ce site contient l'ensemble des protocoles de
laboratoire proposés par M. Patrick Linder.