Sujet de stage de Master 2 Recherche Année 2010/2011 Laboratoire :Institut de biologie Structurale Intitulé de l'équipe : Groupe Pneumocoque Directeur : Eva Pebay-Peyroula Responsable : Thierry Vernet Nom et qualité du responsable du stage : André Zapun Adresse : 41 rue Jules Horowitz 38027 Grenoble Cedex 1 Tél : 04 38 78 92 03 email : [email protected] HDR oui Spécialité MASTER : Biochimie, Biologie Structurale Titre du sujet : Assemblage in vitro de la paroi bactérienne du pneumocoque Objectifs recherchés (3 lignes max) : Comprendre le mécanisme d’assemblage de la paroi bactérienne en reconstituant in vitro les étapes finales de sa synthèse, en utilisant les protéines du pathogène humain Streptococcus pneumoniae. (lien labo: http://www.ibs.fr/laboratoires/laboratoire-d-ingenierie-des/) Résumé (10 lignes max) : La paroi bactérienne est constituée principalement par le peptidoglycane qui est un polymère de chaînes de sucres reliées par des ponts peptidiques. Les antibiotiques les plus utilisés (pénicillines) fonctionnent en empêchant l’assemblage du peptidoglycane. Pour comprendre cette synthèse et pouvoir combattre la résistance des bactéries aux antibiotiques, nous allons reproduire in vitro la formation du peptidoglycane. Pour cela, nous produisons et purifions les complexes enzymatiques de la bactérie pneumocoque qui sont responsable de l’assemblage de la paroi. L’activité de ces complexes sera alors testée in vitro et l’effet des antibiotiques sera examiné. Approches & matériel utilisés (3 lignes max) : Purification de protéines (chromatographies, électrophorèses, immunoblot), essais enzymatiques fluorescents,… Publications pertinentes de l'équipe (3 max) : Masson, S., Kern, T., Le Gouellec, A., Giustini, C., Simorre, J.-P., Callow, P., Vernet, T., Gabel, F. and Zapun, A. (2009) The central domain of DivIB caps the C-terminal regions of the FtsL/DivIC coiled-coil rod. J. Biol. Chem. 280, 27687-700. Job, V., Carapito, R., Vernet, T., Dessen, A., and Zapun, A. (2008) Common alterations in PBP1a from resistant Streptococcus pneumoniae decrease its reactivity towards -lactams: Structural insights. J. Biol. Chem. 283, 4886-94. Carapito, R., Chesnel, L., Vernet, T., and Zapun, A. (2006) Pneumococcal beta-lactam resistance due to a conformational change in penicillin-binding protein 2X. J. Biol. Chem. 281, 1771-7 Domaines de compétences souhaités (quelques mots clés) : Intérêt pour la recherche scientifique, intérêt pour les approches biochimiques in vitro des problèmes biologiques fondamentaux. Microbiologie.