innovation within - Canceropole-GSO

INNOVATION WITHIN
About Us • Innate Immunity • Cell Culture & Transfection • Cloning & Gene Expression • RNA Interference • Cytokine Signaling • IgA • Cancer Research & Gene Therapy
Workshop Cancéropôle GSO / SFTCG
Thérapies cellulaires et géniques :
de la preuve de concept jusqu’à l’essai clinique
Le développement d’un Médicament de
Thérapie Génique:
retour d’expérience
Fabienne VERNEJOUL (InvivoGen)
25/03/2010
La société InvivoGen
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About Us • Innate Immunity • Cell Culture & Transfection • Cloning & Gene Expression • RNA Interference • Cytokine Signaling • IgA • Cancer Research & Gene Therapy
Toulouse / San-Diego
70 employés et un revenu de 12 M€, le
groupe InvivoGen travaille pour environ
15 000 clients à travers le monde.
Depuis le 1er Janvier 2014, les activités de
Cayla sont regroupées sous le nom de
InvivoGen.
25/03/2010
Activités principales du site de Toulouse
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About Us • Innate Immunity • Cell Culture & Transfection • Cloning & Gene Expression • RNA Interference • Cytokine Signaling • IgA • Cancer Research & Gene Therapy
Production d’antibiotiques de sélection et de
contamination
Production d’actifs cosmétiques (BASF healthcare)
Production de réactifs de laboratoire (InvivoGen)
Immunité innée (signalisation PRRs: TLRs)
Clonage et expression de gènes
Culture cellulaire et transfection
25/03/2010
Autres activités: les Biothérapies
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Depuis 15 ans, InvivoGen recherche et développe des produits en thérapie
génique et immunomodulateurs
Anticorps monoclonaux (R&D)
Thérapie génique non-virale
Agents de complexation (LyoVec™, AdiFectin™, PamadiFectin™)
Gènes synthétiques (ADN sans CpG)
Production d’ADN à grande échelle
Gènes suicides (Fcy::fur/5-FC, CodA::upp/5-FC)
DCK::UMK/Gemcitabine (brevet)
25/03/2010
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Le Principe
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Gemcitabine (GEMZAR®): prodrogue
traitement palliatif pour le cancer du pancréas.
Thérapie Génique multiple/double
- gène aux propriétés anti-oncogéniques et anti-métastatiques (SST2 R)
- fusion de gènes (DCK::UMK) aux propriétés chimio-sensibilisantes à la gemcitabine (dFdC)
SST2 récepteur
Cellules Tumorales
Pancréatiques
dFdC
dFdCMP
P
dFdCDP
dFdCTP-ADN
P
Gemcitabine
DCK::UMK
CYL-02 : complexes lyophilisés
in vivo Jet-PEI™ / ADN (SST2R+DCK::UMK)
25/03/2010
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La preuve de concept
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1600
No treatment
Tumor volume (mm3)
1400
1200
Gemcitabine
1000
Gene therapy +
gemcitabine
800
600
400
200
0
0
5
10
15
20
25
30
Days
* Modèle syngénique chez le Hamster
(allogreffe hétérotopique) MDS, Inc.
25/03/2010
Développement (1): ADN médicament
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 ADN plasmidique (agrément CGG)
• Promoteurs hypoxie-sensibles (environnement tumoral)
• Squelette de 1ère génération (IRES avec gène de résistance)
• Squelette de 2ème génération (gène de résistance isolé)
 Optimisation de la souche bactérienne productrice (agrément HCB)
Souche dérivée d’Escherichia coli K12 (classe1)
• Aucune pathogénicité ni toxicité vis-à-vis de l’homme et des animaux.
• Pas de menace pour l’environnement.
• Pas de possibilité de dissémination.
Banques Cellulaires (selon Pharm. Europ.)
Souche sécurisée
 Procédés de Fermentation/ Extraction/ Purification
• Production en bioréacteurs de 20 L
Amélioration du titre en plasmide
 Contrôles de la substance active
• Libération du lot (mise en place du système AQ)
25/03/2010
Développement (2): préparation du MTG
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 Evolution des formulations
1ère génération de complexes :
Extemporanée (Formulation directe avant injection)
 Problème de reproductibilité
 Non acceptable en phase II/III
2ème génération de complexes :
Complexes en solution
 Homogénéité des lots
 Problème de stabilité en solution
3ème génération de complexes :
Complexes lyophilisés
 Homogénéité des lots
 Stabilité colloïdale (nanoparticules 80-100 nm)
 Simplicité d’utilisation (prêt-à-l’emploi)
25/03/2010
« Contraintes » de la Formulation BPF
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Formulation des complexes (selon les normes BPF)
 Choix de la forme (JetPEI™ en poudre ou solution?)
 Choix des concentrations de travail (4 dosages)
 Cinétique et sens de mélange (vortex  grande échelle)
 Reproductibilité des lots (peu d’essais possibles)
Lyophilisation
 Choix d’un excipient physiologiquement compatible
 Remise en suspension immédiate à température ambiante
 Conservation de l’activité biologique
Maintien de la stérilité
 Pas de stérilisation finale possible
 Deux principes actifs stériles
 Travail en ZAC Classe A
25/03/2010
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1995
2000
2004
2006
2007
2008
2009
2010/2012
R&D
Preuve de
Concept
Scale-up
Discussions avec l’ANSM et agréments
Etude de toxicité
Dépôts de brevets
Soumission des dossiers
(DME)
Production
BPF
Phase I/II
TherGAP 1
25/03/2010
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Essai TherGAP 1
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Etude pilote de Thérapie Génique de l’Adénocarcinome Pancréatique
localement avancé par injection intratumorale de complexes
in vivo-jetPEI™/ADN à activité antitumorale et sensibilisante au GEMZAR®
Cancer du pancréas (95% des cas: adénocarcinome)
4ème cause de décès par cancer
TherGAP 1 (2010-2012):
Escalade de doses (4 dosages de CYL02)
22 patients traités
Bonne Faisabilité
Pas d’EIG
Bonne tolérance
Sécurité/innocuité du MTG
25/03/2010
Impact du projet TherGAP 1
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Mise en place d’un service Assurance Qualité
Rédaction de procédures et documents associés
Qualification/Validation du matériel
Amélioration de la qualité pour la production de la gamme de
réactifs InvivoGen (objectif de certification ISO9001)
Perspectives: poursuite de l’ évaluation clinique (TherGAP 2)
Conséquences du changement de réglementation :
 InvivoGen n’est pas établissement pharmaceutique. Dépôt d’une
demande d’autorisation et déclaration des activités relatives aux MPUP
(matières premières à usage pharmaceutique).
 Préparation de la substance active ADN plasmidique.
 Le produit sera formulé et conditionné par un sous-traitant qui a le
statut d’établissement pharmaceutique (transfert procédés de fabrication)
25/03/2010
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Prof. Gérard Tiraby (PDG)
Prof. Louis Buscail (PU-PH)
Daniel Drocourt, PhD (Biologie moléculaire)
Contact :
Gilles Cambois (Production)
Mathieu Maligoy, PhD (Fermentation)
Nicolas Ricard (Assurance Qualité)
Fabian Gross (CIC Biothérapies)
Fabienne VERNEJOUL, PhD
Chef de projets R&D (in vitro et in vivo)
InvivoGen
+33 (0)5 62 71 69 39
[email protected]
www.invivogen.com
25/03/2010