Immunologie MCB-20964 1 Certificat en biotechnologie Faculté des sciences et génie Département de biochimie, microbiologie et bioinformatique Laboratoire d’immunologie appliquée MCB-1701 1-0-4-4 3 crédits Trimestre : Automne-2016 Professeurs : Mathieu Nadeau Nicolas Allen Demers Laboratoire d’immunologie appliquée MCB-1701 1 CLIENTÈLE Ce cours s’adresse spécifiquement aux étudiant(e)s inscrit(e)s au certificat en biotechnologie. Aucun préalable n’est requis pour ce cours. Cependant la maîtrise des notions de base en immunologie est un atout. HORAIRE Le cours a lieu les jeudis de 18 h 00 à 23 h 00 dans les locaux du Cégep de Lévis-Lauzon (D-306 et A-362). Conformément au calendrier scolaire, les cours débutent le 5 septembre et se terminent le 12 décembre. Il n’y a pas de cours lors de la semaine de lecture. BUT DU COURS Fournir à l’étudiant(e) l’opportunité d’acquérir des connaissances et habiletés techniques reliées à l’immunologie. OBJECTIFS DE CONNAISSANCE Définir la structure et les fonctions des anticorps; Caractériser les interactions entre antigène et anticorps; Expliquer une réponse anticorps; Décrire les différentes façons de produire des anticorps (polyclonale, monoclonale, par ingénierie génétique) Décrire les principales immunotechniques (immunoessais, agglutination et précipitation, bioessais). Comprendre le développement d’outils immunologiques à des fins diagnostiques et thérapeutiques. Commenter les principales applications des anticorps dans les domaines diagnostiques et thérapeutiques. OBJECTIFS D’HABILETÉS TECHNIQUES Mettre en pratique les techniques immunologiques dans une perspective d’application en biotechnologies; Appliquer des protocoles reliés aux immunotechniques; Compiler les notes et résultats de laboratoire; Purifier des immunoglobulines; Mesurer la réaction antigène-anticorps par diverses techniques : Immunoessais (ELISA), immunoempreinte, immunofluorescence, agglutination, immunodiffusion. Isoler les cellules du système immunitaire en utilisant différentes techniques (gradient, “panning”); Intégrer différentes techniques dans un projet concret de recherche et développement. CONTENU THÉORIQUE Date Module 1 Les anticorps : outils de base Structure des immunoglobulines. Classes d’immunoglobulines. Domaines fonctionnels. Purification d’immunoglobulines. Module 2 Production d’anticorps Caractéristiques de la réponse anticorps. Production d’anticorps polyclonaux et monoclonaux. Ingénierie génétique des anticorps. Module 3 Interactions antigène-anticorps Types d’antigènes. Épitopes linéaires et conformationnels. Liaisons impliquées dans l’interaction antigène-anticorps. Spécificité. Affinité et avidité. Module 4 Immunoessais Essais d’interactions primaires, secondaires et tertiaires. Immunofluorescence, ELISA, immunoempreinte. Réactions de précipitation et d’agglutination 29 sept 13-20 oct Séparation de cellules. Cytofluorométrie Cytokines et réponse immunitaire Module 6 Autres utilisations des anticorps 15-22 sept 10-17 nov Module 5 Immunologie cellulaire 8 sept Protéomique et biosenseurs Immunoprécipitation. Chromatographie d’affinité utilisant des anticorps. Utilisation d’outils thérapeutiques basés sur l’immunologie dans le traitement du cancer. Interventions passives utilisant des anticorps. 