Fiche maître
et assistant
technique
Collège de Genève - Laboratoire de biologie
Antibiotiques
et
microorganismes
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Objectif
principal
Mettre en évidence les effets des antibiotiques sur les cellules procaryotes ou eucaryotes.
Utiliser des techniques simples de microbiologie.
Durée
préparation avec des boîtes déjà coulées: 30 minutes
incubation: 3 jours à 30 °C puis conservation au réfrigérateur jusqu’à l’observation des résultats.
observation, conclusions, discussion des résultats: 15 minutes.
Conseils
pratiques
Le matériel spécifique (voir ci-dessous) peut être obtenu auprès du laboratoire de M. Patrick
Linder à l'adresse suivante:
Biochimie Médicale
CMU
1 rue Michel Servet
1211 Genève 4
Téléphone: 702 54 84
On peut envisager, si l’on a le temps (OS), de faire couler les boîtes par les élèves:
marquez sur les boîtes le nom de l’antibiotique choisi ainsi que les points A et B pour situer le
gradient d’antibiotique.
mélangez 15 ml d’agar avec l’antibiotique indiqué
coulez l’agar dans une boîte inclinée (posée de biais sur un crayon par exemple), laissez refroidir.
après refroidissement, coulez à plat par dessus, 15 ml d’agar sans antibiotique.
fermez les boîtes avec du Parafilm pour éviter toute contamination.
laissez les boîtes incuber 3 jours à 30 °C ou plus longtemps à température ambiante.
Matériel
pour la classe
A disposition auprès du labo de P. Linder
boîtes déjà coulées au prix de CHF 20.-/ 20 boîtes,
ou
matériel nécessaire pour couler les boîtes au prix de CHF 15. / 20 boîtes:
- YPD liquide: 1 % yeast extract, 2 % Bacto-peptone, 2 % glucose, 15g d'agar-agar
- YPD avec 0,015 ml Ampicilline (100 mg/ml H2O)
- YPD avec 0.001 ml Cycloheximide (10 mg/ml H2O)
- YPD avec 0,75 ml Chloramphenicol (4 g/50 ml éthanol).
Matériel
pour 2 élèves
10 pipettes Pasteur stériles
stylo pour annoter les boîtes
A disposition auprès du labo de P. Linder
suspension de levures
suspension de bactéries.
Webographie
www.expasy.ch/linder/ecole/Protocols.html ce site contient l'ensemble des protocoles de
laboratoire proposés par M. Patrick Linder.
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