Diagnostics Division 13 Mountain View Avenue Orangeburg, NY 10962 http://www.diagnostics.com Système de Composants en phase solide pour T3 Uptake Catalog Nol: 06B-237116 (100 Tubes Kit) 06B-237124 (200 Tubes Kit) RIA HOT LINE U.S. ONLY: 1-800-437-1705 Customer support and technical information can be obtained at local ICN Pharmaceuticals offices Kundenberatung und technische Informationen bei den ICN Pharmaceuticals Niederlassungen erhältlich Pour toute aide et information techniques contactez votre agence locale de ICN Pharmaceuticals Per qualsiasi informazione o esigenza si prega di rivolgersi agli uffici locali della ICN Pharmaceuticals Para información y soporte técnico dirijase a las oficinas locales de ICN Pharmaceuticals SYSTEME DE COMPOSANTS EN PHASE SOLIDE POUR T3 UPTAKE Destiné au dosage quantitatif du pourcentage de fixation de la tri-iodothyronine (T3) sérique. NE de référence: 06B237416: Tubes revêtus d'anticorps anti-T3 NE de référence: 06B237728: Solution de marquage de la T3 NE de référence: 06B237418: Sérum de référence T3 Explication Sommaire du Test Les hormones thyroïdiennes exercent des influences régulatrices puissantes sur la croissance, la différenciation, le métabolisme cellulaire et l'équilibre hormonal général de l'organisme. La Thyroxine (T4) et la 3,5,3'-tri-iodothyronine (T3) sont principalement transportées dans la circulation sanguine en étant fixées sur la TBG (Thyroxin Binding Globulin)1. Toutefois, une très faible proportion de chaque hormone existe à l'étate libre2. La T4 libre et la T3 libre sont les substances qui pénètrent effectivement les membranes cellulaires et réagissent avec les surfaces réceptrices des structures cellulaires3. La T4 libre et la T3 libre sont également actives dans l'inhibition de la synthèse et de la libération de la Thyréostimuline (TSH) par l'hypophyse4. Toute modification de la capacité de la TBG du sérum d'un patient à fixer la T3 et la T4 entraînera une modification proportionnelle de la quantité des hormones libres. En case d'hyper-thyroïdie, la TBG des malades est plus saturée, ce qui permet à des taux excessifs de T3 et de T4 de rester libres; en cas d'hypothyroïdie, une TBG moins saturée empêche d'obtenir des taux d'hormones libres corrects. La mesure de la capacité de fixation de la TBG non saturée par dosage de fixation peut par conséquent aider à évaluer le fonctionnement de la thyroïde. Principe du Test Dans un dosage par fixation une augmentation de la quantité de fixation de la T3 marquée non fixée à la TBG, et par conséquent, la réduction de le capacité de fixation de la TBG non saturée. Dans le test T3 Uptake de ICN Pharmaceuticals, l'immun-sérum T3 dont sont enduits les tubes en plastique sert d'agent de séparation et fixe la T3 non liée à la TBG. Réactifs Destiné à un diagnostic in vitro 1. Tubes revêtus d'anticorps anti-T3, NE de Réf.: 06B237416. Tubes en polypropylène revêtus d'immun-sérum anti-T3 (lapin); conditionnement unitaire: 100 tubes. Conservation: conserver à température ambiante (18 à 25EC), dans leur emballage d'origine hermétiquement fermé. Date de péremption: se reporter à la date indiquée sur l'emballage. Stabilité après ouverture: Deux mois. 2. Sérum de référence T3, NE de Réf.: 06B237418; contient du sérum humain* avec 0,1% d'azide de sodium** et d'autres agents de conservation; 2 ml/flacon. Conservation: conserver au réfrigérateur entre 2 et 8EC. Date de péremption: se reporter à la date indiquée sur le flacon. Stabilité après ouverture: Deux mois. 3. Solution de marquage de la T3, NE de Réf.: 06B237728; contient moins de 10 FCi (370 kBq) par flacon de triiodothyronine-L + Iode 125 dans un tampon barbital avec sérum-albumine bovine, un agent de décantation et 0,1% d'azide de sodium** comme agent de conservation. Le flacon contient 110 ml, ce qui est suffisant pour 100 tubes. Conservation: conserver au réfrigérateur entre 2 et 8EC. Date de péremption: se reporter à la date indiquée sur le flacon. Matériel et accessoires nécessaires mais non fournis 1. Tubes en verre sous vide, 5 ml. 2. Appareil d'aspiration (facultatif) 3. Pipettes automatiques ou semi-automatiques pouvant distribuer avec exactitude des volumes de 25 Fl et 1,0 ml. 4. Compteur gamma permettant de mesurer l'Iode 125. * ATTENTION: A MANIPULER COMME AGENT POTENTIELLEMENT INFECTIEUX: Les matières premières d'origine humaine utilisées pour la fabrication des composants de cette trousse ont été analysées et révélées négatives en antigène HBs, anticorps VIH 1/2 et anticorps VHC lors de tests réalisés avec des