Correction

FACULTE
De
PHARMACIE
TUTORAT UE2 2010-2011 – La cellule et les
tissus
CORRECTION Séance n°1 – Semaine du 20/ 09 /2010
Méthodes d’étude de la cellule – Carillo - Delbecq
Séance préparée par Cindy, Damien, Alexandra et Angélique.
Errata :
QCM 1, item e : rajouter monophotonique => « les microscopes monophotoniques qui… », sinon
faux à cause du multiphotonique.
QCM 2, item d : rajouter rubans de coupes sériées
QCM 9 : modifier l’intitulé : « Concernant la cytométrie en flux et la technique FACS…. », sinon item
d faux car l’ajout de charge ne se fait pas en cytométrie en flux simple.
QCM 11, item c : remplacer à doser par à mesurer
QCM n°1 : a, b, c et e
a) Vrai, le pouvoir de séparation se mesure avec la formule 0.61λ / n sinα. Si λ diminue, le
pouvoir de séparation diminue et est donc amélioré !
b) Vrai
c) Vrai, grossissement = produit du grossissement de la lentille et de l’objectif
d) Faux, 3 types = transmission, réflexion et réémission. Le contraste de phase et l’absorption
font partis de la transmission.
e) Vrai. En effet, les photons captés sont réémis dans toutes les directions, seule la faible
partie réémise en direction de l’objectif sera détectée. Beaucoup de photons seront
« perdus », il faut donc une plus grande puissance d’illumination.
QCM n°2 : a, b et d
a) Vrai, exemple de procédé physique = la congélation, exemple de procédé chimique = les résines
époxy
b) Vrai, la fixation permet de relier les structures subcellulaires entre elles et d’inactiver les enzymes.
c) Faux, la fixation a lieu avant l’enrobage !
d) Vrai
e) Faux, il faut faire une réhydratation avant la coloration car la plupart des colorants sont solubles
dans l’eau
QCM n°3 : a, c, d et e
a) Vrai, ce colorant permet de mettre en évidence la forme du noyau et des régions basophiles de la
cellule (REG, lysosomes)
b) Faux, ce sont des colorants acides qui vont se fixer sur des régions acidophiles.
A noter : on parle de colorants acides (ou basiques) et de régions acidophiles (ou basophiles) !
c) Vrai, le MGG est le colorant préférentiel en hématologie.
d) Vrai, les colorants cytochimiques fixent spécifiquement certaines substances présentent dans les
cellules, ex : le PAS.
e) Vrai
QCM n°4 : b, d et e
a) Faux, la méthode du frottis n’est applicable qu’à l’étude des cellules en suspension.
b) Vrai
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c) Faux, il n’y a ni fixation ni inclusion lors des extemporanées.
d) Vrai, cela évite de léser la préparation. En effet, la préparation n’étant pas fixée les enzymes sont
actives.
e) Vrai, comme il n’y a pas de fixation dans la méthode des extemporanées les enzymes ne sont pas
inactivées, elles peuvent donc être étudiées.
QCM n°5 : a
a)
b)
c)
d)
Vrai
Faux, le microscope à contraste de phase travaille en transmission
Faux, c’est le stéréomicroscope qui est utilisé pour les interventions chirurgicales
Faux, l’objet devient une source lumineuse donc on ne peut observer précisément sa forme et sa
dimension. Cependant, ce microscope donne une très bonne information sur la localisation.
e) Faux
QCM n°6 : f
a) Faux, le gain en pouvoir séparateur qu’il y aurait du avoir est annulé par le fait que les objets
deviennent des sources lumineuses. (Pour Rappel : PS = 0.61λ / n sinα).
b) Faux, ces techniques améliorent la netteté de l’image, mais pas la résolution qui est la même que
celle des autres microscopes : 0.2 μm en X et Y.
c) Faux, cette méthode même si elle parait simple en effet, nécessite une puissance informatique
importante et est donc peu utilisée.
d) Faux, afin de sélectionner le point qui nous intéresse, il faut placer le sténopé sur le plan image du
plan focal de l’objectif ! Les 2 plans doivent être confocaux. Le point focal varie en fonction des
objectifs.
e) Faux. Les tissus ne sont pas brulés car l’intensité des rayons délivrés par les lasers est brève.
