carillo - La Fed

FACULTE
De
PHARMACIE
TUTORAT UE2 2010-2011 – La cellule et les
tissus
Séance n°1 – Semaine du 20/ 09 /2010
Méthodes d’étude de la cellule – Carillo – Delbecq
Séance préparée par Cindy, Damien, Alexandra et Angélique.
QCM n°1 : A propos des notions théoriques en microscopie optique, indiquer la ou les
propositions vraies.
a) Si on diminue la longueur d’onde des rayons, on améliore le pouvoir de séparation.
b) Le pouvoir de séparation détermine la taille minimale d’un objet discernable.
c) Le grossissement d’un microscope se mesure en multipliant les grossissements des lentilles qui le
composent.
d) Il existe 4 types de fonctionnement des microscopes : en transmission, en contraste de phase, en
réflexion et en réémission.
e) Les microscopes qui travaillent en réémission nécessitent des puissances d’illumination importantes.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°2 : A propos de l’utilisation du microscope optique, indiquer la ou les propositions
vraies.
a) Pour effectuer des coupes très minces (5 à 10 microns), il faut au préalable durcir l’objet grâce à des
procédés physiques ou chimiques.
b) La fixation permet de visualiser les cellules dans un état proche du vivant.
c) Après l’enrobage, on va fixer la cellule grâce à des solutions très diluées d’aldéhyde.
d) La surfusion de la paraffine lors de la coupe permet la réalisation de coupes sériées.
e) La coupe est directement suivie par l’étape de coloration. En effet, les objets biologiques possèdent peu
de contraste à l’état naturel.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°3 : Toujours à propos de l’utilisation du microscope optique, indiquer la ou les
propositions vraies.
a)
b)
c)
d)
e)
f)
L’hématoxyline est un colorant signalétique basique qui peut colorer le noyau en bleu.
Les colorants acidophiles comme l’éosine se fixent sur les régions basiques.
La coloration de référence pour un frottis sanguin est le MGG.
Les colorants cytochimiques sont plus spécifiques que les colorants topographiques.
Pour diminuer l’effet des dioptres, on peut observer la préparation avec un objectif à immersion, avec de
l’huile de cèdre.
Toutes les réponses précédentes sont fausses.
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Tutorat UE2 – Cytologie Histologie Biologie cellulaire – Séance n° 1
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QCM n°4 : Au cours d’une intervention chirurgicale, on souhaite savoir si le foie de M. X est
atteint. Indiquer la ou les propositions vraies.
a)
b)
c)
d)
Les fragments prélevés peuvent être étudiés grâce à la méthode du frottis.
Les fragments prélevés peuvent être étudiés grâce à la méthode des « coupes à congélation »
Les « coupes à congélation » sont rapides car on n’effectue pas d’inclusion après la fixation.
Les coupes réalisées lors des extemporanées sont plus épaisses que celles faites en technique
classique.
e) La méthode utilisée pour l’analyse du foie de M.X permettra également d’étudier l’activité de ses
enzymes.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°5 : A propos des stéréomicroscopes, des microscopes à fond noir et des
microscopes à contraste de phase, indiquer la ou les propositions vraies.
Ces 3 types de microscope nécessitent un relief de l’objet à observer.
Ces 3 types de microscope travaillent en réflexion.
Le microscope à fond noir est habituellement utilisé lors des interventions chirurgicales.
Le microscope à fond noir permet d’estimer précisément la forme d’objet à la limite du pouvoir
séparateur.
e) Le microscope à fond noir permet d’estimer précisément la dimension d’objet à la limite du pouvoir
séparateur.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
a)
b)
c)
d)
QCM n°6 : A propos des microscopes optiques, indiquer la ou les propositions vraies
vraie(s).
a) En microscopie à fluorescence, l’utilisation de longueur d’onde inférieure à 400nm permet un gain en
pouvoir de résolution.
b) La microscopie confocale et la déconvolution permettent d’améliorer le pouvoir de résolution.
c) La déconvolution est une méthode très simple qui consiste à appliquer une fonction mathématique pour
obtenir une image nette, cette méthode est donc utilisée très souvent.
d) Pour améliorer la netteté de l’image, la microscopie confocale utilise un sténopé que l’on va placer sur
un plan image identique pour tous les objectifs.
e) La microscopie multiphotonique est une technique peu utilisé car elle utilise des infrarouges qui brulent
les tissus traversés.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°7 : A propos de la microscopie électronique, indiquer la ou les propositions vraies.
a) Le faisceau de photons est remplacé par un faisceau d’électrons, permettant ainsi d’améliorer le pouvoir
de résolution.
b) Quelque soit la technique de microscopie électronique utilisée, l’objet à observer devra être inclus dans
des résines époxy.
c) Au MET, ce sont les électrons primaires qui sont utilisés pour fabriquer l’image.
d) Au MEB l’ombrage métallique permet de rendre les électrons secondaires sensibles à la topographie de
l’objet étudié.
e) La cryofracture et le cryodécapage sont des techniques qui permettent d’observer la surface des objets
avec la résolution et le grossissement du MEB.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°8 : On souhaite observer un échantillon au MET, après coloration par des anticorps
spécifiques. Indiquer la ou les propositions vraies.
a) Après avoir déposé l’échantillon sur une lame de verre, l’ensemble subira un enrobage par des résines
époxy, afin d’obtenir une coupe très mince.
b) La préparation de l’échantillon nécessite une fixation, celle-ci sera faite soit au glutaraldéhyde, soit à
l’acide osmique.
c) La coupe sera faite par un ultramicrotome.
d) Les étapes de préparation suivent le déroulement suivant : fixation, enrobage, coupe, coloration puis
observation.
