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PARTIE 3
Effets du DON sur l’immunité
intestinale
Martin Lessard, Karine Deschênes,
Christian Savard et Younès Chorfi
Centre de R & D sur le bovin laitier et le porc, Sherbrooke, Québec
Introduction
Ingestion d’aliments
contaminés avec DON
PEUT AFFECTER LES FONCTIONS DE DÉFENSE DE L’INTESTIN
• Défenses naturelles de l’épithélium (production de mucine,
perméabilité de la muqueuse);
• Fonctions immunitaires qui sont régulées par différentes
cytokines, chimiokines et autres facteurs (PGE2, DRO, etc.)
Récents travaux ont démontré que l’ingestion de DON peut :
• Augmenter l’expression de plusieurs cytokines (TNF-α, IL-1β, IFN-γ,
IL-6 et IL-10) au niveau du jéjunum et de l’iléon (Bracarense et al.,
2012); ou
• Diminuer l’expression de l’IL-1β et IL-8 (Becker et al. 2011)
Les effets de DON sur la réponse immunitaire intestinale
sont donc encore mal connus
L’intestin est le principal site d’interaction entre le
système immunitaire, les microorganismes
et autres antigènes incluant les mycotoxines
Jonctions serrées Défensines
Claudines, occludine
Cell B
Cellules immunitaires et cytokines impliquées dans
la régulation de la réponse immunitaire
Bactéries commensales
Pathogènes
Cellules présentatrices d’Ag
(macrophage et cellules dendritiques)
Inflammation
TLRs
Chimiokines
Cytokines
IL-6
IL-8
IL-12
IFN-γ
Th1
IL-10
TGF-β
IL-4
Treg
MHC/
TCR
TGF-β
IL-6
IL-17
Pathogènes/antigènes
Immunité Innée
Différentes
bactéries
Th2
Th17
Immunité adaptative
Différents
dialogues
Différentes
réponses
Objectifs de l’étude
Évaluer l’influence d’un aliment contaminé
avec DON sur :
– La croissance
– La réponse anticorps contre ovalbumine
(OVA)
– La production de chimiokines : IL-8, CXCL10
(attraction et contrôle de l'état d'activation des cellules du
système immunitaire)
– La production de cytokines
pro-inflammatoires : IL-1β, IL-6, TNF-α
Objectifs de l’étude - suite
– L’expression d’enzymes impliquées dans le
métabolisme des dérivés réactifs de l’oxygène
(DRO) au niveau de l’intestin (SOD3, GPX3)
– La production de cytokines impliquées dans la
régulation des réponses Th1 (IFN-γ), Th2 (IL-4)
et Treg (IL-10)
– La fonction barrière de l’intestin (occludine et
claudines 3 et 4) et la production de peptides
antimicrobiens (β-défensine-1)
Animaux et traitements
DON (ppm/kg)
PORCS (n)
0
8
1.5
8
3.5
8
 Gain de poids
 Production d’Ac
contre OVA
Prise de sang
Euthanasie
Euthanasie
 Expression de gènes par qPCR (jéjunum et iléon)
Résultats
Le gain de poids quotidien des porcs
est diminué par DON
La réponse anticorps contre OVA
est augmentée par DON
a, b : P < 0,05
a
b
Cytokine pro-inflammatoire
DON tend à diminuer l’expression
d’IL-6 dans l’iléon
Iléon
Jéjunum
10,4 **
160
Gene Expression
140
6,1 **
N=7
N=8
120
1,2 tt
100
80
60
40
20
N=8
N=7
0
0
DON/kg, ppm
3,5
3
t
= p<0,1
* = p<0,05
** = p<0,01
Cytokine pro-inflammatoire
Les expressions d’IL-1β et de TNF-α ne sont pas
influencées par DON
IL-1β
Iléon
140
1,4 *
TNF-α
2,8 **
2,5 **
140
120
Gene Expression
160
Jéjunum
1,5*
N=8
100
120
N=7
N=8
100
80
N=7
N=8
60
N=7
80
60
40
40
N=7
20
N=8
20
0
0
3
3,5
DON/kg, ppm
0
0
3,5
3
DON/kg, ppm
t
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
