Nom : Habert

Stage proposé par Dr Roger LEANDRI
MCU-PH
Université Paul Sabatier et CHU Toulouse
EA 3694 Groupe de Recherche en Fertilité Humaine
Groupe de Médecine de la Reproduction
Hôpital Paule de Viguier, CHU Toulouse, 330 av Grande Bretagne,
31059 Toulouse Cedex 9
Téléphone : 05 67 77 14 35
Mail : [email protected]
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Pr Louis BUJAN
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Groupe de recherche en Fertilité Humaine
Responsable de l’équipe : Pr BUJAN Louis
Résumé du thème de recherche de l’équipe
Etude des effets d'agents exogènes sur la fonction de reproduction masculine (cancer et procréation,
environnement et reproduction, virus et procréation). L’équipe a développé depuis de nombreuses années
l’étude des facteurs de risques pour la fertilité masculine et l’étude de l’effet de facteurs exogènes sur la
spermatogenèse. Ainsi plusieurs travaux ont été menés sur l’effet de l’augmentation de la température testiculo-
épididymaire sur le spermatogenèse et la fertilité, sur les facteurs de risques du cancer du testicule et de la
cryptorchidie ainsi que sur les effets des traitements du cancer ou des traitements antirétroviraux sur la fonction
de reproduction masculine. Plusieurs programmes de recherche sont actuellement en cours dans ces
thématiques. Le rapport de l’AERES concernant l’EA est consultable ici : http://www.aeres-
evaluation.fr/Etablissements/Universite-Toulouse-3-Paul-Sabatier.
Titre du projet de stage : Relation entre vacuoles céphaliques du spermatozoïde et
altération de son génome : étude d’un groupe témoin d’hommes féconds et d’un
groupe de patients traités par chimiothérapie
Projet de stage :
Situation du sujet : Une analyse fine de la morphologie spermatique à très fort grossissement (x6.000
à 10.000) a été récemment développée. Cette technique optique permet de déceler des vacuoles au
niveau de la tête du spermatozoïde. Des publications récentes mettent en évidence des altérations
nucléaires en relation avec les vacuoles. La mise en évidence de ces vacuoles dans des situations
connues d’altération du génome du spermatozoïde pourrait apporter des éléments de réponse
supplémentaires sur l’origine de ces vacuoles. La chimiothérapie est une de ces situations, car les
altérations de la spermatogénèse mais également du génome du spermatozoïde sont connues durant
et dans les suites immédiates de ce traitement.
Objectif du stage : Cette étude pilote a pour objectif de caractériser les vacuoles céphaliques du
spermatozoïde et de rechercher les liens entre celles-ci et les altérations du génome du
spermatozoïde dans un groupe témoin mais également dans un groupe de patient traité par
chimiothérapie.
Méthodes : Une évaluation des vacuoles du spermatozoïde (nombre, surface, position) est effectuée
après acquisition d’images à fort grossissement (x6000). L’étude de la chromatine du spermatozoïde
sera effectuée grâce au Sperm Chromatine Structure assay, la fragmentation de l’ADN sera étudiée
grâce au test TUNEL et le taux d’aneuploïdie sera étudié par hybridation de sondes chromosomiques.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire : MSOME (Motile Sperm Organellar Morphology
Examination), SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay), TUNEL, Cytofluorométrie, FISH,
Congélation de sperme et examens classiques du sperme.

Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
 Soluble HLA-G in IVF-/ICSI-embryo culture supernatants does not always predict implantation success: a multicentre
study.
Tabiasco J. , Perrier d'Hauterive S., Thonon F., Parinaud J., Léandri R., Foidart J.M., Chaouat G., Munaut C., Lombroso
R.et al. RBM Online. 2009,18(3):374-81.
 Revealing the dynamics of gene expression during Embryonic Genome Activation and first differentiation in the rabbit
embryo using a dedicated array screening.
Leandri RD, Archilla C, Bui LC, Peynot N, Liu Z, Cabaud C, Chastellier A, Renard JP and Duranthon V. Physiol.
Genomics. 2009 Jan 8;36(2):98-113
 Pregnancy outcome and live birth after IVF and ICSI according to embryo quality.
Fauque P., Leandri R., Merlet F., Juillard J.-C., Epelboin S., Guibert J., Jouannet P. and Patrat C. J Assist Reprod
Genet. 2007 Mar 6.
 Zona pellucida from fertilised human oocytes induces a voltage-dependent calcium influx and the acrosome reaction in
spermatozoa, but cannot be penetrated by sperm.
Patrat C, Auer J, Fauque P, Leandri R.D, Jouannet P, Serres C. BMC Dev Biol. 2006 Dec 5;6(1):59
 SSH adequacy to preimplantation mammalian development: scarce specific transcripts cloning despite irregular
normalisation.
Leandri R.D, Bui L.C, Renard J.P and Duranthon V. BMC Genomics. 2005; Nov 8;6:155.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil.
Thèses :
Marie WALSCHAERTS : Début 2006, fin: 2011, Ecole doctorale mathématiques Université Paul Sabatier,
Toulouse
Gulfam AHMAD : Début 2009, fin 2011, Ecole doctorale Biologie Biotechnologies Santé, Université Paul
Sabatier, Toulouse
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au
cours des six dernières années.
Masters :
Linda PAVILI : Master Spécialité de M2 Recherche (Pr R Habert) “Reproduction et Développement : 2006,
responsable : Pr Bujan. Devenir : article sur le travail du master ayant fait l’objet d’une publication dans Fertility
and Stérility, étudiante ayant regagné la Guadeloupe et ayant un poste de biologiste dans un laboratoire
d’analyses médicales et des vacations au CHU Pointe à Pitre.
Gulfam AHMAD : Master Spécialité de M2 Recherche (Pr R Habert) “Reproduction et Développement : 2008,
responsable : Pr Bujan. Devenir : article sur le travail du master ayant fait l’objet d’une publication dans
Toxicology In Vitro, étudiant en 3ième année de thèse.
Thèse :
Eric HUYGHE : Thèse, école doctorale Biologie Biotechnologies Santé, Université Paul Sabatier, Toulouse,
responsables : Dr Thonneau et Dr Mieusset, soutenance 2009. Devenir : 4 publications internationales sur le
travail de thèse, actuellement MCU-PH CHU Toulouse.
A noter l’encadrement dans l’EA de plusieurs étudiants de dernière année de l’INSA pour leurs stages de fin
d’études pour le diplôme d’ingénieur.
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique,
médecin ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Plutôt médecin ou biologiste médical
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
Probablement.