Physiologie des micro-organismes 1. Besoins

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Chapitre 2 : Physiologie des micro-organismes
Chapitre 2
Physiologie des
micro-organismes
1. Besoins nutritionnels
1.1. Besoins élémentaires
1.1.1. Source de carbone
1.1.2. Source d’azote
1.1.3. Source de soufre et de phosphore
1.1.4. Source d’énergie
1.2. Besoins en facteurs de croissance
1.3. Interactions nutritionnelles entre populations microbiennes
1.4. Applications à la conception et à l’utilisation des milieux de culture
2. Métabolismes
2.1. Métabolisme énergétique
2.1.1. Rôle de l’ATP
2.1.2. Phototrophes
2.1.3. Chimiolithotrophes
2.1.4. Chimioorganotrophes
2.1.5. Types respiratoires
•
Respiration aérobie
•
Respirations anaérobies
•
Fermentations
2.2. Métabolisme glucidique
2.2.1. La glycolyse (voie d’Embden – Meyerhoff)
2.2.2. Alternatives à la glycolyse
•
La voie des pentoses phosphates
•
La voie d’Entner – Doudoroff
2.2.3. La dégradation du pyruvate au cours du cycle de Krebs
2.2.4. Les fermentations
e
•
Fermentation homolactique
•
Fermentation éthanolique (ou « alcoolique »)
•
Fermentation « acides mixtes »
•
Fermentation butanediolique
•
Fermentations des bactéries anaérobies
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Chapitre 2 : Physiologie des micro-organismes
3. Croissance des microorganismes
3.1. Méthodes d’étude de la croissance
3.1.1. Dénombrements
•
Dénombrement direct (cytométrie)
•
Dénombrement après culture
3.1.2. Mesure de la biomasse
•
Méthode gravimétrique
•
Turbidimétrie
3.1.3. Autres méthodes
3.2. Paramètres de la croissance – représentation graphique
3.3. Courbe de croissance en milieu non renouvelé
3.4. Facteurs influençant la croissance
3.4.1. La température
3.4.2. Le pH
3.4.3. La disponibilité de l'eau (ou "activity of water" : Aw)
3.4.4. Relations des micro-organismes avec le dioxygène : types respiratoires
3.4.5. La nature et la concentration du (ou des) substrat(s)
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Chapitre 2 : Physiologie des micro-organismes
Besoins élémentaires : sources de carbone, azote, soufre et phosphore
Carbone
Azote
Soufre
Phosphore
Besoins énergétiques
Energie
Besoins spécifiques des micro-organismes hétérotrophes : facteurs de croissance
Facteurs de croissance
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Chapitre 2 : Physiologie des micro-organismes
Figure 1
Figure 2
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Chapitre 2 : Physiologie des micro-organismes
COMPOSITION DE PLUSIEURS MILIEUX DE CULTURE (en g.L-1)
MILIEU UREE-INDOLE
CITRATE DE SIMMONS
Urée 2,0 g
citrate de sodium 1,0 g
L-tryptophane 0,3 g
bleu de bromothymol 0,08 g
éthanol à 0,95 1 ml
chlorure de sodium 5,0 g
Exemples de milieux
rouge de phénol 2,5 mg
sulfate de magnésium 0,2 g
synthétiques
chlorure de sodium 0,5 g
hydrogénophosphate de potassium
dihydrogénophosphate de potassium 1,0 g
0,1 g
dihydrogénophosphate d'ammonium
hydrogénophosphate de potassium 1,0 g
Exemples de milieux
empiriques de base
0,1 g
agar 15,0 g
TRIPTO-CASEINE SOJA
BCP LACTOSE
peptone trypsique de caséine 15,0 g
Peptone 5,0 g
peptone papaïnique de soja 5,0 g
Extrait de viande 3,0 g
chlorure de sodium 5,0 g
Lactose 10,0 g
agar 15,0 g
Bromocrésol pourpre 0,025 g
Agar 11,0 g
Exemples de milieux
GELOSE COLUMBIA AU SANG
GELOSE « CHOCOLAT »
mélange spécial de peptones 23,0 g
