L'hypoxie induit l'expression du VEGF-C dans traductionnel
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L'hypoxie induit l'expression du VEGF-C dans les loci métastatiques via un mécanisme traductionnel Florent MORFOISSE Directeur d’équipe : Dr Barbara Garmy-Susini Team 15 I2MC : « Régulations moléculaires des facteurs (lymph)angiogéniques dans les pathologies vasculaires » Homéostasie tissulaire Transport des graisses Surveillance immune Drainage des fluides « veines blanches » Transport reverse du cholesterol Système lymphatique Dissémination métastatique Lymphatic vessels Lymphoedeme Inflammation chronique Contrôle Inflammation Avraamides C. Garmy-Susini B.. Nat Rev Cancer 2008 Huggenberger, J. Exp. Med. 2010 Lymphangiogenèse et développement tumoral Poumons Métastases pulmonaires Métastases ganglionnaires VEGF-A VEGF-C VEGF-A VEGF-D Avraamides C. Garmy-Susini B. and Varner J. Nat Rev Cancer 2008 Régulations de l’expression du VEGF-C au cours de la carcinogenèse? Synthèse protéique cellulaire ADN Transcription (A)n mARN PI3K/AKT mTOR 4E-BP1 43S 4E-BP1 4E-BP1 (A)n eIF4G (A)n eIF4E P P eIF4G 4E-BP1 Traduction Inhibition Expression tumorale du VEGF-C dans les tumeurs humaines Sain Tumoral VEGF-C Traduction Mécanismes moléculaires assurant l’expression du VEGF-C malgré un blocage de la traduction cap-dépendante? Traduction du VEGF-C selon un mécanisme cap-indépendant? Modèles murins 0 Carcinome pulmonaire (LLC) Carcinome mammaire (4T1) Carcinome pancréatique (Capan-1) 7 14 21 28 Days La lymphangiogenèse est induite au cours du développement tumoral Sur-expression du VEGF-C associée à l’inhibition de la traduction cap-dépendante Régulations traductionnelles VEGF-C Traduction Activation d’un mécanisme de traduction cap-indépendante du VEGF-C durant la carcinogenèse Un mécanisme de traduction cap-indépendante : les IRES ADN Transcription mARN (A)n Traduction IRES-dépendante (Internal Ribosome Entry Site) Traduction cap-dépendante 43S 43S stress (A)n 4E-BP1 expression dephosphorylation eIF4E (A)n Présence d’un IRES dans la région 5’NT du VEGFC Structure de la région 5’NT Caractérisation de la structure 3D Identification de deux domaines impliqués dans des structures tridimensionnelles Activité IRES VEGF-C (LucF/LucR) Activité IRES L’ARNm du VEGF-C humain/murin possède un IRES L’activité de cet IRES augmente lors du développement tumoral Activité de l’IRES du VEGF-C dans les métastases IRES du VEGF-C massivement activé dans les métastases Quel stress est impliqué? Système lymphatique et hypoxie Tumeur Ganglions lymphatiques Hypoxie Le système lymphatique est un réseau entièrement hypoxique Les lymphatiques se développent dans les zones d’hypoxie intra-tumorale 4T1 Activité IRES VEGF-C (LucF/LucR) Capan-1 Activité IRES VEGF-C (LucF/LucR) Activité IRES VEGF-C (LucF/LucR) L’hypoxie active l’IRES du VEGF-C in vitro VEGF-C Traduction LLC Régulations de l’IRES du VEGF-C par l’hypoxie in vivo Modèle murin PHD2+/LLC Stabilisation de HIF1α en normoxie Normalisation endothelium Meilleure oxygénation des tumeurs PHD2+/(Mazzone et al, Cell, 2009) Meilleure oxygénation des tumeurs : diminution de l’activité IRES du VEGF-C L’hypoxie active l’IRES du VEGF-C in vivo. Implication de HIF1α dans l’activation de l’IRES du VEGF-C? Régulations transcriptionnelles HIF1 HRE VEGFA VEGFC/D Régulations traductionnelles Implication de HIF1α dans l’activation de l’IRES du VEGF-C? VEGF-C IRES activity (LucF/LucR X100) Activité IRES VEGF-C L’hypoxie induit l’IRES du VEGF-C via un mécanisme traductionnel indépendant de HIF1α. Conclusion Coiffe IRES Coiffe IRES Normoxie Hypoxie Expression du VEGF-C Lymphangiogenèse tumorale Morfoisse et al, Cell Report, 2014 Remerciements Institute of Metabolic and cardiovascular diseases of Toulouse Team 15 Barbara Garmy-Susini Clément Fraisnay Monica Kessner Marianne Spruit Anne-Catherine Prats Françoise Pujol Franky Hantelys Edith Renaud Toulouse Cancer Research Center Julie Guillermet-Guibert Stéphane Pyronnet Corinne Bousquet Stéphanie Cassant-Sourdy Peter Carmeliet Anna Kuchnio Mieke Dewerchin MB. Delisle Anne Gomez-Brouchet Françoise Lenfant Pascale Romby Stefano Marzi AC. Helfer
