INDICATIONS DU DIAGNOSTIC PRÉNATAL CHROMOSOMIQUE Diagnostic prénatal • Permettre un DPN – Éviter la naissance d ’un enfant porteur d ’une maladie sévère dans une famille connue • Recours à l ’IMG • Non obligatoire • Bonne information de la famille – Demande familiale DPN • Le diagnostic prénatal – Risque 1/4 en général (1/2 pour dominant) – Échographie précoce • 8-9 SA pour dater grossesse (jumeaux ?) – Trophoblaste à 12 SA • Etude génétique • Caryotype – Résultats en 3 à 10 jours (3 semaines X fra) – Proposition IMG 1/4 … La sécurité sociale rembourse le DAN dans < les indications suivantes: Age maternel supérieur ou égal à 38 ans à la date du prélèvement. Anomalie chromosomique parentale. Antécédent pour le couple, de grossesse(s) avec caryotype anormal. Diagnostic de sexe pour les maladies liées au sexe. Signes d’appel échographiques suivants : - Anomalies morphologiques fœtales démontrées internes ou externes, - Retard de croissance intra-utérin avéré, - Anomalies de la quantité de liquide amniotique. - Marqueurs sériques > 1/250. LES AUTRES INDICATIONS CONVENANCE PERSONNELLE DÉCÈS IN UTÉRO INEXPLIQUÉ AMNIOCENTÈSE POUR AUTRE INDICATION Evolution du diagnostic chromosomique prénatal en France Depuis 1970 1973 mise en place du DAN en France 1974 existence de 5 centres agréés 1980 convention nationale fixe âge maternel à 38 ans (2759 prélèvements) 1983 existence de 23 centres agréés 1990 (24428 prélèvements) 1999 (84609 prélèvements) 2000 (78849 prélèvements) 72 Laboratoires agréés ASPECTS LÉGISLATIFS CONSENTEMENT DE LA FEMME ENCEINTE À LA RÉALISATION EN VUE DE DIAGNOSTIC PRÉNATAL IN UTERO D’ UNE ANALYSE ÉNUMÉRÉE À L ’ARTICLE R. 162-16-1 DU CODE DE LA SANTÉ PUBLIQUE. ARRÊTÉ DU 30 SEPTEMBRE 1997. LE LABORATOIRE DOIT ÊTRE AGRÉÉ PAR LE MINISTÈRE DE LA SANTÉ QUEL TYPE DE PRÉLÈVEMENT ? LIQUIDE AMNIOTIQUE (93%) VILLOSITÉS CHORIALES (6%) SANG FŒTAL (1%) À QUEL TERME ? 14-15 SA (LA) 10-11 SA (VC) > 18 SA (PSF) Prélèvements prénataux • Précoce – 11-12 SA • Trophoblaste • Trans-abdominal • Risque de FCS de 1/100 PONCTION DE VILLOSITES CHORIALES Ponction de villosités choriales • Depuis 1983 • Diagnostic prénatal chromosomique dès le 1er trimestre de grossesse • Diagnostic rapide et précoce • En cas d’anomalie : IMG à un terme plus précoce Prélèvement de villosités choriales (1) : transcervical Prélèvement de villosités choriales (2): transabdominal Rappel embryologique • Implantation de l’œuf dans la cavité utérine 6 jours après la fécondation • Au moment de la nidation – Masse cellulaire centrale : bouton embryonnaire – Couronne périphérique : trophoblaste (5ème jour) Masse cellulaire interne = bouton embryonnaire Trophoblaste Risques • Fausses couches (1%) • Anomalies de membre – Prélèvement précoce (< 8-9 SA) • Infections (rare) • Douleurs abdominales (1-2%) • Immunisation Rhésus (Ig spécifiques antiD) Amniocentèse • Plus tardif • Amniocentèse 17SA • Risque de FCS de 1/200 L ’AMNIOCENTÈSE EST UN GESTE STÉRILE Prélèvement de liquide amniotique CULTURE CELLULAIRE POUR LA RÉALISATION D’ UN CARYOTYPE CULTURE CELLULAIRE POUR LA RÉALISATION D’ UN CARYOTYPE