Etude de l`interaction antagoniste entre Lactibacillus sp. et quelques

République Algérienne Démocratique et Populaire Ministère de l'enseignement
supérieur et de la recherche scientifique
Université d'Oran Es-Senia Faculté des Sciences
Département de Biologie
MEMOIRE DE MAGISTER
Option: Microbiologie Alimentaire
Thème
Etude de l’interaction antagoniste entre Lactibacillus sp.
et quelques souches d’entérobactéries
Présenté par
Mademoiselle Bey Faiza
Soutenu le : / /2009
Devant le jury:
Pr. SAIDI Djamel Président Université d’Oran
Pr. SLIMANI Miloud Examinateur Université d’Oran
Dr. ABBOUNI Bouziane Examinateur Université de Sidi Bel-Abbés
Dr. CHERIGUENE Abderrahim Examinateur Université de Mostaghanem
Pr. BENSOLTANE Ahmed Rapporteur Université d’Oran
Année universitaire
2008-2009
Remerciement
Avant tout, je remercie Dieu le Tous Puissant de m’avoir donné la force, le
courage, la santé et la patience pour pouvoir accomplir ce travail.
J’adresse mes sincères remerciements au Pr BENSOLTANE Ahmed
qui m’a offert par ses compétences scientifiques et pédagogiques et ses qualités
humaines, les moyens de mener à bien ce travail. Je tiens également à le remercier
pour la confiance et le soutien permanent.
J’adresse toute ma reconnaissance au Pr SAIDI Djamel d’avoir
accepter de présider le jury de soutenance.
Je remercie Pr SLIMANI Miloud, Dr ABBOUNI Bouziane et Dr
CHERIGUENE Abderrahim d’avoir accepter de juger mon travail.
Je remercie Monsieur BOUDILMI Benabdellah docteur vétérinaire au
laboratoire vétérinaire régional de Tlemcen.
A la mémoire de Monsieur LOKBANI Ismail spécialiste en virologie au
laboratoire vétérinaire régional de Tlemcen.
Je remercie Monsieur LAKHAL Abdalhafid chargé de cours à l’université
Aboubakr Belkaid Tlemcen.
A tous le personnelle du laboratoire vétérinaire régional de Tlemcen.
A mes chers parents pour leur aide, leur soutien durant mon travail, et à toute
ma famille.
Enfin je remercie tous ceux qui ont de prés ou de loin contribué
à la réalisation de ce travail.
Résumé
Afin de stabiliser le microbiote intestinal et prévenir ou traiter les infections
entériques, il est suggéré depuis des décennies d’utiliser certaines bactéries lactiques
dites « probiotiques». La consommation de ces bactéries, qui sont des composants
normaux du microbiote intestinal, aurait des effets bénéfiques sur la santé.
Cependant, leur éventuel rôle prophylactique ou thérapeutique n’a été que très peu
étudié.
En ce basant sur ces critères, on a réalisé l’interaction bactérienne entre les
souches de Lactobacillus (L. lactis,L. helveticus et L. rhamnosus) et les
Entérobactéries (E. coli,S. typhi et K. oxytoca) on passant par trois étapes :
La mise en évidence d’Entérobactéries qui repose sur l’observation
macroscopique et microscopique qui révèlent des petits bacilles à caractère Gram
négatif. La culture de ces bactéries dans des milieux sélectifs et dans des meilleures
conditions de croissance nous a permit d’isoler E. coli,S. typhi et K. oxytoca.
A la fin de cette étape on a réalisé l’antibiogramme qui a été important pour
étudier la réaction de ces bactéries vis-à-vis des antibiotiques utilisés et qui nous
conduit vers un traitement éventuel.
L’étude microbiologique des souches de Lactobacillus qui nous a montré que
ces bactéries sont des bacilles, Gram positif, les tests biochimiques et la fermentation
des sucres nous ont permit d’identifie et confirmé l’appartenance de ces souches au
genre Lactobacillus. L’étude de leurs sensibilité aux antibiotiques est un critère
important pour sélectionner les probiotiques , la résistance est recherché chez ces
souches pour qu’elles soient actif même après un traitement aux antibiotiques.
L’interaction entre Lactobacillus (L. lactis,L. helveticus et L. rhamnosus) et
les Entérobactéries (E. coli,S. typhi et K. oxytoca) a donné des résultats positifs
observés par la présence des halos d’inhibition. E. coli est inhibée par Lb1 avec un
diamètre de 19mm et de 23mm avec Lb2 et 18mm avec Lb3, tan disque S. typhi est
inhibée par Lb1avec un diamètre de 19mm et de 28mm avec Lb2 et 31mm avec Lb3,
et pour la souche K. oxytoca sa croissance est inhibée par Lb1 avec un diamètre de
17mm et de 22mm avec Lb2 et 19mm avec Lb3, et en fin on a constaté que Lb1
inhibe la croissance de E. coli ATCC 25922 avec un diamètre de 24mm et de 23mm
avec Lb2 et de 20mm pour Lb3. Des tests supplémentaires sont nécessaires pour
connaitre la nature exacte de l’agent inhibiteur. Les résultats ont montré que la
sécrétion des acides organique et la production des bactériocines sont à l’origine de
l’inhibition. A la fin on a réalisé, l’intérêt d’étudier cette interaction est de trouvé un
moyen de cont rôlé l’effet pathogène des Entérobactéries a base des propriétés
antimicrobiennes des souches de Lactobacillus.
Mots clés : Enterobactéries, Maladies intestinale, infection urinaires, Intéraction,
Lactobacillus, Probiotiques, Antagonisme, Bactériocines, infection entérique.
Abstract
For decades, the use of certain lactic acid bacteria as so-called probiotics has
been suggested in order to stabilize the intestinal microbiota and thus prevent or treat
enteric infections. Consumption of these bacteria, which are normal components of
human intestinal microbiota, is reputed to be beneficial to health. However, their
possible role as therapeutic or prophylactic agents has been studied very little.
While basing for on these criteria, we started to carry out the bacterial
interaction between Lactobacillus strains (L. lactis,L. helveticus,L. rhamnosus) and
Enterobacteria (E. coli,S. typhi and K. oxytoca) while passing by three stages:
The description of Entérobactérias which rests on the observation macroscopic
and microscopic who reveal small bacilli with character negative Gram. Culture of
these bacteria in mediums selective and in better conditions of growth us a made it
possible to insulate E. coli, S. typhi and K. oxytoca. With the end of this stage one
carried out the antibiogram which a was important for studies the reaction of
Entérobactérias with respect to the antibiotics used and which leads us towards a
possible treatment.
The study microbiological of Lactobacillus strains who showed us that these
bacteria are bacilli, positive Gram. Biochemical tests and the fermentation of sugars
us have allowed identifies and confirmed membership of these to the strains
Lactobacillus.The study of their sensitivity to antibiotics is a significant criterion to
select the probiotiques ones, resistance is required at these strains so that they are
active even after a treatment antibiotics.
The interaction between Lactobacillus strains (L. lactis,L. helveticus,L.
rhamnosus) and Enterobacteria (E. coli,S. typhi and K. oxytoca) gave positive results
observed by the presence of the halations of inhibitions. E. coli is inhibited by Lb1
with a diameter of inhibition of 19mm and 23mm with Lb2 and finally of 18mm with
Lb3, In a second study the growth of S. typhi was inhibited by Lb1 with a diameter of
inhibition of 19mm and 28mm with Lb2 and finally of 31mm with Lb3.Thereafter
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