Pathogènes souris
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PATHOGÈNES SOURIS – DE LA THÉORIE À LA RÉALITÉ Dre Anne-Marie Catudal et Dre Daphnée Veilleux-Lemieux Plan de la présentation • Introduction • Historique • Prévalence • Virus • Bactéries • Parasites • Techniques de détection • Cas cliniques Introduction Les rats et les souris peuvent être affectés par un nombre important de pathogènes. MAIS !! Qu’en est-il de la prévalence des pathogènes ? Des signes cliniques ? Et des répercussions sur la recherche ? Introduction Infection ≠ maladie Infection = présence d’un agent infectieux o Commensal o Opportuniste o Pathogène Introduction Facteurs d’infection • Agent infectieux • Souche • Quantité de particules infectieuses • Animal • Fond génétique • Système immunitaire • Sexe • Âge • Maladie(s) concomitante(s) Introduction Sources de contamination • Animal animal/humain • Contact direct • Contact indirect • Vecteurs passifs • Voies d’infection • Ingestion • Inhalation • Sources • Animal • Humain Expérimentation • Environnement Introduction • Laisser les portes ouvertes • Soulever le couvercle d’une cage à l’air libre • Replacer un animal en fuite dans sa cage • Zone contaminée zone non contaminée • Absence de stérilisation/traitement – instruments chirurgicaux, litière, nourriture, eau, etc. • Déplacer les éléments de cage en cage • Élever des rongeurs à la maison ! Historique Trois périodes ont été identifiées et révisées par Weisbroth • Domestication • Dérivation gnotobiotique • Éradication 1880 1950 1960 1985 1980 ….. Prévalence – virus Prévalence – bactéries Prévalence – parasites Virus – MNV o Virus à ARN non enveloppé o Découvert récemment (2003) o Génétiquement distinct du norovirus humain o Aucun signe clinique ou lésions chez animaux immunocompétents Cause près de 90 % des gastroentérites non bactériennes chez l’humain Virus – MNV o Aucun autre norovirus identifié chez les animaux de laboratoire o MNV-1 o Aucune maladie, lésion ou signe cliniques o SAUF ! Chez les RAG -/-STAT-/- double KO o Mortalités +++ avec infection généralisée, encéphalite et pneumonie Virus – MNV o Qu’en est-il des effets sur la recherche…. o Inhibition de la croissance des macrophages et des cellules dendritiques o Agrégation de macrophages MAIS BONNES NOUVELLES ! Ne passe pas la barrière placentaire DONC redérivation par césarienne ou transfert embryon = EFFICACE ! Virus – MHV Mouse hepatitis virus (MHV) o Virus à ARN enveloppé o Prévalence modérée o Deux types principaux : o Entérotropisme (SGI) o Polytropisme (multiples tissus) Virus – MHV o Peu résistant dans l’environnement o Probablement non infectieux après 48 heures o Très contagieux o Transmission par fèces, contact direct, aérosols, vecteurs passifs (gants, cages, litière, etc.) o Faire aussi attention à : o Cellules en culture o Lignées tumorales Virus – MHV Tiré de Clifford C. B., Common infectious diseases in laboratory rats and mice, Charles River Laboratories Tiré de http://dora.missouri.edu/mouse/mouse-hepatitis-virus-mhv/ Virus – MHV Tiré de ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Virus – MHV o Effets sur la recherche o Effets marqués sur le système immunitaire o Nécrose : foie, intestins, cerveau, nœuds lymphatiques, etc. o Modifications activités enzymatiques o Rejets des greffons o Modifications modèles : obésité, infection, tumeurs, etc. o ETC !!!!! o Contrôle o Désinfection efficace ++ o Auto-limitant chez immunocompétents o ≠ reproduction et nouveaux animaux 6-8 semaines Virus – Parvovirus MPV-1, MPV-2, MPV-3, MVM o Virus à ADN non enveloppé o Virus actif dans l’environnement o Résistant à la dessiccation o Résistant à plusieurs désinfectants Virus – Parvovirus o Transmission o Urine o Fèces o Sécrétions oronasales o Contamination : nourriture, litière, matériel SOURCES NOMBREUSES ET SURTOUT PERSISTANCE DANS L’ENVIRONNEMENT ET LES ANIMAUX Virus – Parvovirus o MPV-1 à 5 o Plus fréquent que le MVM o Infection persistante donc NON auto-limitant o Aucune lésion anatomique o B6 = résistantes +++ ! o MVM o Auto-limitant en 4 semaines o Pathogène pour les cellules hématopoïétiques sans lésion Virus – Parvovirus o MPV-1 à 5 o Suppression de l’activité des lymphocytes T o Augmentation des rejets de greffes o Mortalités fœtales, petites portées Persistant (≠ auto-limitation) o MVM o Dysfonction du cytosquelette o Oncotropique et oncolytique o Suppression de l’activité des lymphocytes T Élimination = juste redérivation par transfert embryon Désinfection agressive de l’environnement Rapporté comme présent dans le sperme Bactéries – Helicobacter spp. o Gram négative o Micro-aérophile