Cordocentèse (PSF) Comparaison des méthodes de DPN Prélèvement Choriocentèse Amniocentèse Cordocentèse Nature Villosités trophoblastiques Liquide amniotique Sang foetal Terme 10-13 SA 15-32 SA ou + 20-40 SA Matériel ADN fœtal Caryo placentaire ADN fœtal Caryo fœtal Liq amnio (bioch.) ADN fœtal Caryo fœtal Sérum… foetal Délais examen cyto Direct: 1 j Culture : 1-2sem Culture: 10 j-3 sem Culture : 3 j Risque fœtal 0,5% 2% 2-5% RÉSULTATS DE 64 LABORATOIRES SUR 72 AGRÉÉS EN FRANCE POUR L’ANNÉE 2OOO 78849 caryotypes 2766 anomalies (3,5%) (315) 0,4 % D’échecs de culture TRISOMIE 21 TRISOMIE 18 TRISOMIE 13 SYNDROMES TURNÉRIENS AUTRES AN. GONOSOMES TRIPLOÏDIE 47,82% 14,56% 5,61% 10,31% 8,95% 2,92% > 90% SONT DES ANOMALIES DE NOMBRE Répartition des prélèvements selon les indications 6,4% ANOMALIE PARENTALE 1% ATCD FRATRIE 2% SEXE 0% AUTRES 9% MSM 36% 40% ANOMALIE ECHO 18% 16,76% AGE MATERNEL 34% 34,12% MSM AGE MATERNEL ANOMALIE ECHOGRAPHIQUE ANOMALIE PARENTALE SEXE ATCD FRATRIE AUTRES Répartition des anomalies déséquilibrées 9,82% 2,92% triploïdie 3% Divers 10% Anom. Gonosomes 11% 8,95% trisomie 21 47% 47,82% 45,X 8% 10,31% trisomie 18 14% 14,56% trisomie 13 7% trisomie 21 trisomie 13 trisomie 18 5,61% 45,X Anom. Gonosomes triploïdie Divers Fréquences des anomalies sur Signes d’ Appel Echographiques Clarté nuque SAE autres Nb caryo 3169 6929 Déséquilib res 322 Tri 21 186 Tri 13 10,16 770 11,11 57,76 5,87 220 28,57 3,18 20 6,21 0,63 66 8,57 0,95 Tri 18 52 16,15 1,64 203 26,36 2,93 45,X 40 12,42 1,26 131 17,01 1,89 Anom.Gono somes 7 2,17 0,22 26 3,38 0,38 Triploïdie 7 2,17 0,22 40 5,19 0,58 Divers 10 3,11 0,32 84 10,91 1,21 Anom. Equilib. 17 0,54 23 0,33 FRÉQUENCE DES ANOMALIES EN FONCTION DES INDICATIONS TRISOMIE 21 LA + FRÉQUENTE DANS TOUS LES GROUPES SAUF DANS « ANOMALIES PARENTALES » TRISOMIE 18 AUGMENTE RÉGULIÈREMENT MAIS DÉPISTAGE PRÉCOCE SYNDROMES TURNÉRIENS DÉPISTÉS SURTOUT DANS LES S.A. ÉCHOGRAPHIQUES DEVENIR DES GROSSESSES APRÈS LE DAN Turner (235 cas) Klinefelter (72 cas) 47,XXX 47,XYY Mosaïques gonosomes 77,4% IMG 41,7% IMG 18,5% IMG 6,5% IMG 2/11 IMG Anomalies du caryotype équilibrées 0,10% de novo 29,78% héritées 78% 24% 10% 15% 3/12 Exemple d’anomalie du caryotype - Anomalie de nombre Trisomie 18 Trisomie 18 • Dysmorphie moins spécifique – Plus rare; 1/6000 – Plus malformatif • Repérage plus fréquent par l’échographie – RCIU – Oligoamnios ou hydramnios – Malformations majeures (+ MAINS ++) Trisomie 18, prénatal • Association • Crâne « rond » (occiput plat, étroitesse bifrontale) – Ouverture large de la métopique – Plexus choroïdes dilatés – Dilatation ventriculaire fréquente • Oreilles inhabituelles, basses et orientées en arrière • Micro-rétrognathisme et petite bouche Évolution postnatale • Pathologie neurologique sévère – Retard psychomoteur sévère • 5 à 10% des enfants survivent à la première année – Malformations ++ • Malformations multiples – Cardiopathies, anomalies digestives, faciales, etc... – Mains crispées +++ Trisomie 21 ou syndrome de Down • En 1866, décrit par Down • En 1959, est corrélée au chromosome 21 excédentaire • 92% sont homogènes libres • 5% par translocation robertsonienne • 3% sont en mosaïque - 1/700 naissances, tout âge confondu, la fréquence augmente avec l’âge maternel (par anomalies de disjonction) - Hypotonie à la naissance, hypertélorisme, oreilles bas implantées, macroglossie - 50% ont une malformation cardiaque ANOMALIE DE NOMBRE AUTOSOMIQUE Trisomie 13 • Des anomalies du système nerveux –Holoproencéphalie est la malformation la plus fréquente (50%) –Dilatation du carrefour ventriculaire –Élargissement de la fosse postérieure Trisomie 13 • Anomalie du visage – Diminution de la distance inter-orbitaire (hypotélorisme) pouvant aller jusqu’à la présence d’un seul œil réalisant l’aspect en cyclope – Division labio-palatine Trisomie 13 • Anomalie des reins – Hydronéphrose – Augmentation du volume des reins • Anomalies du cœur – Communication inter-ventriculaire – Dysplasie valvulaires – Tétralogie de Fallot • Anomalies des membres : – Polydactylie – Pied-bot • Anomalie de l’abdomen – Omphalocèle – Extrophie vésicale Anomalie gonosomique (GTG) 47, XXY DOUBLE ANOMALIE DE NOMBRE DÉPISTAGE RAPIDE DES PRINCIPALES PRIN CIPALES ANOM AN OM ALIES CHROM OSOM IQ UES N UM ÉRIQ UES PRIN CIPE DE LA FISH FISH FLUO RESCENCE FLUORESCEN CE IN -SITU HYBRIDIZATION HYBRIDIZATIO N M ÉTHO DE D’IDEN TIFICATIO N M OLÉCULAIRE ÉTHODE TIFICATION O LÉCULAIRE BASÉE SUR LA VISUALISATION VISUALISATIO N D’UN CHRO M O SO M E O U D’UN E PO RTIO N DE OSOM OU RTION CHRO M OSOM DES CHROM O SO ME PAR DES SON SO NDES FLUORESCEN UT O U FLUO RESCENTES, SPÉCIFIQ UES DE TO TOUT PARTIE DE CHROM ME CHRO M OSO O SOM (FISH IN TERPHASIQ UE O U M ÉTAPHASIQ UE) OU PRIN CIPE DE LA FISH TRISOMIE 21 SUR AMNIOCYTE 21 18 TRISOMIE 18 SUR AMNIOCYTES 18 18 X Y 18 FISH D ’UN CENTROMÈRE PEINTURE SPÉCIFIQUE D ’UN CHROMOSOME PEINTURE SPÉCIFIQUE D ’UN CHROMOSOME CONCLUSION Pratique du DPN stable depuis 1997 1° Indication : MSM Poursuite de la grossesse si diag. De Tri 21 est rare <1/1000 Nécessité d ’un consensus des cytogénéticiens dans les différents centres multidisciplinaires sur les conduites à tenir en fonction de l’anomalie Retrouvée 700 000 Naissances en 2000 =11% de Dg Prénataux Centre de DPI (Clamart) • Fécondation In Vitro – Proposée si troubles de fertilité associés – Si ATCD 3 IMG après DPN – Maladies dominantes • Steinert – Délai d’attente • Mise au point de la technique • Réussite FIV 10 à 20% Le diagnostic pré implantatoire et ses problèmes.. Marc Le Lorc’h Service Histo Embryo Cytogénétique Pr Vekemans Hôpital Necker-Enfants Malades Pr Tachdjian BDR Béclère Le Diagnostic pré-implantatoire Fécondation in vitro + Techniques de biologie moléculaire PCR FISH DPI Couple à risque Fécondation in vitro Biopsie 3° jour Analyse PCR ou FISH Historique • 1978 : Louisa Brown naît en Angleterre (F.I.V.) • 1981 : Amandine • 1991 : 1er DPI pour mucoviscidose (GB) • 1992 : première naissance par DPI (GB) • 2000 : Valentin D.P.I. - Pourquoi? • 1) Patients fertiles porteurs d’une maladie génétique grave et incurable. 