réactifs homologués. Toutefois, aucune méthode d'analyse connue ne pouvant garantir l'absence totale d'agents pathogènes dans des produits d'origine humaine, il faut les manipuler comme des agents potentiellement infectieux. ** ATTENTION: Ces réactifs contiennent de l'azide de sodium. L'azide de sodium peut provoquer des réactions avec le plomb et le cuivre des canalisations et former des azides métalliques très explosifs. Lorsqu'on les évacue, faire couler de l'eau en abondance pour éviter tout risque de concen-tration d'azide. Très toxique en cas d'ingestion. Au contact d'un acide dégage un gaz très toxique. Après contact avec la peau, se laver immédiatemente et abondamment avec de l'eau. ATTENTION: COMPOSANT RADIOACTIF Ce système de dosage radioimmuno-logique de ICN Pharmaceuticals contient moins de 10 microcuries (370 kilo-becquerels) d'Iode 125 par flacon de marqueur. Ce produit radioactif ne peut être reçu, acquis, détenu et utilisé que par des médecins, des laboratoires cliniques ou des hôpitaux pour des analyses cliniques ou de laboratoire in vitro qui ne demandent pas l'administration interne ni externe du produit ou des radiations émises par celui-ci à l'homme ou à l'animal. Sa réception, son acquisition, sa détention, son utilisation et sa transmission sont soumises aux règlementations de la législation française. ICN Pharmaceuticals, Inc. Le respect des règlements de sécurité de base doit assurer une protection adéquate. information, nous indiquons ci-après un résumé des règlementations américaines: Pour Ë Ne pas manger, boire, fumer ni se maquiller dans le local où les produits radioactifs sont utilisés. Ë Ne pas se servir de pipettes à aspiration par la bouche pour des solutions radioactives. Ë Eviter tout contact direct avec tout produit radioactif: utiliser des blouses de laboratoire et des gants à usage unique. Ë Tout travail radiologique doit être effectué dans un endroit spécial à l'écart de toute circulation. Ë Les produits radioactifs doivent être conservés dans leur emballage d'origine en un lieu spécifique. Ë Tenir un journal dans lequel on indiquera l'entrée et la sortie de tout produit radioactif. Ë Le matériel de laboratoire et la verrerie qui sont soumis à contamination doivent être tenus à l'écart pour éviter toute contamination croisée par les différents isotopes radioactifs. Ë S'il se produit un débordement de liquide radioactif, suivre immédiatement les procédures de nettoyage établies. Ë Tout produit radioactif doit être mis au rebut conformément aux règlemen-tations en vigueur. Ë Les récipients non contaminés peuvent être jetés comme du matériel non radioactif, à condition que les étiquettes et toutes autres marques d'identification soient retirées. Prélèvement de l'échantillon Aucune préparation spéciale du patient n'est nécessaire. Pour ce test il est conseillé d'utiliser uniquement du sérum. Préparation de l'échantillon pour analyse: Prélever le sang dans un tube en verre sous vide de 5 ml. Laisser le sang former un caillot à température ambiante. Centrifuger et prélever le sérum. Transport des échantillons: Les échantillons, soigneusement emballés, doivent être maintenus à une température de 2 à 8EC pendant le transport. Si ce transport doit durer plus de 48 heures, l'échantillon doit être congelé et acheminé en l'état. Conservation: Si les échantillons ne sont pas analysés dans les 6 heures, les mettre au réfrigérateur (2 à 8EC). Si la conservation doit durer plus de 48 heures, congeler l'échantillon. Eviter de congeler puis de décongeler l'échantillon plusieurs fois. Procédure de Dosage Ne pas utiliser d'autres réactifs que ceux qui sont fournis à l'intérieur du même lot. Les réactifs et les échantillons doivent être amenés à température ambiante avant utilisation, mais pour minimiser tout risque de détérioration, ne pas les laisser à cette température plus longtemps que nécessaire. Si on utilise un pipetteur automatique, les pipettages des sérums de référence/échantillons et de la solution de marquage peuvent étre effectués simultanément. Eviter de transporter du liquide d'un échantillon à l'autre. Les dosages cliniques doivent être effectués en même temps que le dosage du sérum de référence. Les sérums de contrôle doivent être analysés comme les échantillons cliniques et simultanément. 1. Numéroter les tubes appropriés revêtus d’anticorps pour le sérum référence, et des tubes supplémentaires pour les échantillons clinique ansi que pour les sérums de contrôle. 