Rôle du peptide LL-37 dans le cancer du sein

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UNIVERSITÉ FRANÇOIS – RABELAIS DE TOURS
ÉCOLE DOCTORALE Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant
Nutrition, Croissance et Cancer – UMR INSERM 1069
THÈSE présentée par :
Audrey GAMBADE
soutenue le : 18 décembre 2015
pour obtenir le grade de : Docteur de l’Université François – Rabelais de Tours
Discipline/ Spécialité : Science de la vie et de la Santé
Rôle du peptide LL-37 dans le cancer du sein :
Son interaction avec la membrane plasmique stimule
l’entrée de calcium et la migration cellulaire par
l’activation des canaux ioniques TRPV2 et BKCa
THÈSE dirigée par :
Monsieur WEBER Günther Professeur des Universités, Université François – Rabelais de Tours
Co-encadrée par :
Madame GOUPILLE Caroline Attachée de Recherche, CHU Bretonneau, Université de Tours
RAPPORTEURS :
Monsieur MESNIL Marc Professeur des Universités, Université de Poitiers
Monsieur PENNA Aubin Chargé de Recherche, HDR, Université de Rennes
JURY :
Monsieur De WAARD Michel Directeur de Recherche, Institut de Neurosciences de Grenoble
Madame GOUPILLE Caroline Attachée de Recherche, CHU Bretonneau, Université de Tours
Monsieur MESNIL Marc Professeur des Universités, Université de Poitiers
Monsieur PENNA Aubin Chargé de Recherche, HDR, Université de Rennes
Monsieur VANDIER Christophe Professeur des Universités, Université de Tours
Monsieur WEBER Günther Professeur des Universités, Université de Tours

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Remerciements
Je tiens tout d’abord à exprimer mes sincères remerciements au Pr. Michel DeWaard,
au Pr. Marc Mesnil et au Dr. Aubin Penna, d’avoir accepté de juger ce travail. Merci d’avoir
pris le temps de lire cette thèse avec attention. J’espère que la lecture de ce manuscrit et la
présentation de mon travail seront à la hauteur de vos espérances.
Je remercie les directeurs successifs de l’unité Inserm U1069 « Nutrition, Croissance et
Cancer », le Pr. Philippe Bougnoux et le Pr. Stephan Chevalier, de m’avoir accueillie au
laboratoire depuis mon master et de m’avoir donné l’opportunité de réaliser ce travail.
Je souhaite remercier sincèrement mes encadrants, le Pr. Günther Weber et le Dr.
Caroline Goupille. Je vous remercie d’avoir cru en moi depuis le début (plus que moi-même).
Merci pour vos conseils, votre gentillesse, votre patience et votre soutient dans les bons et les
mauvais moments. Ces trois années de thèse à vos côtés m’ont permis d’évoluer
professionnellement et personnellement. J’espère qu’il y aura une suite à ce travail car il reste
beaucoup de chose à faire ! (Surtout sur les lipides, Caro et bien sûr en microscopie !).
Je remercie également au Pr. Christophe Vandier, dans un premier temps pour avoir
accepté de faire partie de de mon jury de thèse. Ensuite, je vous remercie énormément, toi et le
Dr. Marie Potier-Cartereau, pour votre aide précieuse sur les canaux ioniques. Sans vous, ce
travail n’en serait pas là aujourd’hui. Merci pour la patience dont vous avez fait preuve pour
nous expliquer les subtilités des canaux (dont beaucoup m’échappent encore !) et pour tous vos
conseils. Merci aussi au Dr. Sébastien Roger pour ses conseils avisés, également sur les canaux
ioniques.
Merci au Dr. Agnès Delmas pour la synthèse du peptide modifié qui nous a permis
d’envisager de nouvelles perspectives et au Pr. Igor Chourpa pour son aide en microscopie
multispectrale.
Merci au Dr. Gaelle Fromont-Hankard et à Roseline Guibon pour leur expertise sur les
expériences d’immunohistochimie.
Un grand merci également à Julien Burlaud-Gaillard pour son expertise et sa réactivité
pour les expériences de microscopie. Je te remercie de m’avoir fait découvrir un nouveau
domaine qui me passionne particulièrement et j’espère pouvoir poursuivre cette découverte. Je
te remercie aussi pour tes conseils et nos discussions.