70% • 2) Patients de la PMA porteurs d’une anomalie 30% génétique • 3) Patientes d’âge avancé, échecs répétés de FIV ou fausses couches spontanées récurrentes. (50%) La législation française Loi : L94-654 (29 juillet 1994) article L162-17 Le diagnostic biologique effectué à partir de cellules prélevées sur l’embryon in vitro : - Autorisé qu’à titre exceptionnel -Indication attestée par un médecin d’un centre de DPN pluridisciplinaire - Forte probabilité de donner naissance à un enfant atteint d’une maladie génétique d’une particulière gravité reconnue comme incurable au moment du diagnostic La législation française Article L162-17 - Anomalie(s) responsable(s) doivent être préalablement identifiées - Consentement écrit du couple - Recherche uniquement de cette anomalie - Etablissement spécifiquement autorisé auprès de l’Agence de la Biomédecine. Arrêté du 20 juillet 1999 / 7 janvier 2000 Autorisation à 3 centres en France : PARIS STRASBOURG MONTPELLIER Les étapes du DPI: un long processus! • Consultation multidisciplinaire 84% • Bilan de fertilité 12-18 mois • • • • Etude de faisabilité Stimulation ovarienne Ponction ovocytaire Fécondation par ICSI 33% annulation 10 en moyenne 62% • Biopsie J3 97% • DPI: (PCR / FISH) 86% • Transfert J4 • Echographie / b hCG 25% • Accouchement 18% Intervenants au cours d’un DPI Obstétricien Sage-Femme Généticien Biologiste de reproduction Centre pluridisciplinaire Cytogénéticien Biologiste moléculaire Psychologue Assistante sociale Néonatalogiste Les Techniques - La biopsie embryonnaire - La PCR - La FISH I.C.S.I Le clivage du zygote •Lent •Asynchrone (étapes à 3,5,6 cellules) •Holoblastique rotationnel A B La biopsie embryonnaire • Globule polaire: genotype ovocytaire •Morula: stade 6-8 blastomères •Blastocyste: 36% parviennent à ce stade La biopsie Les Techniques - La biopsie embryonnaire - La PCR - La FISH Analyse de l’ embryon ADN “Tubage” et lyse cellulaire PCR Les difficultés du DPI • Les risques de contamination Cellules du manipulateur Cellules de la mère Spermatozoïde Fragment d’ADN (amplification précédente) Les difficultés du DPI • La qualité des embryons Embryon mosaîque Absence de noyau Noyau en dégénérescence / mauvaise morphologie Pas de diagnostic CM CN CM CN Erreur de diagnostic Pathologies étudiées Mucoviscidose (deltaF508) Amyotrophie Spinale Myopathie de Duchenne Myotonie de Steinert Drépanocytose Mutations rares Analyse Indirecte xq28 Total: Nb de Nb de DPI Nb demandes Grossesses 18 18 20 32 6 24 10 12 11 3 2 1 Déficit en OTC 1 2 Hémoglobinopatie 1 1 Dysplasie diatrophique 2 Maladie de Hunter 1 Lissencéphalie liée à l’X 1 Mucoviscidose (non dF508) X-fragile HémophilieA Incontinentia Pigmenti Hydrocéphalie liée à l’X Adrénoleucodystrophie (ALD) 17 13 8 2 3 1 144 5 2 1 63 11 Les difficultés du DPI moléculaire • Trouver les conditions d’amplifications • Avoir une méthode de détection des mutations rapide et fiable La mise au point de chaque diagnostic est longue et délicate, on essaie de développer des tests applicables à une majorité de couples à risque de transmettre une même pathologie. (30 maladies monogéniques proposées au DPI. ¾5000 maladies rares associées à la mutation