manuel de référence à l`usage des personnels de laboratoire

MANUEL DE RÉFÉRENCE À L'USAGE DES PERSONNELS
DE LABORATOIRE
MANUEL DE RÉFÉRENCE À L'USAGE DES PERSONNELS
DE LABORATOIRE
ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTÉ
Bureau régional de l'Afrique
Brazzaville
(n=u4(n- )+0 ×u3( -1-.000 3(1 ×u4(n-u4 ) 1 .02 n) 0 04×u n-)1)
MANUEL DE RÉFÉRENCE À L'USAGE DES PERSONNELS
DE LABORATOIRE
LE VIRUS
DE L'IMMUNODÉFICIENCE HUMAINE
ET SON DIAGNOSTIC
MANUEL DE RÉFÉRENCE À L'USAGE DES PERSONNELS
DE LABORATOIRE
ORGANISATION MONDIALE DE LA SANTÉ
Bureau régional de l'Afrique
Brazzaville • 2004
DIVISION DES MALADIES TRANSMISSIBLES
PROGRAMME RÉGIONAL SIDA
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Imprimé en République d' Afrique du Sud
Bureau régional de l'OMS pour l'Afrique
(2004)
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iii
SOMMAIRE
Page
Préface . . ……………………………………………………………………………………………. ....................................vii
INTRODUCTION ..................................................................................................................................1
I RAPPEL SUR LE VIRUS ET LA RÉPONSE IMMUNITAIRE ..........................................................................3
1. Le virus .....................................................................................................................................3
2. Les défenses immunitaires .........................................................................................................4
A. Les moyens de défense non spécifiques ............................................................................4
B. Les moyens de défenses spécifiques ..................................................................................4
a) Éléments intervenant dans la réaction immunitaire .................................................4
b) Réaction immunitaire ............................................................................................7
c) Modulation de la réponse immunitaire ..................................................................8
II. L'AGENT VIH .......................................................................................................................................11
1. Structure du virus ....................................................................................................................11
A. Le génome ....................................................................................................................13
a) Les gènes classiques ……………………………………………………….........................13
b) Les gènes supplémentaires ..................................................................................13
B. La capside virale …………………………………………………………………. ...........................14
C. La matrice ……………………………………………………………………….. ............................14
D. L'enveloppe ..................................................................................................................14
2. Multiplication du VIH .............................................................................................................15
A. Fixation sur la cellule cible .............................................................................................15
B. Pénétration ...................................................................................................................16
C. Décapsidation ..............................................................................................................17
D. Rétrotranscription et intégration .....................................................................................17
E. Expression de l'ADN intégré ..........................................................................................18
F. Assemblage-libération-maturation ................................................................................19
3. Variabilité génétique du VIH ...................................................................................................19
4. Les cellules cibles du VIH ........................................................................................................20
5. Caractéristiques physico-chimiques du virus ............................................................................21
SOMMAIRE
iv
III. ÉPIDÉMIOLOGIE DE L'INFECTION .....................................................................................................22
1. Les chiffres de l'infection ..................................................................................................................22
2. Modes de transmission du virus ........................................................................................................23
3. Répartition géographique des types et sous-types ..............................................................................23
IV. HISTOIRE NATURELLE DE LA MALADIE ..............................................................................................25
1. La contamination ...........................................................................................................................25
2. La primo-infection .........................................................................................................................25
3. La séro conversion .........................................................................................................................26
4. Le Syndrome de l'immunodéficience acquise ou SIDA ....................................................................26
V. LE DIAGNOSTIC DU VIH .....................................................................................................................27
1. Le diagnostic sérologique de l'infection à VIH ...................................................................................27
A. ELISA ou test immuno-enzymatique .........................................................................................27
a) Test ELISA indirect .........................................................................................................28
b) Test ELISA de compétition .............................................................................................28
c) Test ELISA sandwish ......................................................................................................29
d) Test d'immunocapture des anticorps ..............................................................................30
e) Les tests combinés de détection antigène/anticorps ........................................................31
2. Évolution des tests ELISA de diagnostic du VIH ..................................................................................31
3. Composition antigénique des tests de détection des anticorps ............................................................31
4. Tests de recherche de l'antigène p.24 ...............................................................................................32
B. Les tests rapides .......................................................................................................................32
5. Les tests de confirmation ..................................................................................................................36
A. Le western blot ou test d'immunoempreinte .............................................................................36
B. L'immunofluorescence indirecte .............................................................................................37
C. L'immunoanalyse en ligne .......................................................................................................38
D. La radio-immunoprécipitation (RIPA) .......................................................................................38
6. La mesure de la réplication virale ......................................................................................................38
7. La culture du virus ...........................................................................................................................39
8. Cas particulier de la transmission mère-enfant ...................................................................................39
VI. LES MESURES DE SÉCURITÉ AU LABORATOIRE ...................................................................................41
VII. STRATÉGIES OMS/ONUSIDA DE DIAGNOSTIC DU VIH .....................................................................42
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