Dérivé réactif de l’oxygène
L’expression de la superoxyde dismutase
est diminuée dans l’iléon par DON
t
Gene Expression
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
3,5
DON/kg, ppm
Dérivé réactif de l’oxygène
L’expression du glutathione péroxydase
est diminuée dans l’iléon par DON
t
Gene Expression
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
3,5
DON/kg, ppm
Chimiokine
L’expression de CXCL10 dans le jéjunum et
l’iléon est augmentée par DON
CXCL10
200
2,0**
Gene Expression
180
t
2,2**
2,1**
160
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
N=8
140
120
100
2,1**
Iléon
Jéjunum
80
60
N=8
N=7
40
20
N=7
0
0
3,5
3
DON/kg, ppm
Chimiokine
L’expression de IL-8 dans l’iléon est
augmentée par DON
IL-8
160
Gene Expression
140
1,6*
t
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
2,5**
120
100
N=7
80
Iléon
N=8
60
40
N=7
20
0
0
3,5
3
DON/kg, ppm
N=8
Jéjunum
Réponse Th1
L’expression de IFN-γ dans l’iléon est
augmentée par DON
IFN-γ
t
200
4,8 **
2,2 *
180
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
Gene expression
160
140
N=8
120
100
Iléon
3,0 **
Jéjunum
80
60
N=7
40
20
N=8
N=7
0
3,5
3
0
DON/kg, ppm
Réponse Th2
Expression de l’IL-4 est augmentée
dans le jéjunum et l’iléon par DON
IL-4
200
180
Gene Expression
160
140
2,3 **
1,6 *
2,2 *
t
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
N=8
120
100
Iléon
1,5 **
Jéjunum
80
60
N=7
40
N=8
20
N=7
0
0
3,5
DON/kg, ppm
Fonction barrière
DON réduit l’expression des claudines
3 et 4 dans l’iléon
Claudine 3-4
140
2,0**
t
= p<0,1
* = p<0,05
** = p<0,01
2,4**
Gene Expression
120
N=7
100
N=8
1,3**
80
Iléon
Jéjunum
60
N=7
40
N=8
20
0
0
3
3,5
DON/kg, ppm
Fonction barrière
L’expression de l’occludine est réduite
dans l’iléon par DON
Occludine
1,4**
120
t
= p<0,1
* = p<0,05
** = p<0,01
1,3*
Gene Expression
100
80
N=7
N=7
60
Iléon
N=8
N=8
40
20
0
0
3,5
3
DON/kg, ppm
Jéjunum
Peptide antimicrobien
DON tend à diminuer l’expression
de β-défensine-1 dans l’iléon
β-défensine-1
250
t
= p<0,1
* = p<0,05
** = p<0,01
Gene Expression
1,3t
200
30,8**
7,7**
150
N=7
Iléon
N=8
Jéjunum
100
50
N=8
N=7
0
0
3
3,5
DON/kg, ppm
Réponse Treg
L’expression de IL-10 n’est pas
influencée par DON
IL-10
160
2,8**
Gene Expression
140
2,2**
120
100
t
= P < 0,1
* = P < 0,05
**= P < 0,01
N=8
N=7
Iléon
80
Jéjunum
60
40
N=8
N=7
20
0
0
3
3,5
DON/kg, ppm
Conclusions – Partie 3
• Au niveau de l’iléon, l’ingestion de DON
 Tend à diminuer l’expression d’IL-6 alors que
celles du TNF-α et IL-1 ne sont pas affectées;
 Diminue l’expression de deux enzymes (SOD3
et GPX3) impliqués dans le métabolisme des
dérivés réactifs de l’oxygène;
 Augmente les expressions de l’IFN-γ (réponse
Th1) et de IL-4 (réponse Th2);
 Diminue l’expression des claudines et de
l’occludine, des protéines des jonctions
serrées qui jouent un rôle dans la perméabilité
intestinale.
Conclusions – Partie 3 (suite)
• Au niveau du jéjunum, seules les
expressions de la chimiokine CXCL10, de
NOS2 (données non présentées) et IL-4
sont accrues par DON.
• Il y a des différences importantes entre
l’iléon et le jéjunum au niveau de
l’expression des cytokines, chimiokines,
enzymes et autres peptides.
Merci de votre
attention
Questions?