UNIVERSITE DE RENNES 1 - UFR SVE DEUG SCIENCES (1ère année) : Sciences de la Vie Année Universitaire 2000-2001 (2ème Session d'examen) Module UE4 (BIOLOGIE 2) : Biologie et Génétique Moléculaire et Cellulaire EPREUVE DE TRAVAUX PRATIQUES & TRAVAUX DIRIGES N° d'anonymat : Durée de l'épreuve : 30 minutes. Vous répondrez aux questions directement sur ces feuilles dans les espaces prévus à cet effet et vous les insèrerez dans une copie double à coin gommé portant toutes les informations demandées. Vous n'oublierez pas de faire figurer votre n° d'anonymat sur chaque feuille. L'été dernier, lors du nettoyage du site du Festival des Vieilles Charrues un des jardiniers de la Ville de Carhaix (29) trouve une plante qui possède, selon lui, des caractères voisins de la plante du petit pois. Les fleurs présentent une couleur rose. La Police suspectant cette plante d'avoir des "propriétés autres" lui demande d'analyser un peu plus en détail cette plante. La première chose qu'il envisage est de déterminer si cette plante est hybride ou de lignée pure. 1. Que doit-il faire pour savoir si la plante est de lignée pure (au moins pour les caractères phénotypiques visibles)? Il compare ces plants avec les plants de petit pois qu'il utilise dans son potager. Ces derniers ont des fleurs blanches. Les autres caractéristiques phénotypiques semblent identiques. Il s'intéresse donc au caractère "couleur des fleurs" 2.Comment peut-il savoir quel est le caractère dominant (couleur rose ou couleur blanche)? Lors de ses différents croisements il obtient un plant qui est hétérozygote pour 2 caractères : la taille et la couleur de la graine. Le caractère "grande taille (G) et le caractère "couleur de la graine jaune" (J) sont les phénotypes dominants. Il laisse cette plante (de grande taille et dont les graines sont jaunes) s'autoféconder puis sème les graines obtenues. 3. Quels sont les différents types de gamètes qu'il obtiendra? Sur l'ensemble des graines qu'il a semé il obtient 281 plants de grande taille produisant des graines jaunes, 20 plants de grande taille produisant des graines blanches 18 plants de petites tailles produisant des graines jaunes et 81 plants nains donnant des graines blanches. 4. Que doit-il en conclure? Justifier brièvement (Rappel : 9/16 = 56,25% ; 3/16 = 18,75% et 1/16 = 6,25%) S'intéressant à la couleur des fleurs de ses plants de petits pois, le jardinier confie à un de ses amis généticien à l'Université de Camors (56) , un plant dont les fleurs sont roses et un plant dont les fleurs sont blanches. Ce généticien réussi à isoler un fragment d'ADN qui semble contenir le gène qui code pour la couleur des fleurs. Afin de l'étudier plus en détail, il souhaite l'insérer dans un vecteur plasmidique nommé pSD qui contient plusieurs sites de restrictions uniques : BamHI , EcoRI et SmaI. La carte de restriction de ce vecteur est présentée ci dessous : AatIIBamHI Lac Z EcoRI SmaI AmpRes AatII pSD (2,8 kb) PvuII Ce vecteur présente un gène de résistance à l'ampicilline (AmpRes) et un gène codant pour la galactosidase (LacZ). PvuII AatII Les extrémités du fragment d'ADN à insérer ont été générées par la coupure par l'enzyme BscBI et se présentent comme suit : 5' TCC--------------------------------------------------------GGA 3' 3' AGG--------------------------------------------------------CCT 5' 4. Quelles sont les enzymes de restriction qu'il devra utiliser pour couper le vecteur et pour insérer le fragment d'ADN dans ce vecteur? Sites de Restriction : AatII : GACGTC BamHI : GGATCC SmaI : CCCGGG BscBI : GGATCC EcoRI : GAATTC PvuII : CAGCTG Le brillant généticien de Camors a envisagé d'insérer le fragment dans le site AatII du vecteur pSD. 5. Existe-t-il selon vous, une contre-indication à cette stratégie ? Pourquoi? 6. Quel est l'intérêt de la présence du gène de résistance à l'ampicilline dans le vecteur pSD?