QCM n°7 : a, c et d
Vrai, car la longueur d’onde du faisceau d’électron est plus faible que celle des photons
Faux, MEB, cryofracture et cryodécapage n’utilisent pas d’enrobage.
Vrai, ils traversent la préparation et permettent ainsi la formation de l’image.
Vrai, l’ombrage métallique permet de rendre les électrons secondaires sensibles à la topographie
de l’objet observé.
e) Faux, du MET ! Sinon aucun intérêt…. !
a)
b)
c)
d)
QCM n°8 : c
a)
b)
c)
d)
Faux, au MET, on utilise des grilles !!!
Faux, en MET on réalise une double fixation : glutaraldéhyde + acide osmique
Vrai
Faux, ici coloration spécifique => faire la coloration avant l’enrobage car les résines époxy ne se
dépolymérisent pas.
e) Faux, par des atomes de masse atomique élevée.
QCM n°9 : b, d, e
a) Faux La cytométrie en flux est une technique d’analyse qui s’accompagne éventuellement
d’une étape supplémentaire : le tri cellulaire.
b) Vrai Cf schéma
c) Faux C’est la mesure de la diffusion de la lumière.
d) Vrai On choisit arbitrairement d’attribuer aux cellules fluorescentes la charge + ou – et aux
cellules non fluorescentes l’autre charge.
e) Vrai Si il y a fluorescence, c’est que l’élément recherché est présent (analyse qualitative),
et on peut évaluer le pourcentage de cellules qui expriment cette fluorescence par rapport
à la population de départ (analyse quantitative).
QCM n°10 : e
a) Faux Rupture à basse température et de plus le RE, le Golgi et la membrane plasmique
sont fragmentés en microvésicules.
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b) Faux Plus le nombre d’unité Svedberg d’un élément est élevé, plus sa vitesse de
sédimentation est élevée.
c) Faux Taille, forme et densité.
d) Faux En gradient de densité à l’équilibre, la séparation repose sur la densité, c'est-à-dire
que les composants se stabilisent à une position où la densité de la solution est égale à
leur propre densité. C’est en vélocité que la vitesse de sédimentation intervient.
e) Vrai FACS = Fluorescence Activated Cell Sorting
QCM n°11 : c, e
a)
b)
c)
d)
e)
Faux Il est très souvent couplé à un contrôle biochimique.
Faux En MET
Vrai
Faux Activité cytochrome oxydase.
Vrai Car les microsomes sont des fractions de la membrane du RE et que la glucose 6
phosphatase est spécifique du RE.
QCM n°12 : e
a)
b)
c)
d)
e)
Faux, on introduit le réactif (substrat) de la réaction enzymatique.
Faux, DAPI  ADN mais en cytochimie.
Faux, pour les ligands oui mais les marqueurs sont non spécifiques.
Faux, fluorochromes = fluo donc observation en M. à fluorescence.
Vrai
QCM n°13 : a et d
a) Vrai
b) Faux, transcription = synthèse d’ARN à partir d’ADN donc utilisation d’uridine tritiée.
c) Faux, seules les macromolécules dont le précurseur radioactif est présent dans le milieu
d’incubation.
d) Vrai
e) Faux, étude ADN/ARN  précurseur = nucléotides radiomarqués ; étude protéique 
précurseur = AA radiomarqués
QCM n°14 : a, b, c
a)
b)
c)
d)
e)
Vrai : elle s’accumule dans les mitochondries
Vrai
Vrai
Faux : il existe des colorants vitaux
Faux : le DAPI met en évidence l’ADN. Les colorants utilisés dans le test de Brachet sont la
pyronine, qui colore l’ARN en rose, et le vert de méthyle, qui colore l’ADN en vert.
QCM n°15 : a
a) Vrai : FRAP = Récupération de la Fluorescence après Photoblanchiment
b) Faux : c’est l’immunomarquage qui met en jeu des anticorps.
Principe de la technique FISH :
dénaturation
 ADN bicaténaire
ADN monocaténaire
 Incubation avec la sonde d’ADN marqué puis rinçage (élimination de l’ADN non hybridé)
→ ADN bicaténaire hybride
c) Faux : c’est un tonneau bêta
d) Faux : que des cellules vivantes
e) Faux: EGF = Epidermal Growth Factor. On peut utiliser d’autres facteurs de croissance : EPO =
Erythropoïétine
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