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H. Bobby Gaspar,1, Emma Bjorkegren, Kate Parsley, Kimberly C.
Gilmour, Doug King, Joanna Sinclair, Fang Zhang, Aris
Giannakopoulos, Stuart Adams, Lynette D. Fairbanks, Jane
Gaspar, Lesley Henderson, Jin Hua Xu-Bayford, E. Graham
Davies, Paul A. Veys, Christine Kinnon,1 and Adrian J. Thrasher1
Molecular Immunology Unit, Institute of Child Health, University College
London, 30, Guilford Street, London WC1N 1EH, UK Department of
Clinical Immunology and Bone Marrow Transplantation, Great Ormond
Street Hospital NHS Trust, Great Ormond Street, London WC1N JH, UK
Purine Research Laboratory, Guys and St Thomas’ Hospital, London Bridge
Road, London SE RT, UK
Bui Laurent
Introduction
 ADA = Enzyme qui catalyse l'hydrolyse de
l'adénosine en inosine avec l'élimination de
l'ammoniaque.
 L'inosine elle-même donnant l'hypoxanthine sous
l'influence d'une purine nucléoside phosphorylase.
L'inhibition de l'adénosine déaminase tend à
augmenter la concentration d'adénosine.
ADA-SCID
 Un déficit de l’Adenosine DéAminase (ADA) entraine
un développement anormal des cellules T, B et NK.
 Ce qui donne un déficit immunitaire combiné sévère
(SCID, severe combined immunodeficiency disorder).
 Maladie génétique rare qui sans traitement cause des
infections chroniques et des troubles du
développement pouvant amener à la mort dans les
premières années de la vie.
Traitements possibles
ADA-SCID patient
Untreated
Death
Infection
HSCTransplantation
Survival > 85%
Good
immunological
and Biochemical
correction
PEG-ADA
Gene Therapy
Overall survival good
Variable immun reconstitution
Lymphopenia
Defects LT
< Thymus output
Susceptibility to Viral infection
?
Thérapie Génique
Tri des cellules CD34+
de la moelle osseuse du
patient (PEG-ADA)
Arrêt pendant 1 mois du
traitement PEG-ADA
Après 2j d’un
traitement Melphalan
on réinjecte 1,4 M de
CD34+ADA+/kg
25-30 % de
transduction efficace
Patient 1 (P1)
 Diagnostiquer ADA-SCID à 2 mois.
 Sans donneur compatible => débute le traitement
PEG-ADA.
 Après 3 ans de traitement :
(+)
- Correction Métabolique
- Statut clinique bon
- Pas de pb d’infection
-
(-)
Lymphopénie T
Production faible d’Ig
Mauvais fonctionnement
Thymique
Disparition des cellules
T naïves
Bioéthique
 Thérapie génique approuvée par :
- UK Gene Therapy Advisory Committee
- Medecine and Health Core Control Agency
- Local Institutional Research Ethics Committee
 Condition pour participer au Programme :
-
Confirmation ADA-SCID (Génétique ou Biochimique)
Pas de greffe possible
Echec du traitement PEG-ADA
Accord parental
Après 2 ans de Thérapie
génique les premiers résultats
 Immune Reconstitution
 Diversity of the T cell Repertoire
 Metabolic Correction
Immune Reconstitution (1)
Immune Reconstitution (2)
 Profil de prolifération normal des LT après stimulation
par CD3 et PHA (phytohémaglutinine)
 Augmentation des LT, NK, LT naïfs nouvellement formés
 Réinitiation de la Thymopoiëse
Diversity of the T cell
Repertoire
 Après l’analyse des TCR Vβ on a
montré qu’il y avait un usage de
tous les segments Vβ (40aine)
 Les spectratypes du CDR3 des
TCR Vβ montre une évolution vers
la complexité du répertoire T
On ne trouve pas d’anomalie ou de
pathologie lié à une prolifération
non contrôlée des lymphocytes
Metabolic Correction
 Après 1 an de traitement génique on observe une
activité ADA des érythrocytes = 3-5 nmol/mg
Hb/h
 Cela suggère que la thérapie a amené des GR
exprimant des ADA de façon stable
Proviral Copy Number and LineageSpecific Integration Analysis
Analysis of proviral integration sites
Les produits de PCR montre une multitude de site d’intégration
 Le séquençage de chaque intégrant est en cours
Conclusion
 Mise en place d’un protocole d’autogreffe pour la
thérapie génique = essai clinique.
 Après 2 ans de thérapie = Tableau + (LT naïfs en
hausse, prolifération normale à une stimulation des
LT, TREC, …)
 Rétablissement de l’immunité humorale faible (peut
être plus longue due au Lthelper)
=> On continue la surveillance clinique