Administration de probiotiques pour renforcer le système immunitaire des veaux laitiers Bridget Fomenky1, 2, Frédéric Beaudoin1, Johanne Chiquette1, Guylaine Talbot1, Nathalie Bissonnette1, Martin Lessard1, Yvan P. Chouinard2 et Eveline M. Ibeagha-Awemu1* et Agroalimentaire Canada, Centre de recherche et de développement sur le bovin laitier et le porc, Sherbrooke (Québec) J1M 0C8,Canada; 2 Département des sciences animales, Université Laval, Québec (Québec) G1V 0A6, Canada. *Correspondance : [email protected] 1Agriculture INTRODUCTION Explosion oxydative Pendant les premiers stades de vie, le développement inadéquat du système immunitaire des veaux et le stress lié à leur sevrage contribuent à leur sensibilité accrue aux maladies infectieuses. Semaines 1 à 6 (Jours 1 à 42) Lait de remplacement Au cours de leur développement, les veaux acquièrent graduellement la capacité de réagir aux pathogènes, et leur système immunitaire doit apprendre à se développer pleinement. Jours de. Ainsi, des vaccins et des additifs alimentaires comme les probiotiques sont administrés pour renforcer le développement du système immunitaire au cours des premières semaines de vie. -3 Sevrage Semaines 7à8 (jours 43 à 51) Phase post-sevrage Semaines 9 à 14 (Jours 52 à 98) Lait de remplacement et ration de démarrage 1 7 14 21 28 35 42 7000 Ration de démarrage et foin 49 56 63 72 79 86 91 98 l'expérience SCB 6000 Fluorescence moyenne Phase pré-sevrage Phase de stabilisation ATB 5000 LA 4000 Témoin 3000 2000 Figure 1 : Dispositif expérimental. 1000 Période de sevrage Cependant, l’effet des probiotiques sur le développement du système immunitaire des veaux et la capacité de ces derniers à résister aux infections pendant les premiers stades de vie ne sont pas bien documentés. 0 Jour 15 Mesures : Jour 59 Jour 66 Jour 87 Chaque point de données représente la fluorescence moyenne de 4 observations. De façon générale, le SCB présente un plus grand potentiel d'explosion oxydative dans l'ensemble de l'étude, et particulièrement au cours du sevrage, par comparaison aux autres traitements (figure 3). Saccharomyces cerevisiae Les polymorphoneutrophiles (PMN) ont été stimulés à l'aide de lipopolysaccharides (LPS) et de phorbol myristate acétate (PMA); leur explosion oxydative a été révélée à l'aide de la dihydrorhodamine 123 (DHR). Les cellules mononuclées du sang périphérique (PBMC) des veaux immunisés au jour 29 ont été isolées, colorées à l'aide d'une teinture de CFSE (ester succinimidylique de carboxyfluorescéine) et stimulées avec de l'ovalbumine, à 20 µg/ml pendant 5 jours, avant l'identification de la prolifération cellulaire par un essai de dilution de colorant fluorescent. Schéma montrant la manière dont la cellule libère des espèces réactives d'oxygène pour faire face à une bactérie qui l'envahit (DeCoursey, 2010) MATÉRIEL ET MÉTHODES Animaux : Quarante-huit veaux (de 2 à 7 jours) ont été sélectionnés selon leur poids et les anticorps circulants de type IgG, et ont été séparés en quatre différents groupes de traitement (tableau 1) : Prolifération lymphocytaire Tableau 2 : Pourcentage de cellules en prolifération (moyennes de moindres carrés) en réponse au vaccin d’ovalbumine Témoin ATB LA SCB **43 31,2B 33,3B 36,4AB 49,3A 4,0 0,0236 47 41,0 42,6 49,8 52,9 3,5 0,2263 53 24,3 29,4 29,3 37,05 3,8 0,3021 66 19,7B 29,6AB 24,0AB 36,0A 4,8 0,0417 87 21,3B 37,6AB 28,5AB 39,6A 4,6 0,0409 L'explosion oxydative (capacité de libérer des espèces réactives d'oxygène pour dégrader les pathogènes qui envahissent l’organisme) par les PMN et la prolifération lymphocytaire ont été mesurées à l'aide de la cytométrie de flux, et la fluorescence moyenne a été obtenue à l'aide du logiciel FACSDiva BD (BD FACS