d’un gène unique) Les Techniques - La biopsie embryonnaire - La PCR - La FISH L’hybridation in situ avec des sondes fluorescentes le DPI chromosomique Critères d’éligibilité du DPI chromosomique Une anomalie chromosomique • 1- Age maternel (réserve ovarienne) • 2- Nombre de grossesses avec déséquilibre • 3- Pas d’enfant normal vivant D.P.I. cytogénétique : technique X Y Fluorescent In situ Hybridisation ou FISH DPI cytogénétique étapes techniques : 1 -Etalement des blastomères -Fixation du blastomère 2 - Eliminer les débris cytoplasmiques (pepsine) -Hybridation (16 heures) FISH interphasique 3 DPI des anomalies chromosomiques • FISH interphasique (« en aveugle ») • Détecter les déséquilibres génomiques post méïotique de translocations équilibrées parentales Méthode: FISH interphasique ETAPES TECHNIQUES : - ETALEMENT DES BLASTOMERES - ELIMINER LES DEBRIS CYTOPLASMIQUES (pepsine) - FIXATION DU BLASTOMERE - HYBRIDATION (16 heures) L PROBLEME DES SONDES LE La stratégie « NECKER » • Sondes « maison » validées • Test sur lymphocytes témoins • Test sur le couple (vérification de la translocation, détection de polymorphismes) • Double lecture Mauvaise hybridation Faux négatifs Transfert d’embryons atteints Faux positifs Moins d’embryons pour le transfert Utilisation de la FISH dans le DPI •Maladies récessives liées à l’X (tri des embryons) •Translocations •Recherche d’aneuploïdies (déséquilibres dans le nombre de chromosomes) Détermination du sexe des embryons Féminin Masculin Translocation robertsonienne Les ségrégations méiotiques: diagramme du pachytène 14 13 Segregation meïotique chez les porteurs de translocation robertsonienne D.P.I. -Translocation robertsonienne + D.P.I - translocation robertsonienne Embryons non transférés D.P.I - Translocation réciproque t(11;22)(q23;q11) 11 der 11 22 der 22 t(11;22)(q23;q11) Résultats de FISH théoriques Alterne Normal 3:1 segregation Equilibré Adjacent 1 der(11) (-11) +der(11) (-11)(-22)+der(22) +der(22) (-11)(-22)+der(11) der(22) (-22) (-22)+der(11)+der(22) (-11) Adjacent 2 (-11)+der(22) (-22)+der(11) (-11)+der(11)+der(22) (-22) t(11;22)(q23;q11) Blastomère équilibré Blastomère adjacent 1 ( tri 22q et mono 11q) trivalent ségrégation méiotique B alterne normal équilibré déséquilibré déséquilibré déséquilibré déséquilibré adjacente A C quadrivalent ségrégation méiotique alterne normal équilibré B adjacente I déséquilibré déséquilibré déséquilibré déséquilibré adjacente II A C Allèle muté F508del A B C Allèle sauvage Les Problèmes: • Pour le biologiste • Pour le couple • Pour la société: l’éthique et la loi. Pour le biologiste: les difficultés techniques • Une cellule par lame •Signal ou bruit de fond? (erreurs diagnostiques: PCR 3%;FISH 1%) • Analyse en moins de 24 heures •Mosaïques embryonnaires (Mise au point longue et lourde pour chaque test: entre 3 et 6 mois) Le problème des mosaïques Iwarsson et al. Mol Hum Reprod 1999, 104:376-382 X, Y, 15, 16, 17, 18 Embryon normal homogène (27%) Embryon mosaïque normal/anormal (45%) Embryon anormal (12,5%) Embryon chaotique avec cellules normales ou non (15%) Notre