recherche de marqueurs genetiques lies a la tolerance a la salinite

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEURE ET DE LA
RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE D’ORAN ES- SENIA
FACULTE DES SCIENCES
DEPARTEMENT DE BIOLOGIE
Laboratoire de Biotechnologie des Rhizobiums et Amélioration des Plantes
Mémoire en vue de l’obtention du diplôme de Magister
Spécialité : Amélioration des plantes
Option : Sélection
Intitulé ;
Présenté par : Melle Hammou Bakhta
Devant la commission du jury :
Président : Pr. BEKKI .A Professeur Université d’Es-Senia Oran
Rapporteur : Pr. FYAD F.Z Professeur Université d’Oran Es- Sénia
Examinateur : Dr. BENBAYER .Z Docteur Université d’Oran Es- Sénia
Examinateur : Pr. AOUES .A Professeur Université d’Oran Es- Sénia
RECHERCHE DE MARQUEURS
GENETIQUES LIES A
LA TOLERANCE A LA SALINITE CHEZ DES
ECOTYPES
D’ESPECES ANNUELLES DE MEDICAGO
Année Universitaire : 2009-2010

Sommaire
Remerciement
Dédicace
Résumer.
INTRODUCTION ................................................................................................................. 01
PREMIERE PARTIE : REVUE BIBLIOGRAPHIQUE
Chapitre I : Présentation de la plante .................................................................................... 05
I. 1. Le genre Medicago : Taxinomie, aire de répartition et domestication: ............................... .05
I. 1. 1. Medicago truncatula .................................................................................................. .08
I. 1. 2. Medicago aculeata..................................................................................................... .08
I. 2. Medicago plante modèle pour l’étude des interactions plante- stress ................................. .10
I. 2. 1. Importance des légumineuses cultivées. ......................................................................... .10
I. 2. 2. Le genre Medicago comme modèle génétique ................................................................ .11
Chapitre II : Les stress chez les plantes ................................................................................. 15
II. 1. Qu’est qu’un stress ? ....................................................................................................... 15
II. 2. Le stress abiotique ......................................................................................................... 16
II. 3. La perception du stress et les différents types de senseurs ................................................. 16
II. 4. Transduction du signal : ................................................................................................... 18
II. 4. 1. Le calcium ................................................................................................................ 18
II. 4. 2. La voie SOS ............................................................................................................. 19
II. 4. 3. Les protéines kinases dépendantes du calcium (CDPKs) ........................................... 19
II. 4. 4. Les vois de MAPKinas ........................................................................................... 19
II. 4. 5. Les phospholipases ..................................................................................................... 20

II. 5. La salinité ........................................................................................................................ 21
II. 5. 1. Origine de la salinité ................................................................................................. .22
II. 5. 1. 1. Origine primaire ............................................................................................... .22
II. 5. 1. 2. Origine secondaire. ........................................................................................... 22
II. 5. 2. Le stress salin .......................................................................................................... 23
II. 5. 2. 1. Les réponses des plantes au stress. .................................................................. 23
II. 5. 2. 2. Tolérance au stress salin chez le « Medicago ». ................................................. 27
II. 5. 3. Les modifications métaboliques suite aux signaux du stress. .................................... 28
II. 5. 3. 1. Synthèse des protéines. ......................................................................................... 29
II. 5. 3. 2. Synthèse des enzymes. .......................................................................................... 32
Chapitre III : Les marqueurs isoenzymatiques. .................................................................... 36
III. 1. Définition d’un marqueur ............................................................................................... 36
III. 2. Les isoenzymes ............................................................................................................. 38
III. 2. 1. Les estérases. ........................................................................................................... 39
III. 2. 2. Les peroxydases .................................................................................................... 40
III. 2. 2.1 Définition ......................................................................................................... 40
III. 2. 2. 2. Historique. ......................................................................................................... 41
III. 2. 2. 3. Structure chimique ............................................................................................. 41
III. 2. 2. 3. Localisation et mobilité des peroxydases. ........................................................... 42
III. 2. 2. 5. Rôle physiologique ............................................................................................ 42
DEUXIEME PARTIE : PARTIE EXPERIMENTALE
Chapitre IV : Matériel et Méthodes. ...................................................................................... 46
IV. 1. Matériel végétal ............................................................................................................. 46
IV. 2. Protocole expérimental ................................................................................................... 47
IV. 3. Séparation des isoenzymes (estérases et peroxydases) par électrophorèses PAGE : ........ 47

IV. 3. 1. Extraction des estérases et des peroxydases. ....................................................... 48
IV.3. 2. Préparation du gel pour les estérases et les peroxydases ...................................... 48
IV. 3.3. Condition de migration des estérases et les peroxydases ...................................... 48
IV. 3.4. Révélation des estérases ....................................................................................... 49
IV. 3.5. Révélation des peroxydases .................................................................................. 49
Chapitre V : Résultats et interprétation ................................................................................ 51
V. 1. Résultats relatifs aux estérases ....................................................................................... 51
V. 2. Résultats relatifs aux Peroxydases ................................................................................... 58
V. 2. 1. Changements des profils des peroxydases chez les deux espèces Truncatula et
Aculeata.et une population sauvage (inconnue)......................................................................... 58
V. 2. 2. Changements des profils des peroxydases chez la population sauvage de Medicago. .... 62
VI. Discussion .......................................................................................................................... 65
VI. 1. Modification des estérases sous un stress salin. .............................................................. 65
VI. 1. Modification des peroxydases sous un stress salin .......................................................... .71
Conclusion et perspective ....................................................................................................... 77
- Références bibliographiques

Au nom de Dieu je dédie ce modeste travail :
La mémoire de ma mère, qui M’a appris la patience, la volonté….
Mon père pour ses prières et son sacrifice.
Mes sœurs et mes frères
AISSAM
Mes collègues et amis
Et a toutes les personnes qui portent le nom Hammou et Yagoubi