Canto II BD Biosciences, Mississauga (Ontario), Canada). * Erreur-type de la moyenne; **Pour chaque jour, les moyennes ne portant pas les mêmes lettres diffèrent de façon significative. Analyse des données : Une augmentation importante de la réaction de prolifération a été réalisée après l'administration du vaccin d'ovalbumine, et de SCB (P<0,05) (tableau 2). L'analyse des données a été faite à l'aide du logiciel PROC Mixed de SAS (v9.3, SAS Inc., Cary, NC), selon un aménagement de blocs complets randomisés, avec des mesures répétées, et des ajustements de Tukey pour des niveaux multiples de comparaison. CONCLUSION RÉSULTATS ET DISCUSSION Les résultats obtenus laissent croire que le SCB pourrait améliorer la capacité d'explosion oxydative des cellules, particulièrement pendant les périodes critiques de stress comme celle du sevrage. Les traitements n'ont eu aucun effet sur les niveaux de glucose plasmatique. Le SCB améliore la prolifération lymphocytaire après la vaccination. Toutefois, la concentration de glucose plasmatique a diminué de manière importante (P<0,0001) après le sevrage (figure 1). Le SCB a le potentiel de renforcer le système immunitaire des veaux au cours des premières semaines de vie, une période critique de vulnérabilité aux maladies. Cela pourrait s’expliquer par le fait qu'une source importante et facilement accessible de glucose (lait de remplacement) n'était plus offerte. Les animaux ont été gérés selon des procédures normalisées. Le dispositif expérimental est illustré à la figure 1. ATB TÉMOIN Concentration (mM/L) TRAITEMENT E.-T. M* Valeur p max Jour Glucose plasmatique Tableau 1 : Traitements LA SCB REMERCIEMENTS Ce projet est financé par Agriculture et Agroalimentaire Canada. Nous aimerions remercier le personnel des étables pour leur assistance pendant la période du projet passée avec les animaux, de même que Steve Méthot pour l'analyse statistique des données. RÉFÉRENCES Après le sevrage, tous les veaux ont reçu du foin à volonté, ainsi que leur traitement respectif (figure 1, tableau 1). McAllister, T.A., K.A.Beauchemin, A.Y. Alazzeh, J. Baah, R.M. Teather et K. Stanford. (2011) Survol de l'administration directe d'agents microbiens aux bovins pour atténuer l'incidence des microorganismes pathogènes et accroître la production. Revue canadienne de science animale. 91:193-211. Jours du projet Figure 2 : Glucose plasmatique © 2015 Jour 54 Dans le cadre de tous les traitements, on a relevé une diminution du potentiel d'explosion oxydative pendant le sevrage (figure 3), avec le groupe SCB qui, à ce stade, présentait un rendement supérieur. L’explosion oxydative est une propriété qui permet à une cellule de libérer des espèces réactives d’oxygène (radical superoxyde, peroxyde d’hydrogène) pour détruire les pathogènes qui envahissent l’organisme. Les lymphocytes sont des cellules immunitaires qui jouent un rôle central dans la réaction immunitaire; ils guident la réaction immunitaire pour éviter les infections dues à des pathogènes. Jour 47 Figure 3 : Capacité d’explosion oxydative des neutrophiles du sang Objectifs Évaluer les effets de Saccharomyces cerevisiae boulardii (probiotique) sur la capacité d'explosion oxydative des neutrophiles et la prolifération lymphocytaire des veaux (après la vaccination) durant les premiers stades de vie. Jour 43 Husband, A.J., A.K. Lascelle. 1975. Antibody responses to neonatal immunization in calves. Res. Vet. Sci. 18: 201-207. DeCoursey, T.E. (2010) Voltage-Gated Proton Channels Find Their Dream Job Managing the Respiratory Burst in Phagocytes. Physiology Vol. 25 (1) 27-40 DOI: 10.1152/physiol.00039.2009 Symposium sur les bovins laitiers 2015, le 29 octobre 2015, Drummondville (Québec), Canada