expérience FAMA Necker-Béclère (résultats préliminaires) • Étude des embryons non transférés: 8 robertsoniennes 8 réciproques 24 embryons 24 embryons 4 embryons mosaïques (17%) 7 mosaïques (29%) La littérature: De 20 à 45% des embryons sont mosaïques (Wilton, 2002) J3 FISH Quelques chiffres •De 20 à 45% des embryons sont mosaïques (Wilton, 2002) J3 FISH •1 à 2% à 10-12SA sur villosités choriales (Kalousek et Veckemans,1996) Caryotype •0,1 à 0,4% à 16-18SA sur amniocentèse (Hsu et Perlis, 1990) Caryotype •A la naissance? Les mosaïques-conclusion •Taux de mosaïcisme important. •Biopsie de deux blastomères. •Information aux couples lors de la consultation. •Diagnostic prénatal. Les difficultés pour le couple - La nécessité de passer par la FIV -Les faibles taux de grossesse -Les risques de grossesse gemellaire 27% - Le nombre restreint de diagnostics disponibles - Les délais d’attente - Délais techniques incompatibles avec les délais biologiques. RAPPORT D ’ACTIVITES DPI 2004-2005 FAMA Hôpitaux Necker-Enfants Malades /Antoine Béclère Consultation (2004) Histoire et antécédents Moléculaire 73 couples Enfants atteints 29 Enfants décédés 11 Enfants sains 21 Nombre d ’I.M.G. 73 Nombre de F.C.S. Génétique et Infertilité 9,5 % (7/73) Cytogénétique 89 couples 8 4 16 16 158 41 % (37/89) REMANIEMENTS CHROMOSOMIQUES COUPLES PRIS EN CHARGE ET TENTATIVES 2005 Robertsonienne COUPLES PONCTIONS % embryons équilibrés 17 18 60% Réciproque 21 17 25% Diag de sexe 3 2 50% ESHRE PGD Consortium Créé en 1997 Données 1999-2004 : Centres enregistrés : Nombre de cycles FISH: Nombre de cycles PCR: Nombre de grossesses : Nombre de naissances : Nombre de faux diagnostics: Human Reproduction Vol 22;n°2 pp323-326, 2007 5O 6400 1500 1500 1000 >3? Quelques chiffres • En France en 2005: 774 600 naissances • 100 centres agréés F.I.V. – 39 000 FIV par an dont 10 000 I.C.S.I. – 10 000 naissances par P.M.A • 3 centres agréés D.P.I. – 575 D.P.I. – 65 naissances (2000-déc 2005) L’embryon est une personne • Chez les grecs anciens »l ’animation du fœtus intervient au 40 ème jour pour les embryons mâles et au 83 ème jour pour les embryons féminins • Notion de pré embryon (14 jours) GB et Espagne La situation en Europe • DPI autorisé avec loi spécifique: Danemark, Espagne, France, Norvège, suède. • DPI autorisé sans loi spécifique: Belgique, Finlande Grèce, Italie, pays-Bas, Royaume-Uni. • DPI interdit: Allemagne, Autriche, Irlande, Suisse. ¾ Des divergences profondes. ¾ Notion de tourisme médical. LES LEGISLATIONS EUROPEENNES: des disparités importantes. FRANCE ITALIE ESPAGNE 1991:interdiction des mères porteuses. Lois de bioéthique:1994 D.P.I. autorisé. GRANDE BRETAGNE IRLANDE Interdit. D.P.I. en sursis Recherches sur embryon humain pour 5ans. Lois de bioéthique:1988 D.P.I. autorisé. 1 cas de selection de sexe pour convenances personnelles. F.I.V. pour couples stable F.I.V. pour couples stable F.I.V. autorisée pour les depuis 2 ans. Femmes celibataires depuis 2 ans. Don de sperme anonyme et gratuit. 30 000embryons congelés Pas de congélation (1 800 orphelins*) des embryons I.V.G. autorisée depuis 1975.