Diagnostic des encéphalites de l’enfant Prof. Patrick GOUBAU Unité de virologie Université catholique de Louvain & Cliniques universitaires Saint-Luc Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Causes virales d’encéphalites aiguës • • • • • • • • • • Herpès simplex Rage (rhabdovirus) Encéphalite à tiques (flavivirus) West-Nile (flavivirus) Virus d’Epstein-Barr Cytomégalovirus Herpès B ou Herpes simiae Varicelle-zona Herpès 6 Adénovirus Mandell et al. Principles and practice of Infectious Diseases, 2005 Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Encéphalites post-infectieuses • • • • • • Rougeole (morbillivirus) Rubéole (togavirus) Oreillons (rubulavirus) Varicelle-zona Virus d’Epstein-Barr Grippe (influenza) Mandell et al. Principles and practice of Infectious Diseases, 2005 Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Encéphalites USA 1988-1997 N. Khetsuriaki et al. Clin Inf Dis 2002;35:175-82 16 14 13,7 12 10,6 10 8,1 8 5,1 6 7,1 cas/100.000 4,1 4 2 0 <1an 1-4 ans 5-19ans 2044ans Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 4564ans >64ans Diagnostic virologique des encéphalites • Diagnostic indirect: – Recherche d’anticorps IgM dans le sérum – Comparaison d’anticorps sériques et intrathécaux (généralement tardif) • Diagnostic direct: – Recherche du virus dans le LCR (généralement PCR ou RT-PCR) – Recherche du virus dans d’autres sites Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Encéphalite à Herpes simplex • Incidence de 2,3/million par an • HSV type 1 dans >95% des cas • Fréquence maximale de 5 à 30 ans et après 50 ans • Chez l’enfant généralement une primoinfection • Forme particulière: l’infection néonatale Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Diagnostic de l’encéphalite à HSV • Diagnostic préférentiel: détection d’ADN viral dans le LCR par PCR • Démonstration d’anticorps intrathécaux tardive • Dans le cas de l’infection néonatale, une PCR sur le sang peut être utile, ainsi que la recherche du virus dans des lésions Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Real time: SYBR Green Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Real time PCR: lecture Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Courbe du fusion Melting curve analysis Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Courbe du fusion (melting curve) Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 PCR en temps réel • Pas de contamination • Résultats rapides • Procédures standardisées • Automatisation possible • Resultats quantitatifs Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Diagnostic herpesviridae • HSV, VZV, EBV, CMV, HHV-6 • De préférence: PCR sur LCR (attention interprétation HHV-6). Minimum 250µl et 400 µl si également entérovirus • EBV: diagnostic plus rapide: VCA IgM • VZV: IgM positives si primoinfection Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Diagnostic PCR sur LCR en virologie St Luc 2004 • HSV: 167 => 8+ • CMV: 50 => 0+ • EBV: quelques échantillons => 0+ • VZV: 48 => 3 + • Entérovirus: 104 =>14+ Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005 Diagnostic autres virus • Nécessite envoi extérieur: – Rage – West-Nile – Encéphalite à tiques – Adénovirus • Rougeole, rubéole, oreillons: IgM • Influenza: détection du virus dans sécrétions respiratoires. Si tardif: RT-PCR sur LCR (envoi extérieur, faible sensibilité) Séminaire de Pathologie Infectieuse (UCL) - 25 avril 2005