Bacterio pieds diabetiques et pathogénicité - Infectio

ANALYSE BACTERIOLOGIQUE
QUANTITATIVE ET QUALITATIVE
DE BIOPSIES OSSEUSES
DE PIEDS DIABETIQUES
ET RECHERCHE DES FACTEURS DE
PATHOGENICITE
Florence BAUDOUX
Diabétologue CHRU de Lille
04 octobre 2011
Pourquoi s’intéresser à l’ostéite dans
l’infection du pied diabétique?
 L’infection osseuse complique 1 /3 à 2/3 des
plaies chroniques du pied  36% des patients qui ont une ostéite
subissent une amputation durant le suivi.
 68% des patients qui ont subi une
amputation seront amputés une seconde fois
dans les 5 ans;
 Mortalité dans les 5 ans suivant l’amputation
initiale est de 50%.
sey, S.D. et al. Incidence, outcomes, and cost of foot ulcers in patients with diabetes. Diabetes Care 22, 382 -387 (1999).
er MG. The fate of the second leg in the diabetic amputee. Diabetes 1960;9:100-3
ehouse, F.W., Jurgensen, C. & Block, M.A. The later life of the diabetic amputee. Another look at fate of the second leg. Diabetes 17, 520-521 (1968).
Objectifs de l’étude
 Caractériser la microbiologie de
l’ostéite du pied diabétique
Quantité
Qualité
 Caractériser l’organisation des
bactéries dans l’os
 Caractériser les staphylocoques
Capacité d’adhérence
Capacité à créer un biofilm
Matériel et méthode
Etude prospective réalisée entre
février 2010 à mai 2011.
Tout patient diabétique présentant
une ostéite du pied nécessitant une
biopsie osseuse et/ou une
amputation.
Ostéite prouvée par clinique + radio ou
IRM
Hôpital Claude Huriez, CHRU Lille
Centre hospitalier de Tourcoing
2 à 3 biopsies osseuses
1 à 2 biopsies
Quantitatif , qualitatif
1 biopsie
MEB
Laboratoire de bacteriologie clinique, Faculté de Pharmacie U995
Université Lille 1
n= 38 prélèvements ; 35 patients
65,8% d’hommes
89.4% diabétiques de type II
âge moyen 65 ans.
55% chirurgie orthopédique du CH de
Tourcoing
 33% étaient conclus stériles (n=7) par le
laboratoire de routine.
45% chirurgie vasculaire du CHRU de
Lille.
 23% étaient conclus stériles (n=4).
0
50
g
c/ mm
f
u
ra
d’
og par g
l
3,7 ies
tér
c
a
0b
’o s
d
e
Bactérie identifiée dans l’ostéite
Cocci Gram+
Bacille Gram+
nb
Staphylococcus aureus
12
Staphylococcus capitis
2
Staphylococcus caprae
2
Staphylococcus epidermidis
9
Staphylococcus lugdunensis
2
Staphylococcus pettenkoferi
2
Staphylococcus sciuri
1
Staphylococcus simulans
1
Staphylococcus warneri
2
Staphylococcus sp
1
Micrococcus luteus
1
Micrococcus sp
1
Streptococcus agalactiae
1
Enterococcus faecalis
5
Enterococcus faecium
1
Corynebacterium
10
Dermabacter hominis
2
Citrobacter diversus
1
Enterobacter cloacae
3
Escherichia coli
2
Serratia liquefaciens
1
Serratia marcescens
2
Proteus mirabilis
3
Providencia rettgeri
1
Morganella morganii
1
Autres BGN
Pseudomonas aeruginosa
1
Anaérobie
Anaerococcus prevotii
1
Finegoldia magna
2
Propionibacterium acnes
2
Veillonella
2
Bacille Gram Entérobactérie
77 souches identifiées:
28% staphylocoques coagulase négative
15,3% Staphyloccus aureus
12,8% Corynebacterium
 Ostéite chronique:
 1,76 bactéries/ plvt
 15.4% des souches
sont des anaérobies
 28,6% des plvts:
présence
d’anaérobies.
Caractéristiques des staphylocoques
Capacité à dégrader le collagène
Gélatinase
Exprimée par 58% des staphylocoques
11/12 des S.aureus
8/22 des staphylocoques coagulase
négative
Capacité à produire un
exopolysaccharide
 Test au Rouge congo
 65% de positivité
70% des Staphylococcus aureus
 Sur plaie chronique
 55 souches de S. aureus: 69% +
 20 souches S. epidermidis 73% +
 Nasopharynx
 146 Staphylococcus epidermidis 58,9% +
 Los, R. et al. A comparative analysis of phenotypic and genotypic methods for the determination
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Podbielska, A., Galkowska, H., Stelmach, E., Mlynarczyk, G. & Olszewski, W.L. Slime production by Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis strains isolated from patients
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Capacité d’adhérence à une surface
Test au crystal violet
La positivité est définie par une
6%
,
6
7
densité optique à 570 nm >0,2
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MEB
Perspectives
Poursuite de la collection
bactérienne
Evaluation moléculaire
Collaboration avec l’équipe du Dr.
Brad Spellberg of UCLA
Evaluation en microscopie
électronique des biofilms formés sur
disques de biocéramique.