o Incurvée ou spiralée o Infecte plusieurs espèces o Non résistante dans l’environnement o Transmission féco-orale o Élimination : multiples solutions Tiré de ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Bactéries – Helicobacter spp. Helicobacter Espèce(s) touchée(s) H. bilis Rat, souris, gerbilles, chiens, chats, humains, et autres ? H. hepaticus, muridarum, rodentium, trogontum, typhlonius Rats, souris H. rappini Souris, moutons, porcs, chiens, chats, humains Bactéries – Helicobacter spp. o Asymptomatique o Selon lignée de souris mais aussi souche de la bactérie ! Prolapse rectal Tiré de Clifford C. B., Common infectious diseases in laboratory rats and mice, Charles River Laboratories Colite Hépatite Tiré de ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Bactéries – Pasteurella o Pasteurella pneumotropica o Gram négative o Opportuniste o Flore normale o Peau o Système respiratoire o Système digestif Tiré de Wikipédia. Bactéries – Pasteurella o Abcès sous-cutanés o Conjonctivite o Rhinite, otite, lympho-adénite, mastite, métrite……. Enrofloxacin 7-14 jours Exclusion des colonies immunodéficientes Redérivation Tiré de ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Parasites – oxyures o Nématodes o Aspicularis tetraptera (1) o Syphacia obvelata (2) o Cycle de vie direct 1 2 Tiré de Clifford C. B., Common infectious diseases in laboratory rats and mice, Charles River Laboratories Parasites – oxyures Tiré de Clifford C. B., Common infectious diseases in laboratory rats and mice, Charles River Laboratories Parasites – mites Myocoptes musculinus Myobia musculi Tiré de ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Radfordia affinis Techniques de détection PCR, profile sérologique, culture : où, quand, quoi, comment ?? Animal o PCR o Sérologie o Culture bactérienne et autres Techniques de détection o PCR o Polymerase chain reaction o Détecte les acides nucléiques (ADN, ARN) o Test spécifique à chaque pathogène DÉTECTE LA PRÉSENCE DU PATHOGÈNE Techniques de détection o PCR Techniques de détection o PCR o Très sensible o Animal mort ou vivant o Environnement o Interprétation des résultats requise o Grand choix de tests o Choix de l’échantillon dépend du pathogène Techniques de détection o Sérologie o ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) o Détecte les anticorps produits par l’animal pour se défendre contre un agent pathogène o Anticorps produits assez spécifiques du pathogène o Un résultat positif indique une exposition (présente ou passée) DÉTECTE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE DE L’HÔTE Techniques de détection o Sérologie Techniques de détection o Sérologie ENZ Techniques de détection o Sérologie o Animal immunocompétent requis o Exposition suffisante au pathogène requise o Interprétation des résultats requise o Choix de tests plus limité Tiré de Wikipédia. Techniques de détection o Culture bactérienne et autres Cas clinique # 1 Cas clinique # 1 Cas clinique # 1 o Souris femelle o Diagnostic: Pasteurella pneumotropica o Diagnostics différentiels o Staphylococcus aureus o Streptococcus o Corynebacterium o Klebsiella o Mycoplasma Cas clinique # 2 Quelle(s) méthode(s) diagnostique(s) devrai(en)t être prise(s) ? Cas clinique # 3 Cas clinique # 4 o Pour la souris nue du cas précédent, quel type d’échantillon devrait être envoyé au laboratoire de diagnostic pour tenter de trouver l’agent en cause ? o Note : elle était hébergée avec une autre souris nue. Cas clinique # 5 o Quel est le diagnostic ? o Quels sont les pathogènes en cause ? o Quels sont les traitements à mettre en place ? Cas clinique # 6 o Sérologie vs PCR ! o Facteurs à considérer ? Références • • • • • • • • • • ACLAM, Laboratory Animal Medicine 3e édition, 2015. Baker D., Natural Pathogens of Laboratory Mice, Rats, and Rabbits and Their Effects on Research, Clin Microbiol Rev. 1998. Charles River, Technical Sheet – MHV, 2009. Charles River, Technical Sheet – Norovirus, 2009. Charles River, Technical Sheet – Parvovirus, 2009. Chichlowski M. et Hale LP., Effects of Helicobacter Infection on Research: The Case for Eradication of Helicobacter from Rodent Research Colonies, Comp Med. 2009 . Clifford C. B., Common infectious diseases in laboratory rats and mice, Charles River Laboratories. Clifford C. B., A guide to modern strategies for infection surveillance of rodent populations: beyond sentinels, Charles River Laboratories, 2014. CCPA, Module de formation du CCPA sur les maladies infectieuses, 2010. Pritchett-Corning and al., Comtemporary prevalence of infectious agents in laboratory mice and rats, Laboratory Animals, 2009.
