TP OBSERVATION MICROSCOPIQUE -ETUDIANTS

Univsité Badji Mokhtar – Annaba
Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 1
TP n°01 : Observation d’un frottis sanguin
par microscope optique.
Objectifs :
- Préparer un frottis sanguin.
- Observation de la morphologie des constituants du sang
- Observer un frottis sanguin coloré au grossissement x40, et repérer sur ce frottis les différentes cellules
sanguines
 Principe :
1- La préparation d’un frottis sanguin :
Le frottis sanguin sert à évaluer la taille et la morphologie des différents constituants du sang « la taille
et la forme des érythrocytes, l’aspect et la différenciation des leucocytes
2- Observation par microscope
 Protocole
Frottis sur lame :
 Déposer une goutte de sang de taille moyenne à 01 cm de l'extrémité d'une lame dégraissé.
 Placer sur la goutte au contact de l’arête d’une lame ou une lamelle inclinée à 45° de façon à ce que
le sang s'étale par capillarité.
 Pousser rapidement la deuxième lame maintenue à 45° le long de la lame pour étaler uniformément la
goutte (frottis)
 Si la taille de la goutte est convenable, le frottis doit se terminer à 01 cm environ de l’autre extrémité
de la lame

Univsité Badji Mokhtar – Annaba
Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 2
Coloration de May Grünwald- Giemsa :C’est une association de deux types de colorants :
May Grünwald
Giemsa
Une solution d’éosine et bleu de méthylène
dans le méthanol.
Une solution d’éosine et de dérivé bleu de
méthylène (azur de méthylène) dans le
méthanol et le glycérol.
 Mode opératoire
Etapes
Manipulations
Durées d’action
1 - Coloration au May -
Grünwald
- Placer la lame du frottis sur les barrettes de
support horizontal d’un bac de coloration.
- Recouvrir le frottis de 15 gouttes de
colorant.
3 minutes
2 - Coloration au May –
Grünwald (suite)
- Ajouter 15 gouttes d’eau distillée.
2 minutes
3 - Coloration au Giemsa
- Eliminer le May – Grünwald sous un
faible courant d’eau distillée.
- Déposer 2 gouttes de Giemsa puis 20
gouttes d’eau distillée
10 minutes
Séchage
- Rincer par un faible jet d’eau distillée.
- Laisser sécher la lame à l’air, en position
inclinée, après avoir essuyé la face inférieure
avec du papier essuie-tout.
Au moins 5minutes
 Observation au microscope :
On procède à l’observation microscopique du frottis avec l’objectif x40.
EQUIPE MSTEV : DJEDIOUI- BOUMENDJEL -DERRADJ-BOUBIDI-BOUCHEHDANE-BOUALI-
ZEDDAM-HACHOUF-DERBAL –ZEGAOULA.

Univsité Badji Mokhtar – Annaba
Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 3
NOM –PRENOM N°POSTE GROUPE NOM DE L’ENSEIGNANT
Compte rendu TP N°01 MSTEV
OBSERVATION MICRSCOPIQUE
D’UN FROTTIS SANGUIN

Univsité Badji Mokhtar – Annaba
Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 4
La description des différentes parties du microscope à lumière :

Univsité Badji Mokhtar – Annaba
Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C)
TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 5
Les constituants du sang