24 nov Laboratoire d’immunologie appliquée MCB-1701 3 HORAIRE DES LABORATOIRES Professeur Titre Date Nicolas Demers Allen- Préparation des solutions 8 septembre Nicolas Demers Allen- Purification d’immunoglobulines Nicolas Demers Allen- Séparation de cellules et cytométrie Purification et dosage des protéines Vérification de la pureté (électrophorèse) 29 septembre 6 octobre Cytométrie (Suite) Examen Théorique I Mathieu Nadeau 15 septembre 22 septembre Réactions d’agglutination 6 octobre 13 octobre Immunodiffusion Mathieu Nadeau Immunofluorescence Mathieu Nadeau Immunodiffusion (suite) 27 octobre Examen Laboratoire I 27 octobre Immunoempreinte Électrophorèse et transfert Immunoessai 10 novembre Elisa 24 novembre Mathieu Nadeau Mathieu Nadeau Mathieu Nadeau Mathieu Nadeau 20 octobre 17 novembre Examen Théorique II Fête de l’université, Pas de cours. 1 décembre 8 décembre Remise du travail de documentation Mathieu Nadeau Examen pratique 15 décembre Examen Laboratoire II 15 décembre FORMULE PÉDAGOGIQUE Le cours de « Laboratoire d’immunologie appliquée » du Certificat en biotechnologie se donnera sous la forme de cours magistraux et de laboratoires. Des protocoles, des notes de cours, des articles scientifiques et des documents audiovisuels seront utilisés pour faciliter l’apprentissage. L’étudiant(e) devra lire les protocoles et préparer son cahier de laboratoire avant de se présenter aux travaux pratiques. Les expérimentations seront effectuées en équipe de deux personnes. MATÉRIEL NÉCESSAIRE Cahier de compilation. Sarrau, lunettes de protection et crayon marqueur permanent. Les documents seront distribués via le portail de l’université Laval DISPONIBILITÉ L’étudiant(e) pourra rejoindre les professeurs par téléphone au 833-5110 (3546) et fixer une rencontre, au besoin. Le bureau des professeurs est situé au CEGEP de Lévis-Lauzon, local A-300E. Vous pouvez également contacter le professeur via courrier électronique à l’adresse suivante : [email protected] BIBLIOGRAPHIE EDWARD A. GREENFIELD, Dana-Farber Cancer Institute. Antibodies: A Laboratory Manual, Second edition, 2014 FERNANDEZ-BOTRAN, R. VETVICKA, V. Advanced methods in cellular immunology. Boca Raton. CRC Press. 2000 JUDY OWEN, JENNI PUNT, SHARON STRANFORD, Immunologie. Le cours de Janis Kuby, 7ième édition. Paris. Dunod. 2014 Laboratoire d’immunologie appliquée MCB-1701 5 ÉVALUATION L’étudiant(e) sera tenu de compiler ses observations et résultats de laboratoire dans un cahier selon les critères définis par le professeur lors du premier cours. Deux examens permettront d’évaluer la compréhension des techniques et l’analyse des observations faites en laboratoire. Pour ces examens, l’étudiant(e) aura droit à son cahier de compilation. La capacité de l’étudiant(e) de planifier et de réaliser les manipulations adéquates sera également évaluée. Un travail de documentation et de rédaction de protocole sera également demandé. Répartition de l’évaluation : Examen théorique I : 6 octobre 12,5% de la note finale Examen laboratoire I : 27 octobre 25% de la note finale Examen théorique II: 1er décembre 10% de la note finale Test pratique : 15 décembre 20% de la note finale Examen laboratoire II : 15 décembre 17,5% de la note finale Carnet de laboratoire 15 décembre 7% de la note finale Travail de documentation 8 décembre 8% de la note finale Les cotes A à E seront distribuées de la façon suivante : A+ 95-100% C+ 74-76% A 90-94% C 70-73% A- 86-89% C- 65-69% B+ 83-85% D+ 60-64% B 80-82% D 50-59% B- 77-79% E < 50% (ÉCHEC) POLITIQUES D’ÉVALUATION ET VALORISATION DE LA LANGUE La note de passage est de 50%. En cas d’absence à une évaluation, l’étudiant(e) doit référer aux règlements en vigueur à la Faculté des sciences et génie de l’Université Laval. Pour connaître les diverses modalités de valorisation de la langue française, l’étudiant(e) doit référer à la Politique de valorisation de la langue française du Département de biochimie et microbiologie, Faculté des sciences et génie.