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Je tiens à remercier tous les chefs du laboratoire, Jean-François, Stéphane, Aurélie,
Philipe, Carine, Pierre, Michelle (et toute l’équipe biochimie) en espérant n’avoir oublié
personne. Merci beaucoup à Isa pour ta présence et ton aide au quotidien, sans toi il nous
manquerait toujours quelque chose ! Merci à Catherine pour tous ce que tu fais au quotidien et
pour nos discussions (sur les chats et les photos surtout !). Merci à Romain pour ta gentillesse
et ton aide en manip mais aussi pour tes interventions « bricolo ». Merci également à Jorge et
plus particulièrement à Ana pour ton aide sur les manips de Laurdan.
Je remercie également les petits stagiaires et plus particulièrement Florence et William
qui m’ont apporté leur aide sur le sujet, en espérant ne pas vous avoir traumatisé. Merci aux
anciens, Lucie la grande et la petite, Bilel et Ramez. Un merci tout particulier à Virginie. Merci
pour ton aide et tes conseils au labo mais également pour tes conseils personnels, ton soutien et
ton amitié !
Enfin, c’est le tour de mes co-thésards :
Je vais commencer par Emeline et Maxime. On a commencé ensemble et on va finir par
y arriver ensemble ! Ça n’a pas toujours été facile, malgré les prises de tête et les désaccords
on est resté soudé et heureusement qu’on s’aime bien avec tous les mots doux échangés !
Emeline, ma coupine (qui n’a pas toujours été sympa !), merci d’avoir toujours été à
mes côtés, de m’avoir soutenue dans les bons et les mauvais moments et jusqu’au bout. Merci
pour ces fous rires qui n’avaient pas toujours une explication mais qui nous ont fait le plus
grand bien. Merci pour ton aide en manip aussi, même si on en a pas fait beaucoup ensemble,
on a été super efficaces (enfin surtout toi !). Merci simplement pour ton amitié et j’espère que
les bons moments passés ensemble ne font que commencer. Je suis sûre que tu pourras bientôt
partir pour le rêve américain et je te souhaite tous le bonheur que tu mérites.
Maxime, on a échangé pas mal de « noms d’oiseaux », ou plutôt je t’en ai lancé
beaucoup, surtout pendant nos manip de fractionnement, et tes prouesses en western resterons
mémorables ! Plus sérieusement, je te remercie pour tous tes conseils et ton aide sur les canaux,
qui nous ont permis d’avancer énormément sur le sujet. Je te souhaite surtout bon courage pour
le post–doc mais je ne doute pas qu’avec ton cerveau surdimensionné qui fuse d’idées tu seras
bientôt prof !
Laure, même si maintenant tu es passée de l’autre côté, pour nos escapades photos, enfin
une seule en fait ! Je ne doute pas que tous se passera bien pour toi et je te souhaite plein de
bonnes choses pour la suite.

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Lucie, c’est aussi la fin pour toi, je te souhaite pleins de bonnes choses et j’espère que
tu trouveras le poste qui te plaira.
Julie, merci de nous avoir fait rire avec tes expressions inventées et les choses à ne pas
dire qui te sortent involontairement. Dans un an tu seras à notre place, alors je te souhaite
beaucoup de courage et plein de réussite dans les manips.
Fred, on n’a pas eu l’occasion de beaucoup discuter ou se croiser en manip mais je ne
doute pas que tu sortiras un truc, même n’importe quoi, avant l’année prochaine !
Je souhaite également plein de bonnes choses aux nouveaux thésards que je n’ai pas eu
le temps de bien connaître, Yann, Bruno, Céline, Sandy et Adeline.
Enfin, je remercie toutes les personnes que j’aurais pu oublier de citer.
Pour finir, je tiens à remercier ma famille. Un énorme merci à mes parents. Vous avez
toujours été là pour moi, sans vous je n’en serais pas là aujourd’hui. Vous avez toujours cru en
moi et vous m’avez soutenue quoi qu’il arrive. Maman, merci pour tous ce temps passé au
téléphone où tu m’as soutenue et encouragée même quand je n’y croyais plus, et merci pour
tout le reste. Merci Papa pour tous, pour ton soutien également et pour ton aide. Même s’ils se
sont fait plus rares ces derniers temps, les weekends passés à la campagne à vos côtés m’ont
fait le plus grand bien. Merci à mon « petit » frère Quentin pour ses encouragements, ses
compliments… (sans en avoir l’air), mais surtout pour son aide et sa relecture. Et merci à mon
petit Doudou, Nathan, ces weekends avec toi m’ont permis de retourner en enfance et de
décompresser quand j’en avais besoin.
Et enfin je remercie mon homme, Gaëtan. Tu as toujours été là, tu m’as soutenue et
surtout supporté pendant les moments difficiles. Aujourd’hui c’est le début d’une nouvelle page
pour nous…