2. Ajouter le sérum de référence T3 Uptake et les échantillons cliniques comme indiqué cidessous: NE du tube 1,2 3,4 Echantillon 25 Fl de sérum de référence 25 Fl d'échantillon clinique Si on analyse plus de 50 tubes à la fois, vérifier à nouveau le sérum de référence au bout de 50 tubes. 3. Ajouter 1,0 ml de solution de marquage de la T3 dans chaque tube. 4. Incuber à température ambiante pendant 60 ± 5 mn à partir du dernier ajout de l'étape précédente. 5. Aspirer complètement le liquide de chaque tube, ou décanter en retournant les tubes pour qu'ils s'égouttent pendant au moins une minute. Donner une chiquenaude sur les tubes et enlever toute trace de liquide sur le bord des tubes avec du papier absorbant. 6. Mesurer la radioactivité dans tous les tubes l'un après l'autre pendant une minute à l'aide d'un compteur gamma. Il peut s'avérer nécessaire d'augmenter le temps de comptage si l'appareil a une efficacité faible. Dosage radio-immunologique en phase solide - T3 Uptake Tubes Sérum de réf. Sérum du patient 1,2 25 Fl --- Sérum du patient --- 25 Fl Solution de marquage de la T3 Ajouter 1 ml à tous les tubes Incubation Incuber tous les tubes à température ambiante pendant 60 ± 5 minutes Aspiration ou décantation Aspirer ou décanter tous les tubes Compter la radioactivité dans tous les tubes. Calculer et déterminer les valeurs des résultats du patient coups Calcul des Résultats Remarque: Il n'est pas indispensable que les résultats soient exprimés en nombre de coups par minute (c/mn). Cependant, il faut toujours utiliser la même unité de temps pour tous les tubes analysés. Le pourcentage de fixation de chaque échantillon est calculé à partir de l'équation suivante: % fixation (éch.) = Nombre de coups de l'échantillon Nombre de coups moyen du sérum de référence x % fixation de Nombre de coups de référence (voir étiquette flacon) Exemple: 27 860 x 37,5 (indic. donnée sur 26 491 étiq.) = Fixation 39,4% (éch. clinique) On trouvera dans le Tableau 1 (page 24) des valeurs types de nombres de coups. Limites de la Procédure 1. Les taux de fixation de la T3 (T3 Uptake) sont influencés par les taux de TBG (Thyroxine Binding Globulin). 2. Le résultat du test T3 Uptake peut être modifié par les stéroïdes, la phénytoïne, les salicylates, l'héparine et par quelques autres substances médicamenteuses. 3. Les échantillons cliniques contenant une radioactivité provenant de traitements antérieurs risquent de donner des résultats erronés. Valeurs Prévues L'analyse de 106 échantillons prélevés sur des individus euthyroïdiens permet d'établir une zone de normalité allant de 30% à 40%. Chaque laboratoire doit établir lui-même sa zone de normalité. La zone indiquée ci-dessus peut servir de référence jusqu'à ce que le laboratoire ait pu définir sa propre zone de normalité. Caractéristiques des Performances Spécifiques Exactitude: Il n'existe pas d'étalon de référence pour le T3 Uptake. Le test ICN Pharmaceuticals est étalonné en unités arbitraires pour donner une zone de normalité du T3 Uptake de l'ordre de 30 à 40%. Précision: 1. Précision intra-dosage Contrôles du Commerce 1 Nombre d'analyses % moyen T3 Uptake Ecart-type C.V. (%) 2. 20 58,45 2,2 3,83 2 20 39,14 0,82 2,09 3 19 34,25 0,88 2,56 Précision inter-dosage Contrôles du Commerce 1 54 56,4 2,33 4,13 Nombre d'analyses % moyen T3 Uptake Ecart-type C.V. (%) 2 54 38,8 1,28 3,30 3 54 32,9 1,30 3,96 TABLE 1 T3 Solid Phase Radioimmunoassay [125I]: Typical Data Counts Average Counts % T3 Uptake 26491 37.5 (from label) Reference Serum 1 2 26201 26780 Serum 1 3 4 27860 27592 39.4 39.1 Serum 2 5 6 22332 22438 31.6 31.8 Bibliographie: 1. 2. 3. 4. Larsen, P.R., L-Triiodothyronine: Review of Recent Studies of its Physiology in Man. Metabolism, 21, 1073, 1972. Utiger, R.R., Serum Triiodothyronine in Man. Ann. Rev. Med.,25, 289, 1974. Ekins, R.P., et al., The Sensitive and Precise Measurement of Serum Thyroxine by Saturation Analysis. Clin. Biochem, 2, 253, 1969. Selenkow, H.A., The Normal and Abnormal Thyroid. MEDCOM. Med. Update Series. New York, 1973. Manufactured by: Hergestellt von: Fabriqué par: Prodotto da: Fabricado por: ICN Pharmaceuticals, Diagnostics Division 13 Mountain View Avenue Orangeburg, New York 10962-1294 USA Customer Service: FAX: Technical Service: (800) 888-7008 (949) 851-0563 (800) 437-1705 Distributed by: Vertrieb durch: Distribué par: Distribuito da: Distrubuido por: ICN Pharmaceuticals, Inc. Costa Mesa, CA 92626 USA ICN Biomedicals GmbH Thüringer Straße 15 37269 Eschwege Telefon 05651/921-0 FAX 05651/921-151 Auftragsannahme: Tel: 0180/2306160 FAX 0130/868366 06B56138-R12 QER Q00-303 3/30/01