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e) Les anticorps sont marqués par des fluorochromes.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°9 : Concernant la cytométrie en flux, indiquer la ou les propositions vraies :
a) Le tri cellulaire constitue la dernière étape obligatoire de la cytométrie en flux.
b) Les cellules aspirées par un système de pompage sont isolées une à une dans des
microgouttelettes puis analysées par un faisceau laser.
c) La mesure de la transmission de la lumière permet d’évaluer la taille des cellules ou leur
granulosité
d) La charge attribuée aux cellules est fonction de la fluorescence des cellules.
e) La fluorescence permet une analyse quantitative des cellules ou constituants cellulaires.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°10 : Concernant le fractionnement des composants cellulaires, indiquer la ou les
propositions vraies :
a) Après rupture mécanique de la membrane plasmique à haute température, les organites
cellulaires restent intacts.
b) Le coefficient de sédimentation exprimé en Svedberg est représentatif de la taille de l’élément
considéré.
c) La vitesse de sédimentation est fonction de trois paramètres : la taille, la forme, le coefficient
de sédimentation.
d) L’ultracentrifugation en gradient de densité à l’équilibre permet de séparer les composants
cellulaires en fonction de leur vitesse de sédimentation et ce, quel que soit le temps de
centrifugation.
e) La technique FACS peut être utilisée pour le fractionnement des composants cellulaires.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°11 : Concernant le contrôle de la pureté des fractions, indiquer la ou les propositions
vraies :
a) Un examen morphologique est suffisant pour contrôler la pureté des fractions obtenues.
b) Le contrôle morphologique est effectué en MEB.
c) Le contrôle biochimique consiste à doser des activités enzymatiques spécifiques d’un type
d’organite donné.
d) L’activité cytochrome réductase est spécifique des mitochondries.
e) L’activité glucose 6 phosphatase implique la présence de microsomes.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°12 : Concernant les techniques cytoenzymologiques et l’immunomarquage, indiquer
la ou les propositions vraies :
a)
b)
c)
d)
e)
f)
Pour les techniques cytoenzymologiques on introduit dans l’échantillon des enzymes dont l’activité
sera mise en évidence à l’aide d’un réactif.
Le DAPI est utilisé en cytoenzymologie et permet d’observer l’ADN.
Le marqueur et le ligand sont toujours spécifiques de la molécule, recherchée en immunomarquage.
En immunomarquage, la fixation des ligands marqués par des fluorochromes est observée en
microscopie électronique.
Lors de l’immunomarquage indirect, les anticorps secondaires sont marqués et révèlent la présence
des complexes antigène-anticorps.
Toutes les réponses précédentes sont fausses.
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QCM n°13 : Concernant l’autohistoradiographie, indiquer la ou les propositions vraies :
a) Après un bref marquage métabolique par autohistoradiographie on révèle le lieu de
biosynthèse des macromolécules.
b) Une autohistoradiographie réalisée en présence de thymidine tritiée est utile pour détecter
l’étape de transcription.
c) Après un bref marquage métabolique, toutes les macromolécules néosynthétisées sont
radioactives.
d) Les rayonnements β qui traversent les cristaux d’AgBr de l’émulsion photographique vont
transformer ces cristaux en Ag métal.
e) Pour l’étude de l’ADN et de l’ARN, en autohistoradiographie, on utilise comme précurseurs des
acides aminés.
f) Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°14 : A propos des méthodes d’études de la cellule, indiquer la ou les propositions
vraies :
a)
b)
c)
d)
e)
f)
La Rhodamine 123 met en évidence une activité mitochondriale.
Le réactif de Schiff permet de révéler les aldéhydes.
Le bleu Trypan est un colorant vital.
Quelque soit le type de coloration, l’observation se fera sur des cellules mortes.
Le DAPI est l’une des colorations utilisées dans le test de Brachet.
Toutes les réponses précédentes sont fausses.
QCM n°15 : Toujours à propos des méthodes d’études de la cellule, indiquer la ou les
propositions vraies :
a)
b)
c)
d)
e)
f)
Le photoblanchiment est utilisé dans la technique du FRAP.
La technique FISH (Fluorescent In Situ Hybridization) met en jeu des anticorps.
Le GFP est une protéine fluorescente en hélice alpha.
Une sonde d’activité métabolique peut s’effectuer sur des cellules mortes.
Un milieu de culture peut être enrichi en EGF (Erythropoïétine Growth Factor).
Toutes les réponses précédentes sont fausses.
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