Ap immunité Rappels et principes TP immunité Système Immunitaire: SI = système de perception de signaux de danger provenant du non soi ou du soi modifié SI = système en équilibre dynamique. (rupture d’équilibre ?) SI= 2 types de défenses aux stratégies différentes mais qui fonctionnent ensemble CMH,Les molécules qui marquent le soi Peptides : fragments issus de la lyse des agents infectieux phagocytés Association CMH + peptide Présentation du peptide Synthèse des molécules de CMH Des cellules ont des CMH qui présentent des fragments antigéniques Donc les cellules affichent le soi, le soi modifié par une infection ou un cancer Des organes du système immunitaire Des cellules du système immunitaire Les phagocytes Les cellules du système immunitaire = les globules blancs= leucocytes Des cellules phagocytes Font la réponse innée Des cellules sentinelles, granulocytes, polynucléaires, macrophages Des lymphocytes Assurent la réponse adaptative, spécifique B Responsables de la RI innée , Participent à la détection du signal de danger Induisent la réponse inflammatoire Font la phagocytose Et présentent leur CMH associé aux non soi ou soi modifié aux cellules de la réponse adaptative ou Réponse type à médiation humorale avec des anticorps T Réponse de type cellulaire Comparaison immunité innée - adaptative Des molécules du système immunitaire a) Les TLR ou PRR Molécules des cellules sentinelles (mastocytes, macrophages, ldonc es cellules capable de faire la phagocytose.C’est une reconnaissance des molécules du non soi PAMP Pathogen associated molecular pattern PRR Pattern recognition receptor Les molécules du système immunitaire b) Les marqueurs de lymphocytes T marqueurs CD4 ou CD8 Role : Reconnaissance des CMH associés à des déterminants antigéniques Donc vérification des population s cellulaires, vérification de leur CMH et des molécules associées. Pour savoir si ces cellules appartiennent au soi et pas au soi modifié Les molécules du système immunitaire c) Les récepteurs des lymphocytes B : les Anticorps ou Immunogloglobuline Site de liaison à l’antigène : parties variables des chaînes lourdes et légères Site de liaison aux récepteurs des phagocytes : partie constante des chaînes lourdes Connaissances exigibles au bac sur la spécificité des anticorps Les anticorps sont des immunoglobulines c’est à dire des protéines circulantes du milieu intérieur constituées d’une partie constante et d’une partie variable. La spécificité des anticorps est due à la partie variable : Schéma de la structure d’un anticorps Schéma des propriétés fonctionnelles Sites de fixation de l’antigène = partie variable Partie variable Anticorps Partie constante Membrane plasmique Cytoplasme Sites de fixation de l’antigène Le principe des TP immunité type ouchterlony ou tests TP réaction Antigène-Anticorps Le problème…les molécules ne sont pas visibles….. Par contre les complexes immuns sont visibles Donc dans un premier type on peut les mettre en évidence, soit en milieu solide (ouchterlony), soit en milieu liquide(test) Le 2eme type de tp Elisa est un test où des Ac ou des Ag sont fixés sur le fond d’une cuve et sur lesquels les molécules complémentaires peuvent se fixer, puis on rajoute un colorant mettant en évidence leur s présences Tp type1 Anticorps-Antigène 1) En milieu solide = test d’Ouchterlony a) But Repérer les Ag-Ac placés dans des puits dans de la gélose grâce aux complexes immuns existant ou pas. b) Principe Puits faits à l’emporte pièce dans lesquels ont place des Ac ou des Ag Arc de diffusion de l’Ag ou Ac dans la gélose Boite de pétri remplie de gélose, solide à 20°C Arc de précipitation Quand il y a rencontre de l ’Ag avec son Ac complémentaire : il y a complexe immun Tp type1 Anticorps-Antigène 2) En milieu liquide (ex test de grossesse, test de détermination des groupes sanguins) a) But Mettre en contact des Ac et des Ag , si il y a complémentarité, des complexes immuns seront formés et il y aura précipitation de ces complexes b) Principe On mets dans des cuves ou sur une lame des serums contenant ou pas des Ac avec les Ag correspondants au test étudié Si iles complexes immuns sont formés, il y a agglutination, on observe un aspect granuleux , le test est dit positif, l’Ac recherché était bien présent Si il n’y a pas de complexes immuns, l’aspect reste transparent, le test est dit négatif, il n’y a pas eu rencontre entre Ag et l’Ac correspondant 3) Interprétation des expériences d’ouchterlony ou les tests Quand il y a arc de précipitation ou agglutination c’est qu’un complexe immun est formé , donc il faut donc schématiser ces complexes immuns !!! Il faut au moins 3 Ac et des déterminants antigeniques fixés ou pas sur des cellules ou des billes de latex selon l’expérience proposées Ac possédant la partie varible complémentaire de l’Ag Déterminant antigénique Réaliser ensuite, en utilisant le modèle d’anticorps cidessous et d’autres symboles à votre convenance, deux schémas qui expliquent au niveau moléculaire la présence ou l’absence d’un arc de précipitation. B Diffusion des AC S Diffusion des antigènes BSA Complexe immun = arc de précipitation Titre : schéma expliquant l’apparition de l’arc de précipitation Titre : schéma expliquant l’absence d’arc de précipitation P Diffusion des AC S Diffusion des antigènes P Absence de complexe immun = pas d’arc de précipitation TP Type 2 : Type Elisa Voir tp!!!!!!!