TP1 La réaction inflammatoire, un exemple de réponse innée.
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TP1 La réaction inflammatoire, un exemple de réponse innée. Activité 1 : SYMPTOMES ET ETAPES DE LA REACTION INFLAMMATOIRE Objectif : Déterminer les acteurs de cette réaction de défense et ses étapes. Matériel : - Préparations microscopiques d’une personne saine : peau et frottis sanguin - Microscope - Analyse sanguine de Léonor Activités et déroulement des activités Comprendre ou proposer une démarche de résolution Vingt-quatre heures après sa blessure à la main, Léonor présente une plaie cutanée douloureuse, gonflée, rouge et chaude. On cherche à expliquer l'origine de ces symptômes et à comprendre comment son organisme se défend. 1) Proposer une démarche expérimentale visant à répondre aux interrogations de Léonor concernant ses symptômes. Utiliser des techniques et gérer le poste de travail 2) Observer au microscope la lame de frottis sanguin afin de mettre en évidence au moins une cellule immunitaire impliquée dans la réaction inflammatoire. Exigences - Mise en relation des informations et des connaissances pour proposer une démarche. - Utilisation correcte du microscope : éclairage et grossissement adaptés, mise au point correcte. - Repérer un des leucocytes présents dans le sang et participant à l’immunité innée 3) Observer au microscope la coupe de peau saine afin d’identifier sa structure et les éléments la constituant. - Repérer les différentes « couches » de la peau, les vaisseaux sanguins, et le tissu conjonctif (fibres de collagène) Communiquer à l'aide de modes de représentation 4) Comparer l’observation microscopique de coupe de peau lors de la réaction inflammatoire de Léonor avec la coupe de peau saine afin d’identifier les caractères de la réaction inflammatoire. Compléter alors le document 1 avec vos observations. 5) L’analyse sanguine de Léonor permet elle de préciser quelques caractéristiques de l’inflammation ? 6) Mettre l’ensemble de ces observations en relation avec les symptômes identifiés lors de la réaction inflammatoire de Léonor. Choisir la forme la plus adaptée pour présenter votre réponse. - Légendes correctes des coupes de peau - Identification du type de cellules envahissant le derme lors d’une infection. - Comparaison de la densité des fibres de collagène et du diamètre des vaisseaux sanguins. - Saisie correcte des données. - Mise en relation correcte des informations et choix pertinent de la forme de la réponse. Appliquer une démarche explicative 7) Suivre le lien suivant : http://musibiol.net/biologie/animat/inflammat/inflamm0.swf 8) Donner un titre au document 2 fourni et à chaque étape représentée et légender chaque schéma afin d’expliquer à Léonor les étapes de la réaction inflammatoire à l’origine de ses symptômes. - Saisie correcte des données. - Titres et légendes complètes Activité 2 : CELLULES PHAGOCYTAIRES ET IMMUNITE INNEE Objectif : Montrer que certains mécanismes immunitaires non spécifiques, telle la phagocytose, des Vertébrés ont été conservés au cours de l’évolution. Matériel : 2 organismes vivants : moule, lombric - Aiguille montée - Microscope, lames, lamelle - Film phagocytose chez les Vertébrés - Solution de levures à 3 g/l considérées comme éléments étrangers quand elles sont mises en présence de cellules immunitaires. Activités et déroulement des activités Comprendre ou proposer une démarche de résolution Les vertébrés possèdent une immunité innée ne nécessitant aucun apprentissage préalable. Parmi les effecteurs de cette immunité, certaines cellules sont capables de réaliser la phagocytose, c'est-à-dire la reconnaissance, l’ingestion puis l’élimination des éléments étrangers à l’organisme. 