Université Mohamed Ier Faculté des Sciences Printemps 2006 Filière S. V. I. Module Génétique 2 et Biologie Moléculaire T. D. Régulation Génétique Une bactérie imaginaire E. fictionalis a besoin de deux enzymes pour métaboliser un sucre imaginaire froyose. Enzyme 1 transforme le froyose en yummose ; enzyme 2 transforme le yommose en glucose. Les deux enzymes sont issue de la traduction d’un même mRNA dont la synthèse est induite par le froyose. Cet opéron est connu pour être régulé par répression. Vous avez isoler plusieurs mutants où le métabolisme du froyose est altéré. Les mutants sont nommés A à G. A indique la séquence sauvage au site de la mutation A et A indique la séquence mutante au site A. On suppose que toute les mutations correspondent à une perte de la fonction qui inactive l’élément muté. Vous disposez d’un test qui vous permet de mesurer l’activité des deux enzymes 1 et 2. Les résultats avec les souches haploïdes sont données par la table suivante : - froyose + froyose 1) Schématisez le mode de fonctionnement de cet opéron 2) Quelles mutations sont vraisemblablement au niveau de : 1 a) Séquence codante de l’enzyme 1 b) Séquence codante de l’enzyme 2 c) Promoteur des deux enzymes d) Répresseur e) Site opérateur Vous avez ensuite construit les diploïdes suivants : - froyose + froyose 3) Expliquez le phénotypes des souches 1 à 5 . Quelles mutations sont au niveau du répresseur ? de l’opérateur ? 2 Corrigé TD Régulation Génétique 1) D’après la description de l’opérateur on le schématise comme suit : 2) La meilleur façon de résoudre ce genre de problème est d’écrire le phénotype attendu pour un emplacement de la mutation et ensuite cherchez parmi les données celles qui correspondent au phénotype prédit. Souvenez vous qu’on suppose que toutes les mutations correspondent à une perte de fonction (pas de super répresseur, etc.). a) Mutation E1 donne le phénotype suivant LLLH. La mutation D a ce phénotype b) Mutation E2 donne le phénotype suivant LLHL. Les mutations E et G ont ce phénotype c) Mutation P donne le phénotype suivant LLLL. Les mutations A et C ont ce phénotype d) Mutation R ou O donne le phénotype suivant HHHH. Les mutations F et B Ont ce phénotype. Ce qui donne la carte suivante. 3) Utilisant la notation des gène de la figure précédente. Souche 1 le génotype est Souche 2 le génotype es 3 Souche 3 le génotype est Les souches 4 et 5 impliquent des mutations soit au niveau du répresseur soit au niveau de l’opérateur. Prenant les deux cas possibles : Si Mutation au niveau du répresseur : Ce qui correspond au phénotype des mutants F, donc la mutation F est au niveau du répresseur. Si Mutation au niveau de l’opérateur : Ce qui correspond au phénotype des mutants B, donc la mutation B est au niveau de l’opérateur. Finalement la carte est : F 4