peptone trypsique de caséine 7,5 g
Amidon 1,0 g
peptone pepsique de viande 7,5 g
chlorure de sodium 5,0 g
amidon de maïs 1,0 g
agar 10,0 g
hydrogénophosphate de potassium
sang 50 ml
4,0 g
empiriques enrichis
dihydrogénophosphate de potassium
1,0 g
(non sélectifs)
chlorure de sodium 5,0 g
hémoglobine 10,0 g
supplément
Polyvitex
(vitamines)
1,0 mL
agar 15,0 g
Exemples de milieux
sélectifs
BEA (bile esculine azide)
DRIGALSKI
Peptone 17,0 g
Peptone 15,0 g
peptone pepsique de viande 3,0 g
extrait de viande 3,0 g
extrait de levure 5,0 g
extrait de levure 3,0 g
esculine 1,0 g
lactose 15,0 g
citrate de sodium 1,0 g
désoxycholate de sodium 1,0 g
citrate de fer ammoniacal 0,5 g
cristal violet 0,005 g
bile de boeuf déshydratée 10,0 g
bleu de bromothymol 0,080 g
azide de sodium 0,25 g
thiosulfate de sodium 1,0 g
chlorure de sodium 5,0 g
agar 11,0 g
agar 13,0 g
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figure 3
figure 4
Dans une cellule, l’ATP peut être synthétisé :
-
par phosphorylation au niveau du substrat, dans le cytoplasme ;
-
par phosphorylation liée à un gradient électrochimique de protons de part et
d’autre d’une membrane biologique, par un complexe ATP synthétase. Ce mode de
production concerne la photophosphorylation et la phosphorylation oxydative.
Comparaison des systèmes photosynthétiques des Eucaryotes et des bactéries :
Propriété
Pigment
Eucaryotes
Cyanobactéries
Bactéries vertes et
pourpres
Chlorophylle a
Chlorophylle a
Bactériochlorophylle
Photosystème II
Présent
Présent
Absent
Donneur d’électrons
H2O
H2O
H2, H2S...
Production d’O2
Oui
Oui
Non
photosynthétique
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Figure 5 : photosynthèse chez les Eucaryotes et chez les Cyanobactéries (dans ce cas, les thylakoïdes
ne sont pas contenus dans le stroma du chloroplaste, mais directement dans le cytoplasme).
Figure 6
Figure 8 : réactions d’oxydoréduction dans les systèmes biologiques
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(1) Nitrosation (bactéries nitreuses)
NH4+
+
3/2 O2
NO2– +
H2O + 2 H+
∆G0’ = - 352 kJ.mol-1
(2) Nitratation (bactéries nitriques)
NO2–
+
1/2 O2
NO3–
∆G0’ = - 75 kJ.mol-1
Figure 7 : la nitrification
Figure 9
Figure 10
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Figure 11 : comparaison des chaînes respiratoires bactériennes (respiration aérobie)
Figure 12 : chaîne respiratoire utilisant l’ion nitrate comme accepteur final des électrons
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figure 13
figure 14
Figure 15 : voies de fermentation chez les Enterobacteriaceae
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Chez les bactéries, la division se fait par scissiparité : il se forme un septum transversal qui sépare
progressivement les deux futures cellules filles, chacune d’entre-elles recevant une copie du chromosome de la
cellule mère. La séparation des cellules n’est pas toujours totale, ce qui aboutit, selon le plan de division, à des
chaînettes, des « grappes »…
Figure 16
Figure 17
Figure 18
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figure 19
Figure 20
Figure 21
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Figure 22
Figures 23A et 23B
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Figure 24
Figure 25
Figure 26
Figure 27
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