( <12 semaines de grossesse). ALLEMAGNE D.P.I. interdit. D.P.I. autorisé. F.I.V pour couple marié. Les spzs doivent provenir du mari. F.I.V. autorisée pour les couples homo et célibataires. Interdit. Utilisation du sperme post mortem autorisé Utilisation du sperme du mari décédé pendant 6 mois. Pas de congélation des embryons. I.V.G. < 23 semaines. Interdit. La législation française Article L162-17 -Anomalie(s) responsable(s) doivent être préalablement identifiées - Consentement écrit du couple - Recherche uniquement de cette anomalie - Etablissement spécifiquement autorisé auprès de l’Agence de Biomedecine. Le diagnostic des aneuploïdies aneuploidy screening •But: améliorer les résultats de la F.I.V. •Il s’agit de dépister des anomalies touchant d’autres chromosomes que ceux de la translocation du couple. ( 21, 13, 16, 18, 22..) •ESHRE: la majorité des centres pratiquent ce dépistage.(14,2% à 54% des DPI) •L’avis du C.N.E. DPI et éthique • Maladies curables ou non sévères Klinefelter, Turner... • Typage HLA: (Fanconi) La position de la France Les problèmes techniques • DPI de sexe pour « convenance personnelle » (en 2003-2004: 80 cycles) • Dérives eugéniques Loi de bioéthique: art.17 Le diagnostic biologique est autorisé,à titre expérimental: ¾Le couple a donné naissance à un enfant atteint d’une maladie génétique incurable entraînant la mort dès les premières années de la vie ¾Le pronostic vital peut être amélioré de façon décisive par une thérapeutique issue d’un embryon sans atteinte à l’intégrité du corps de celui-ci. ¾Restreint à la maladie génétique Révisions des lois de bioéthique 2005 • Création de l ’Agence de la Biomédecine • Le recherche sur embryons surnuméraires OUI • Extension des diagnostics: tri 21, tri 16 NON • Sexage NON • Clonage thérapeutique et reproductif – crime contre l ’espèce humaine NON • Dépistage global sur l ’ensemble du génome NON (interprétation des résultats…) 5ans CGH sur chromosomes ADN de référence ADN test (du patient) CGH sur microarrays ADN de référence ADN test (du patient) Marquage des ADN Hybridation Révélation gain Analyse des rapports de fluorescence perte Résolution 5 Mb 1 à 3 Mb Conclusion « Une Science avec conscience » • Évaluation constante des paramètres techniques (I.C.S.I., suivi clinique des enfants) • Maladie d ’une « particulière gravité » • Nécessité de lois encadrant ces pratiques et qui évoluent.. lentement (Société, techniques..) • Réflexion européenne. Interruption médicale de grossesse • IVG – Sur demande de la mère – Sans restriction – Jusque 14 semaines d’aménorrhée • IMG – Sur demande de la mère – Doit être autorisé par un Centre Pluridisciplinaire de DPN – Jusque au terme (40 semaines d’aménorrhée) Choix parental devant un risque • Prendre le risque – DPN – DPI – Pas de DPN • Pas de risque – – – – Abstention Adoption Don de gamète (sperme, ovocyte) Don d’embryon Cytogénétique • M. Le Lorc’h • S.P Romana • M. Vekemans Moléculaire • P. Burlet • N. Gigarel • A. Munnich Necker-Enfants Malades BDR et FIV • N. Frydman • G. Tachdjian • R. Frydman Antoine Béclère