Intérêts et indications de l`étude immuno

31/05/12'
Etude'Immuno1histochimique'
dans'le'Cancer'du'colon'
'
Intérêt'et'indica=ons'
'
Pierre%Déchelo,e%
Pe=t'lexique'
CCR':'Cancer'colo1rectal'
MSI':'MicroSatellite'Instability'
' '(ex'MMR':'MisMatch'Repair)'
RER':'Replica=on'Error'
niveau'instabilité':'
'
'
'élevée':'MSI1H':'high''
'basse':'MSI1L':'low'
MMS':'phénotype'stable'
1'
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Cancer'colo1rectal'(CCR)'
CCR':'98'%'adénocarcinome'(lieberkhunien)'
Survenue':''
' 'sporadique' '/' '113'%'$'familial'
'
15'%'totalité'CCR'=>'instabilité'des'micro1satellites'
' ' '(MSI)'MicroSatellite'Instability'(ex'MMR':'MisMatch'Repair)'
'non'répara=on'des'mésappariements'ADN'
'phénotype'tumoral'instable'
' ' ' ' ''
Cancer'colo1rectal'(CCR)'
=>'Parmi'ces'15'%'de'CCRs'avec'instabilité'microsatellites''
'
'1'1/3':'instabilité'héréditaire''
'muta=on'germinale'd'un'des'gènes'répara=on'
'
'1'2/3':'phénotype'instable''
'origine'épigéné=que'non'transmissible'
'hyperméthyla=on'du'promoteur'gène'MLH1'
' '(sénescence,'ap'60'ans)'
'
NB':'hyperméthyla=on'possible'sur'instabilité'héréditaire'!'
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Qu'est1ce'que'
l'Instabilité'microsatellitaire'
1'Défaut'de'répara=on'des'mésappariements'de'l'ADN''
'
'(MMR'=''MisMatch'Repair)'
'
1'Microsatellites':''
.'séquences'courtes'bi1nucléo=des'non'codantes'
.'source'de'polymorphisme'inter1individuel''
.'fréquemment'répétées'au'cours'de'la'replica=on'd'ADN'
'=>'très'exposés'aux'erreurs'replica=on'
'=>'instabilité'géné=que'
'
Rôle'du'Système'MMR'
(MisMatch'Repair)'
Réparer'les'mésappariements'ADN'
Ensemble'de'protéines'(réparases)'sous'contrôle'génique'
Les'principales':'
'MSH2,'MSH3,'MSH6''
'MLH1,'MLH3,'PMS2''
Correc=on'des'erreurs'de'replica=on'avant'division'
Ac=on'sous'forme'de'complexes'bi1protéiques':'
'MLH1/PMS2' '&' 'MSH2/MSH6'
'ex=nc=on'souvent'de'manière'couplée'
'
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Causes'déficience'système'MMR'
MSI':'MicroSatellite'Instability'
Altéra=on'soma=que'ou'génique'
'
'gène'codant'pour'protéine(s)'MMR'
'
80'%'CCR'MSI':'
'
'inac=va=on'soma=que'MLH1'
'
'phénomène'de'sénescence'(après'60'ans)'
'
'hyperméthyla=on'bi1allélique'du'promoteur'
'
'
'70%%%associé%muta5on%soma5que%gène%BRAF%
'
20'%'CCR'MSI'(3'%'totalité'des'CCR)'
'
'inac=va=on/muta=on'cons=tu=onnelle'd'1'allèle'
'
'puis'muta=on'soma=que'du'2nd'allèle'système'MMR'
'
'concerne'couples':'MLH1'/'PMS2 '& ''MSH2'/'MSH6'
'
Pourquoi'détecter'instabilité'?'
Instabilité'géné=que':'$'Lynch'
''
Prédisposi=on'héréditaire'au'développement'de'cancer'
AD'pénétrance'variable'
Spectre'étroit':'
'ADKs':'Colo1Rectal,'endomètre'&'grêle'
Spectre'large':'
'en'+':'estomac,'carcinomes'ovariens,'Voies'biliaires'
'
Critères'individuels'&'familiaux'
' 'Amsterdam'&'Bethesda'
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Détec=on'instabilité''
(géné5que%ou%non)'
Diagnos=c':''
'technique'de'référence'
'bio1moléculaire'(séquençage'après'PCR)'
'niveau'instabilité':'
' 'élevée':'MSI1H':'high'(2'marqueurs'instables)'
' 'basse':'MSI1L'low'(1'seul'marqueur'instable)'=>'
' ' '=>'caractéris=ques'peu'≠tes'tumeurs'stables'
' ' 'phénotype'MMS'(Stable)'''
Indica=ons'/'intérêt'IHC'
Présélec=on'des'pa=ents'
Iden=fica=on'candidats'au'$'de'Lynch'
Détec=on'de'l'instabilité'soma=que'
Critères'retenus'pour'la'détec=on'IHC''
' 'CCR%avant%60%ans'
'
'(ou'demande'spécifique'ou'ATCDs'connus)'
'
5'
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Immuno1histochimie'
Prélèvement'standart':'biopsie'ou'pièce'
4'ACs':'protéines'de'répara=on'mésappariements'
'MLH1,'MSH2,'MSH6,'PMS2'
Expression'normale'':'
'noyau'¢'épithéliales'normales'et'mésenchyme'
' ' '='contrôle%interne%
'et'noyau'¢'tumorales'
Si'muta=on':''
' 'absence'expression'dans'¢'tumorales'
' 'persistance'ailleurs'
''
6'
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MSH2*
MLH1*
7'
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PMS2*
MSH2*
MLH1*
PMS2*
8'
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IHC''
résultats'&'implica=ons'
Perte'isolée'expression':'MSH2,'MSH6'ou'PMS2'
'en'faveur'altéra=on'cons=tu=onnelle'du'gène'
'=>'Cs'Onco1géné=que'/'biologie'moléculaire'
'
Éliminer'cause'non'géné=que'd'instabilité'=>''
=>'perte'isolée'expression'MLH1':'
'1'soit'altéra=on'cons=tu=onnelle'génique'
'1'soit'hyper1méthyla=on'bi1allélique'promoteur'du'gène'
'
'=>'repose'sur'étude'BRAF'
'
'muta=on'présente'dans'70180'%'CCR'MSI'par'hyper1méthyla=on'
promoteur'gène'MLH1'
'
'muta=on'absente':'Cs''/'biologie'moléculaire'
9'