1) Sachant que l’hémolymphe de certains invertébrés est un liquide du milieu intérieur qui joue le même rôle que le sang et la lymphe des Vertébrés, proposer une démarche d’investigation permettant de montrer que certains mécanismes immunitaires (ex : phagocytose) ont été conservés au cours de l’évolution. Utiliser des techniques et gérer le poste de travail 2) Observer le frottis sanguin pour repérer à l’aide de la fiche d’identification une cellule immunitaire capable de réaliser la phagocytose. Mettre au point sur ce type de cellule. Appeler l’examinateur pour vérification Exigences - Mise en relation des informations et des connaissances pour proposer une démarche. - Identification correcte d’une cellule capable de phagocytose (phagocyte) 3) Observer le film de la phagocytose chez les Vertébrés et repérer les caractéristiques de cette cellule immunitaire lui permettant de réaliser la phagocytose. - Mise en évidence des structures facilitant la phagocytose (pseudopodes) 4) Chez un des deux invertébrés proposés, réaliser un prélèvement d’hémolymphe (suivre le protocole de la fiche technique) - Respect des étapes du protocole - Bonne utilisation du matériel - Résultats de qualité - Paillasse bien organisée et rangée en fin de manipulation 5) Réaliser une préparation microscopique visant à mettre en évidence le phénomène de phagocytose (suivre les indications de la fiche technique) 6) Observer au microscope optique. Centrer sur une zone pertinente. Filmer vos observations microscopiques à l’aide de la caméra. Appeler l’examinateur pour vérifier les résultats. Communiquer à l'aide de modes de représentation 7) Présenter les données obtenues sous la forme de votre choix. - Utilisation correcte du microscope et de la caméra : éclairage et grossissement adaptés, mise au point correcte. - Forme de la réponse adaptée à l’observation Appliquer une démarche explicative 8) Exploiter les résultats obtenus pour répondre à la problématique. - Mise en relation correcte des informations Cellules sanguines Individu sain (par mm3) 5 000 000 6 935 Léonor (par mm3) 5 000 000 13 541 Granulocytes 4 500 11 786 Lymphocytes Monocytes 2 200 360 1 704 710 Hématies Total des Leucocytes, dont : DOC annexe : Résultats d’analyses sanguines d’un individu sain et de Léonor Réaliser un schéma bilan permettant d'expliquer d’une part l'origine des symptômes présentés par Léonor, d'autre part les moyens mis en œuvre par son organisme pour se défendre.- Le schéma bilan est complété dans son intégralité et de manière exacte : → tous les « acteurs » cellulaires et moléculaires de la réaction inflammatoire sont représentés → une chronologie des événements cellulaires et moléculaires ayant lieu est précisée → l'origine des symptômes présentés par Léonor est mise en évidence → les différents moyens mis en œuvre par l'organisme pour se défendre sont représentés - Les termes scientifiques employés sont exacts et adaptés vidéo sur la phagocytose : http://www.youtube.com/watch?v=xU8sG3qx9Wk animation sur la phagocytose : http://musibiol.net/biologie/animat/phago/phago.swf Prof : Animation détails de la diapédèse : :http://www.unifr.ch/anatomy/elearningfree/francais/bindegewebe/zelle/popup_zelle/f-diapedese.php Animations détails de la phagocytose : http://www.biologieenflash.net/animation.php?ref=bio-0064-2 http://monde.ccdmd.qc.ca/ressource/?demande=desc&id=51585 joli animations en 3D : http://filmfestivalinformation.com/index.php?id=&page=3&post=&category=&youtubevideos_id=CEOV-SFTlpY observations de cellules sanguines : http://www.svt.ac-versailles.fr/spip.php?article403 *photos de coupe de peau sine et inf : http://acces.ens-lyon.fr/acces/ressources/immunite-et-vaccination/enseigner/ressources-logicielles/nouveau-programme-immunologie-2012/la-reactioninflammatoire-aigue-mecanime-essentiel-de-limmunite-innee/ressources/scientifique/coupe-histologique-de-peau-avant-et-lors-dune-reaction-inflammatoireaigue-1 Fiche technique : Observation d’hémocytes d’invertébrés 1. Obtention d’une culture d’hémocytes 2. Réalisation d’une préparation microscopique (hémocytes + levures) pour mettre en évidence le phénomène de phagocytose. Face dorsale a. Déposer sur la lame porte objet, deux lamelles de part et d’autre de la goutte d’hémolymphe (voir schéma ci-dessus) b. Ajouter une goutte d’une solution de levures à 3g/l à la goutte d‘hémolymphe c. Recouvrir d’une 3eme lamelle par-dessus le liquide (cette 3eme lamelle doit reposer sur les deux lamelles latérales). Moule entrouverte retournée cylindre Lame porte objet hémolymphe Hémolymphe Solution NaCl à 0,7% Lame porte objet Levures Hémocyte de lombric 3. Exemple de résultat (observation au microscope optique, X 400)
