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SPERMATOZOIDE Acrosome TETE Noyau Mitochondries PIECE INTERMEDIAIRE Microtubules FLAGELLE COMPLEXE CUMULO-OVOCYTAIRE POST-OVULATOIRE 100 µm Ovocyte secondaire Noyau 1er globule polaire Cellules folliculaires Zone pellucide Corona radiata Granules corticaux CYCLE DE L ’OVAIRE Follicules primordiaux avec leur ovocyte primaire Corps jaune J 28 PUBERTE J1 OVULATION J 14 Follicule mûr Follicule secondaire Follicule antral CYCLE MENSTRUEL TRACTUS GENITAL FEMININ TROMPES DE FALLOPE - migration de spermatozoïdes - migration de l ’embryon OVAIRE - maturation folliculaire - ovulation CAVITE VAGINALE - accueil des spermatozoîdes UTERUS - accueil de l ’embryon (nidation) COL DE L ’UTERUS - sécrétion de glaire cervicale - filtration des spermatozoïdes LES MECANISMES DE LA FECONDATION 2 1 3 6 5 4 1 - dissociation des cellules folliculeuses et fixation des spermatozoïdes à la Z.P.. 2 - réaction acrosomiale entraînant la libération de protéase et de hyaluronidase qui permettent la pénétration du spermatozoïde à travers la Z.P.. 3 - traversée de la zone pellucide puis liaison d ’une face latérale du spermatozoïde à la membrane plasmique de l ’ovocyte. 4 - fusion des membranes des 2 gamètes et pénétration du noyau, du centriole et du flagelle du spermatozoïde. 5 - réaction corticale de l ’ovocyte dont les granules corticaux libèrent leur contenu par exocytose et modifient la structure de la Z.P. qui s ’épaissit et empêche la pénétration d ’autres spermatozoïdes. 6 - reprise et fin de la 2ème mitose de méiose avec expulsion du 2ème globule polaire : décondensation et migration du noyau du spermatozoïde en direction du noyau de l ’ovocyte. LA FECONDATION AU MICROSCOPE Spermatozoïdes sélectionnés par gradients Ovocytes J 0 avec ses cellules nourricières Zygote avec 2 pronucléi Embryon à 2 blastomères Embryon à 4 blastomères 24 h 36 h 48 h DE LA PONCTION AU TRANSFERT Sonde endo-vaginale avec aiguille de ponction Tubes stériles avec liquide ponction Vessie Utérus Vagin Ovaire TRANSFERT AU LABORATOIRE 37°C Examen au microscope, isolement et rinçage des CCO Prélèvement de sperme et sélection des spermatozoïdes par gradients de silice Fertilisation de 100 000 spz/puits Jour 1 ETUVE 37°C 5% CO2 ETUVE 37°C 5% CO2 Mise en évidence des pronucléi et changement de milieu ETUVE 37°C 5% CO2 Jour 1 Changement de milieu, classement et choix des embryons pour le transfert et la congélation ETUVE 37°C 5% CO2 CONGELATION TRANSFERT Jour 2 ou 3 -196°C DU ZYGOTE A L ’EMBRYON Centriole du spermatozoïde Noyau haploïde du spermatozoïde - Interdigitation des enveloppes nucléaires Noyau haploïde de l ’ovocyte ZYGOTE - duplication des chromosomes - réplication des centrioles - rupture de la mb nucléaire - alignement des chromosomes de l ’ovocyte et du spermatozoïde sur le même fuseau mitotique - séparation des chromatides - migration vers les 2 pôles EMBRYON - télophase et cytodiérèse - 2 noyaux diploïdes
