T.A.S.S. 2BIO 4/11/2010 DST 1 - Techniques Spectrales Module A (1h00) Documents non autorisés - Calculatrice autorisée Justifier les calculs Séparer calcul littéral et numérique Questions de cours : (8 points) 1/ Nous disposons d’une solution d’acide chlorhydrique à 1 mol.L-1. Comment procéder pour réaliser une solution diluée au 1/5ème ? 2/ Quel modèle physique utilise-t-on pour expliquer les phénomènes d’absorption ou d’émission d’énergie rayonnante ? 3/ Pour comprendre les interactions entre rayonnement et matière, on admet que le rayonnement électromagnétique est constitué de photons dont l’énergie est donnée par la relation de Planck. - a - Rappeler les différentes expressions de la relation de Planck. - b - Calculer l’énergie E en J d’un photon de longueur d’onde λ = 5000 nm. On donne c = 3,00.108 m.s-1 et h = 6,63.10-34 J.s. - c - Convertir la longueur d’onde précédente en nombre d’onde σ exprimé en cm-1. Indiquer alors à quel domaine du rayonnement électromagnétique appartient cette longueur d’onde. 4/ Les molécules subissent 3 types de transitions quantifiées lorsqu’elles sont excitées par un rayonnement. Préciser le nom de ces transitions et indiquer pourquoi il y a 3 types de transitions possibles. 5/ Parmi les rayonnements lumineux, UV, Visible et IR, indiquer celui qui est le plus énergétique. Justifier. Exercice 1 : (4 points) L’adénine (M = 135 g.mol-1) a un coefficient d’absorption molaire ε = 1,32.104 L.mol-1.cm-1 à 265 nm. Nous considérons que la loi de Beer-Lambert est valide dans les conditions de l’exercice. 1/ Exprimer le coefficient d’absorption molaire en unité SI. ETSL, 95 rue du Dessous – des – Berges, 75 013 PARIS 1/2 T.A.S.S. 2BIO 4/11/2010 2/ Calculer l’absorbance d’une solution contenant 5,5 mg d’adénine par litre placée dans une cuve dont le trajet optique est 1 cm. (Indiquer explicitement la loi utilisée). 3/ Faire le même calcul avec une cuve dont le trajet optique est de 2 cm. 4/ Calculer la concentration massique d’une solution d’adénine présentant dans une cube de longueur b = 1 cm de trajet optique, une absorbance de 0,650. On donne la masse molaire de l’adénine : M = 135 g.mol-1. Exercice 2 : (8 points) L'absorbance dans une cuvette de 1 cm d'une solution contenant du NAD+ et du NADH est de 0,21 à 340 nm et de 0,85 à 260 nm. Les coefficients d’absorption du NAD+ et du NADH sont identiques à 260 nm et égaux à 1,8.107 cm².mol-1. Le NADH a un coefficient d’absorption de 6,22.106 cm².mol-1 à 340 nm. Le NAD+ n’absorbe pas à 340 nm. 1/ Calculer les concentrations respectives de NAD+ et de NADH dans la solution. 2/ On mélange 1 volume de cette solution à 1 volume égal d'une autre solution à 15 µmol.L-1 de pyruvate et de la lactate déshydrogénase en excès. On suppose que la réaction : pyruvate + NADH → lactate + NAD+ catalysée par cette enzyme est totale. Calculer en fin de réaction les absorbances à 340 et 260 nm dans une cuve de 0,5 cm (on supposera qu'aucune autre substance que NAD+ et NADH n'absorbe aux longueurs d'onde considérées). ETSL, 95 rue du Dessous – des – Berges, 75 013 PARIS 2/2