ATELIER "Etudes Fonctionnelles des Mitochondries" GDR 3159 http://meetochondrie .ibgc.cnrs.fr/ 8-10 septembre 2010, Bordeaux Membrane externe Membrane interne Espace intermembranaire matrice crête Chaîne respiratoire des mammifères Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 Chaîne respiratoire de S. cerevisiae Atelier GDR 3159-Montpellier, 2-4 mai 2009 H+ H+ H+ H+ H+ H+ ATP4ADP3- e- H+ O2 H+ Pi- H2O Transfert d’électrons Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 Synthèse d’ATP fuite O O22 ~ + ∆∆µ µHH+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 O O22 e- substrat rédox H+ H+ H+ H2O H+ O2 ATP4- P iADP3- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ~ + ∆∆µ µHH+ O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ H2O H+ O2 ~ + ∆∆µ µHH+ H+ P iADP3ATP4- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ADP ADP ATP ATP ADP O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ H2O H+ O2 ~ + ∆∆µ µHH+ H+ P iADP3ATP4- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ADP ADP ATP ATP ADP O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ découplant H2O H+ O2 H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ~ + ∆∆µ µHH+ ADP ADP ATP ATP ADP « pseudo –état 4 » O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ « état 3 » « état 4 » découplant H2O H+ O2 ~ + ∆∆µ µHH+ H+ P iADP3ATP4- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ADP ADP ATP ATP ADP découplé Couplage énergétique et histoire de robinets (voir animations jointes) démarrage.ppt: établissement de la force protomotrice jusqu'à l'état stationnaire (basal), avec arrêt et bilan des flux. stationnaire.ppt: animation cyclique (continue) de l'état 3 basal. ajout_ADP.ppt: depuis l'addition d'ADP jusqu'à l'état 3, avec arrêt et bilan des flux. état 3.ppt: animation cyclique (continue) de l'état 3 stationnaire. état 3_tout.ppt: de l'état 3 à l'état 4, avec arrêt et bilan des flux. découplé1: addition d'un découplant sur état basal, avec arrêt et bilan des flux à l'état découplé. découplé2: animation cyclique (continue) de l'état découplé. Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 Couplage énergétique et histoire de bagnole Les vieux bioénergéticiens pré-Mitchelliens avaient classé en trois catégories, qui restent pertinentes, les substances qui agissent sur la respiration et la synthèse d’ATP des mitochondries isolées: Les inhibiteurs de la chaîne respiratoire, qui inhibent à la fois la vitesse de respiration et la synthèse d’ATP. Ils agissent sur le transfert d’électrons. Les découplants, qui inhibent la synthèse d’ATP et stimulent la chaîne respiratoire. Ils perméabilisent la membrane interne aux ions, en particulier aux ions H+. Les inhibiteurs du transfert d’énergie, qui inhibent à la fois la vitesse de respiration et la synthèse d’ATP. Ils se distinguent des inhibiteurs de la chaîne respiratoire par le fait que l’inhibition de la chaîne respiratoire n’est jamais totale et qu’elle peut ici être levée par l’addition d’un découplant. Ceci prouve que leur effet sur la chaîne respiratoire n’est qu’indirect (via la force protomotrice). Ils agissent en effet soit sur l’ATP synthase, soit sur l’échangeur ATP/ADP, soit sur le transporteur de phosphate. Si l’on compare à ce qui se passe dans une voiture, on peut oser la comparaison suivante: La rotation du moteur représente l’activité de la chaîne respiratoire et le mouvement de la voiture la synthèse d’ATP. Ajouter un inhibiteur de la chaîne respiratoire revient à lever le pied de l’accélérateur pour diminuer les gaz (ou à couper le contact si l’inhibition est totale). Ajouter un découplant revient à débrayer. Ajouter un inhibiteur du transfert d’énergie revient à freiner. Au risque de caler, sauf si l’embrayage patine (= fuite). Quand à la boîte de vitesses, elle permet de faire varier la stoechiométrie H+/e, donc le rapport ADP/O… Voilà ce que c’est de trop penser à la stoechiométrie H+/e… Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 « pseudo –état 4 » O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ « état 3 » « état 4 » découplant H2O H+ O2 ~ + ∆∆µ µHH+ H+ P iADP3ATP4- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ADP ADP ATP ATP ADP découplé O O22 e- substrat rédox H+ ADP H+ H+ J O 2 découplant H2O H+ O2 ~ + ∆∆µ µHH+ H+ P i- J AT P ADP3ATP4- H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ADP ADP ATP ATP ADP eH+ H+ H+ H+/O ou H+/(2 e-) H2O H+ O2 H+ P i- ATP/O = ADP3ATP4- H+/ATP H+ H+ Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 ↘ρ JATP JO = H+/O H+/ATP xρ ADP/O = ADP injecté O consommé Oxygène consommé pendant l’état 3 O O22 substrat rédox ADP ADP/O = ATP/O si : 1) fuites négligeables; 2) ADP intégralement transformé en ATP Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010 Atelier GDR 3159- Bordeaux 2010