Chapitre 3 : La segmentation I) Chez la souris, le segmentation engendre la ségrégation de trois lignages cellulaires les premières divisions la compaction la cavitation l ’éclosion les trois lignages cellulaires l ’activation du génome II) Chez l ’amphibien la segmentation transforme l ’œuf en une structure pluricellulaire organisée 1) les premières divisions 2) le contrôle des divisions 3) la blastula les premières divisions Stade 8 cellules les premières divisions : stade 8 cellules Cellules sphériques, microvillosités, noyau central Cytoplasme : répartition homogène des mitochondries, Golgi, Microtubules, actine cytoplasmique. Cortex : actine corticale, ezrine, cinguline Contacts intercellulaires : cadhérines les premières divisions Cadhérine Les cadhérines (uvomorulines) sont des protéines transmembranaires. Elles jouent des rôles importants dans l'adhésion cellulaire. Leurs fonctionnement dépend des ions calcium (Ca2+), d'où leur nom. la compaction la compaction Polarité structurale cytoplasmique et moléculaire La compaction Données expérimentales : - inhibition de la synthèse protéique Segmentation Aplatissement Pas affectés Polarité structurale Compaction ou 2 cellules 4 cellules Actinomycine D : Gène Cycloheximide : ARNm ARNm protéines Ccl : la compaction se réalise en absence de synthèses protéiques (transcription, traduction) La compaction Données expérimentales : - activation des protéines kinases C Esters de phorbol Compaction prématurée pendant 1h Décompaction Activation de la protéine kinase C de façon spécifique en se fixant sur le site de reconnaissance du diacylglycérol diacylglycérides Compaction prématurée pendant 1h Stable Adressage et accumulation de la E-cadhérine Intermédiaires de la signalisation PKC Ccl : la compaction nécessite une voie de signalisation PKC La compaction Données expérimentales : - glycosylation tunicamycine - Ca++ Ca++ - cytosquelette Cytochalasine B Pas compaction La compaction Données expérimentales : - inactivation de la E-cadhérine : Compaction, dégénère au stade blastocyste E-cadhérine maternelle ARNm maternels Protéine maternelle - anticorps anti-cadhérine : pas de compaction Contradiction ?? La compaction Bilan Initiation : signalisation PKC E-cadhérine : apposition Renforcement et maintien : E-cadhérine jonctions gap jonctions serrées La cavitation Le blastocyste se forme par cavitation la cavitation blastocyste 16 cellules Na+/K+ATPase 72 - 96 heures La cavitation Masse cellulaire interne Epiblaste Ectoderme primitif Hypoblaste Migration Trophectoblaste Endoderme primitif Jour 4 Jour 5 l ’éclosion Trophectoderme mural synthétise la strypsine MCI ZP Ségrégation des lignages cellulaires Oeuf Masse cellulaire interne Epiblaste Hypoblaste Trophectoblaste Endoderme primitif Ectoderme Endoderme Mésoderme Cellules germinales Endoderme viscéral Trophectoderme polaire Trophectoderme mural Endoderme pariétal L’activation du génome zygotique s’effectue au début de la segmentation Les approches expérimentales 1980 - l’analyse du profil des synthèses protéiques 1985 - biologie moléculaire, gènes exogènes = rapporteur (luciférase) Les principales étapes de l’activation du génome zygotique stade une cellule: le génome n’est pas transcrit avant la 1ére division: une activité transcriptionnelle sélective l’activité du génome s’instaure au stade 2 cellules. l ’activation du génome 2 cellules 1 cellule Activation zygotique mineure Activation zygotique majeure Compétence transcriptionnelle Transcription Inactivité transcriptionnelle Traduction Synthèse des HSP et des TRC Synthèse des protéines zygotiques Traduction et modifications posttraductionnelles des protéines maternelles Dégradation des ARNm maternels Concentration nucléaire de facteurs de transcription